苦瓜提取物的抑菌活性研究

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1、本科生畢業(yè)論文（二零一三屆）題目:苦瓜提取物的抑菌活性研究系別：制藥與食品科學(xué)學(xué)院專業(yè)：藥物制劑班級(jí)：2009級(jí)7班作者姓名：金銹梅學(xué)號(hào)：200907050209指導(dǎo)教師：董艷輝職稱：高級(jí)實(shí)驗(yàn)師學(xué)歷：研究生論文成績(jī)：2012年12月摘要1關(guān)鍵詞1Abstract1Keywords刖吞1儀器與材料21.1試驗(yàn)材料及主要試劑21丄1試驗(yàn)原料21.1.2藥品21.1.3供試翩申21.1.4培養(yǎng)基21.2試驗(yàn)儀器22試驗(yàn)方法32.1苦瓜提取物的制備32.2菌種活化及菌懸液的制備32.3濾紙片法測(cè)定抑菌活性32.4苦瓜提取物最低抑菌濃度（MIC）的

2、測(cè)定43結(jié)果與分析43.1不同苦瓜提取物的抑菌活性43.2苦瓜乙醇提取物的最低抑菌濃度（MIC）44結(jié)論5致謝5參考文獻(xiàn)5苦瓜提取物的抑菌活性研究制藥與食品科學(xué)學(xué)院藥物制劑專業(yè)2009級(jí)金堺梅摘要：目的通過測(cè)定苦瓜汁、苦瓜70%乙醇提取物和苦瓜蛋白對(duì)供試菌種金黃色葡萄球菌和大腸桿菌抑菌作用的大小，確定苦瓜提取物較為有效的提取工藝，再進(jìn)一步測(cè)定苦瓜提取物的最低抑菌濃度。方法通過對(duì)照法，采用濾紙片法測(cè)定抑菌作用。結(jié)果表明：苦瓜汁,乙醇提取物和苦瓜蛋白對(duì)細(xì)菌均有不同的抑制作用，其中乙醇提取物的抑菌效果較為明顯,并且測(cè)定出其對(duì)金黃色葡萄球菌及大腸

3、桿菌的最低抑菌濃度（MIC）分別為12.5mg/mL、25mg/mLo關(guān)鍵詞：苦瓜；提収物；抑菌活性：最低抑菌濃度刖B苦瓜為葫蘆科苦瓜屬植物苦瓜的果實(shí)，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極其豐富，并且藥用價(jià)值也很高，是人們?nèi)粘Ｊ秤玫氖卟?，種植范圍廣，價(jià)格低廉，食用安全?？喙闲晕犊嗪哂星鍩峤舛?、滋養(yǎng)強(qiáng)壯、降低血糖等功效，深受人們歡迎。近年來大量研究證明，苦瓜中含有多種活性成分，具有治療糖尿病，抗病毒，抗菌，抗腫瘤,抗艾滋病，抗白血病，抗氧化，抗蠕蟲，抗?jié)裾?，抗?jié)?，墮胎，通?jīng)，抗瘧、牛皮癬〔宀等藥理作用。因此，很多國(guó)內(nèi)外學(xué)者越來越重視對(duì)苦瓜的研究開發(fā)。隨著社會(huì)

4、經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人民的生活水平不斷提高，大眾對(duì)生命健康的關(guān)注以及對(duì)食品衛(wèi)生的安全口趨重視，同樣對(duì)防腐劑Z類的食品添加劑的要求也越來越高，不但注重其安全性，更加追求添加劑的營(yíng)養(yǎng)化和功能化。將苦瓜的抑菌作用應(yīng)用于天然防腐劑中，既可以提升苦瓜的價(jià)值，乂可以為食品工業(yè)發(fā)掘新原料。本文探究苦瓜提取物對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的抑菌活性及最低抑菌濃度，旨在為苦瓜的深加工及新型安全天然食品防腐劑的開發(fā)提供依據(jù)。1儀器與材料1.1試驗(yàn)材料及主要試劑1.1.1原料：新鮮苦瓜：購(gòu)于通化市蔬菜市場(chǎng)；1.1.2主要試劑：乙醇、苯甲酸鈉、硼酸、固體硫酸鍍均為分析純

5、。1.1.3供試菌種：金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)＞大腸桿菌(Escherichiacoli)以上菌種均由順勃牛物工程技術(shù)(北京)有限公司牛產(chǎn)；1.1.4培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白月東由上海匯合生物科技有限公司，按說明書配制。1.2試驗(yàn)儀器：BL600A電子天平：常熟雙杰測(cè)試儀器廠；SENCOw201恒溫水浴鍋：上海中生科技有限公司；SHB?1II臺(tái)式高速離心機(jī)：湖南星科科學(xué)儀器有限公司；GZX-9070ME數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司；LX-C35L自動(dòng)電熱壓力蒸汽滅菌器：合肥華泰醫(yī)療設(shè)備有限公司；SW-C

6、J-1F超凈工作臺(tái):蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司；LRH-250A生化培養(yǎng)箱：廣東省醫(yī)療器械廠；2試驗(yàn)方法2.1苦瓜提取物的制備苦瓜汁的制備：新鮮苦瓜，切碎之后搗碎，四層紗布過濾，得苦瓜汁，備用。乙醇提取物的制備：新鮮苦瓜一清洗一去瓢一切片-＞50°C烘干一粉碎-＞過40目篩，得苦瓜粉?？喙戏郯?:20的固液比，以70%乙醇溶液60°C水浴浸提2h,過濾，將濾渣用同樣的方法浸提兩次，合并濾液，加熱濃縮得乙醇浸提物。苦瓜蛋白的制備：苦瓜籽50°C烘干，粉碎后過40目篩。取適量苦瓜籽粉，加10倍體積的50mmol/L硼酸緩沖液(PH=8.2),4

7、°C緩慢攪拌浸提12h,5000rpm離心20min,取上清液加固體硫酸鍍至80%飽和度，4°C緩慢攪拌3h,離心，收集沉淀物干燥即得苦瓜蛋白，蛋白含量為72.3%o2.2菌種活化及菌懸液的制備在超凈工作臺(tái)上將供試菌種接入斜而培養(yǎng)基，將培養(yǎng)基置于37°C恒溫培養(yǎng)箱屮培養(yǎng)24ho然后用接種環(huán)挑取上述活化好的菌種，用無菌生理鹽水配制成(1()6?IO?)cfu/mL的菌懸液，備用。2.3濾紙片法測(cè)定抑菌活性用打孔器將濾紙制成直徑為6mm的小圓濾紙片，干熱滅菌后備用。將配制好的牛肉膏蛋口腺培養(yǎng)基移入250mL三角瓶中，121°C高壓蒸汽滅菌30

8、min,在超凈工作臺(tái)上冷卻至50-60°C，向每個(gè)培養(yǎng)皿屮加入約15mL的培養(yǎng)基，凝固后用無菌移液器加入0.5mL的菌懸液，用涂布器將菌液均勻的涂在培養(yǎng)基上。將濾紙片放入不同樣品液及無菌水和2