elisa法及膠體金法檢測(cè)hcv抗體的應(yīng)用分析

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1、ELISA法及膠體金法檢測(cè)HCV抗體的應(yīng)用分析樊少勇（廣丙玉林市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科537000）【摘要】目的探討和研究酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）檢測(cè)HCV的特異性。方法釆用EUSA法進(jìn)行344例傳染病篩查患者血清的檢測(cè)，同時(shí)采用膠體金法對(duì)同組患者進(jìn)行測(cè)定作為對(duì)比。結(jié)果ELISA法檢測(cè)出抗HCV陽(yáng)性率為4.07%（14/344）,膠體金法檢測(cè)出陽(yáng)性率為2.62%（9/344）。結(jié)論ELISA法檢測(cè)抗HCV的陽(yáng)性率明顯高于膠體金檢測(cè)法，但其特異性及敏感性在木次試驗(yàn)中并未能完全體現(xiàn)，仍需觀察取證?！娟P(guān)鍵詞】丙型

2、肝炎酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)z體金吸附試驗(yàn)【中圖分類號(hào)】R446【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-1752（2013）01-0156-01丙型肝炎病毒（HCV）是導(dǎo)致慢性肝病的主要病原之一，由于在感染HCV之后病情多轉(zhuǎn)入慢性，絕大多數(shù)的患者都會(huì)演變成慢性感染，最終引發(fā)肝硬化、肝癌等終末期疾病，目前臨床上對(duì)于此類疾病的預(yù)防和治療上尚沒(méi)有特效藥物,所以在對(duì)于此類疾病的篩查和早期診斷上就顯得尤為重要［1?2］。膠體金法是臨床上應(yīng)用較早的一種非檢測(cè)技術(shù)，目前己經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床的各個(gè)領(lǐng)域，雖然它具有方便、快捷、設(shè)備需求度低的

3、優(yōu)勢(shì)，但是在準(zhǔn)確度上仍存在一定的劣勢(shì)，而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（EUSA法）則具有較好的評(píng)價(jià)。筆者就此兩種方法對(duì)HCV游離抗原的檢測(cè)效果進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。1臨床資料與方法1.1臨床資料選擇我院自2009年1月至2012年1月之間門(mén)診及住院患者進(jìn)行傳染病篩查的344例作為研究對(duì)象，其中男性患者196例，女性患者148例，年齡在19?74歲之間，平均年齡49.1±12.4歲。1.2儀器與方法實(shí)驗(yàn)儀器及試劑包括：酶標(biāo)儀（美國(guó)產(chǎn)ELX800NB型酶標(biāo)儀）、洗板機(jī)（芬蘭產(chǎn)Wellwash4mk2型）、低

4、溫離心機(jī)、抗HCVELISA試劑（北京萬(wàn)泰生物制藥有限公司提供)、抗HCV金標(biāo)試紙條(廈門(mén)英科新創(chuàng)生物科技制藥有限公司提供)，確保以上所有一起運(yùn)轉(zhuǎn)正常，試劑均在保質(zhì)期內(nèi)使用。方法：所有受檢者均在清晨空腹抽取靜脈血4?6ml,用離心機(jī)進(jìn)行血清分離之后分為兩份，分別用EUSA法及膠體金法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，ELISA法比色采用雙波長(zhǎng)450nm/630nm,參考波長(zhǎng)為630nm，s/co值≥l者視為陽(yáng)性；膠體金、法觀察試紙條是否在檢測(cè)線和對(duì)照線各出現(xiàn)紫紅色線條，僅對(duì)照線條出現(xiàn)者為陰性，兩者皆有則為陽(yáng)性，未出現(xiàn)線條視

5、為實(shí)驗(yàn)失敗。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)均采用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間對(duì)比采用t進(jìn)行檢驗(yàn)，方差值P<0.05視為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果ELISA法檢測(cè)出抗HCV陽(yáng)性率為4.07%(14/344),膠體金法檢測(cè)出陽(yáng)性率為2.62%(9/344)。3討論目前臨床上已經(jīng)將HCV抗體檢測(cè)作為輸血、手術(shù)以及腔鏡檢查前的必做項(xiàng)0,這更好的防止了HCV的傳播。膠體金法檢測(cè)HCV具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、方便、快捷且無(wú)需實(shí)驗(yàn)儀器的特點(diǎn)，在臨床上被廣泛應(yīng)用。但是膠體金法作為HC

6、V快檢的方法仍存在冇假陰性的可能，分析主要原因冇人為因素及環(huán)境因素等，檢測(cè)結(jié)果往往受到檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)短、反應(yīng)是否充分、氣溫改變等因素的影響。此外，標(biāo)本血量不足或過(guò)量、過(guò)濾膜破裂、血液滲出導(dǎo)致檢測(cè)線模糊或不易觀察產(chǎn)生主觀判斷失誤等都是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因。從本文數(shù)據(jù)中我們可以看出,ELISA法檢測(cè)HCV抗體明顯更由于膠體金法，從實(shí)驗(yàn)嚴(yán)密程度上而言ELISA也更勝-籌，但是由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程較為復(fù)雜，而且對(duì)于實(shí)驗(yàn)儀器要求較高，故在基層醫(yī)院的開(kāi)展十分首先。所以建議膠體金法僅作為初篩之用，復(fù)檢可用ELISA法進(jìn)行對(duì)照，防止HCV的

7、漏檢和傳染的發(fā)生，尤其是對(duì)于需要進(jìn)行腔鏡檢查的患者更是應(yīng)當(dāng)做到防止疏漏［3］。在工作中檢驗(yàn)人員砬當(dāng)規(guī)范操作步驟，避免主觀因素造成錯(cuò)誤檢測(cè)結(jié)果，對(duì)于相關(guān)知識(shí)應(yīng)當(dāng)熟練掌握，避免出現(xiàn)對(duì)于僅一條陽(yáng)性線而無(wú)陰性線(強(qiáng)陽(yáng)性)判斷為陰性結(jié)果等誤判事件[4】。綜上所述，ELISA法檢測(cè)抗HCV的陽(yáng)性率明顯高于膠體金檢測(cè)法，但是由于其實(shí)驗(yàn)過(guò)程較為繁瑣II實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，并不如膠體金法方便、快捷，故在臨床應(yīng)用方面比較受限。而膠體金法能夠快速的對(duì)標(biāo)本做出檢測(cè)，但是由于艽存在假陰性的概率較大，建議對(duì)疑似病例采用ELISA進(jìn)行復(fù)檢，防止造

8、成傳播。兩者作為篩査HCV抗體的重要手段,對(duì)于此類疾病的早期發(fā)現(xiàn)和預(yù)防冇著重要意義，恰當(dāng)?shù)氖褂媚軌蚋玫木S護(hù)患者的健康。參考文獻(xiàn)[1】陳坤，張賀秋,宋曉國(guó)，等.金表滲透法快速檢測(cè)血清中丙型肝炎病毒抗體[」].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,17(2):1.[2]KimberlyB,,HerbertH,GrazynaL,etal.CirculatingDdimerlevelsarebette