雙酚a亞急性染毒對(duì)小鼠造血功能實(shí)驗(yàn)方案

《雙酚a亞急性染毒對(duì)小鼠造血功能實(shí)驗(yàn)方案》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。

1、雙酚A亞急性染毒對(duì)小鼠造血功能實(shí)驗(yàn)方案［摘要］雙酚A(bisphenolA,BPA)是酚類(lèi)化合物中具代表性的一類(lèi)環(huán)境雌激素污染物。多應(yīng)用于食品和飲料碳酸聚酯包裝材料、牙齒固封劑、金屬罐頭樹(shù)脂內(nèi)膜等，能夠模擬和干擾動(dòng)物體內(nèi)雌激素的正常代謝和生理活動(dòng)。但目前，含雙酚A的塑料容器，在世界上絕大多數(shù)國(guó)家包括中國(guó)在內(nèi)都在正常使用。人們忽視了雙酚A的危害。因此，對(duì)雙酚A危害的研究意義重大。［關(guān)鍵詞］雙酚A類(lèi)環(huán)境雌激素危害［中圖分類(lèi)號(hào)］R965［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A［文章編號(hào)11009-5349(2013)08-0104-01

2、一、國(guó)內(nèi)外對(duì)于雙酚A的研究現(xiàn)狀目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)于雙酚A的毒性研究資料，主要為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)調(diào)查研究。例如，研究表明雪貂對(duì)雙酚A非常敏感，有時(shí)持續(xù)性發(fā)情就會(huì)導(dǎo)致骨髓細(xì)胞再生不良；犬對(duì)雙酚A也比較敏感，使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的再生障礙性貧血，甚至患睪丸支持細(xì)胞腫瘤的雄犬也有發(fā)生再生障礙性貧血的記錄。嚙齒類(lèi)動(dòng)物注射雙酚A可引起血液學(xué)改變，貓則表現(xiàn)出很強(qiáng)的雌激素毒性耐受性。［1］更有資料顯示雙酚A具有一定的胚胎毒性和致畸性，可明顯增加動(dòng)物卵巢癌、前列腺癌、白血病等癌癥的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn)雙酚A屬于低毒性化學(xué)物。通常情況下，雙酚A對(duì)

3、皮膚、角膜、消化道和呼吸道具有中等強(qiáng)度刺激性，對(duì)鼠類(lèi)具發(fā)育毒性。動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雙酚A具有模擬雌激素代謝的效果，即使是極低的劑量也能使動(dòng)物產(chǎn)生早熟、前列腺增長(zhǎng)、精子數(shù)目下降等作用。二、國(guó)內(nèi)外雙酚A使用現(xiàn)狀直至目前，一些國(guó)家已經(jīng)對(duì)雙酚A采取了限制措施：挪威：最早將雙酚A納入受限物質(zhì)的應(yīng)是原定于2008年1月1日生效，后因許多議題尚未達(dá)成共識(shí)而延期的挪威PoHS指令，在其對(duì)消費(fèi)性產(chǎn)品中的禁止使用的10種物質(zhì)中就包括雙酚A(BPA)o美國(guó)：2009年3月份提案禁止在“可重復(fù)使用的食品容器”和“其他食品容器”中使用(B

4、PA)o這一禁令在正式通過(guò)180天后開(kāi)始生效。中國(guó)：2011年5月30日，衛(wèi)生部等6部門(mén)對(duì)外發(fā)布公告稱(chēng)，鑒于嬰幼兒屬于敏感人群，為防范食品安全風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)嬰幼兒健康，禁止雙酚A用于嬰幼兒奶瓶。但是最近的研究發(fā)現(xiàn)，有超過(guò)90%的美國(guó)人體尿樣中檢測(cè)到了雙酚A[2],這意味著雙酚A仍在被大量使用。雙酚A對(duì)健康有害已經(jīng)是一個(gè)不言自明的結(jié)論，但大部分人一直以為：日常生活環(huán)境中人們接觸的雙酚A濃度很低，不足以構(gòu)成對(duì)人體的危害。在這樣的認(rèn)識(shí)下，雙酚A被人們廣泛應(yīng)用。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物28日齡健康的清潔級(jí)ICR小

5、鼠，體重18-23g,雌性小鼠15只，雄性小鼠15只，共30只。（二）實(shí)驗(yàn)試劑和藥品雙酚A：金龍魚(yú)花生油。（三）實(shí)驗(yàn)器材lml注射器；小鼠灌胃針頭，冷凍離心機(jī)，冰箱，SysmexF-820半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定。（四）實(shí)驗(yàn)步驟用金龍魚(yú)花生油將BPA配置成0.012mg/ml,0.12mg/ml兩種濃度的溶液，小鼠的灌胃體積為0.lml/30g/bw,每日上午7點(diǎn)15分灌胃。將小鼠雌雄分籠喂養(yǎng)，晝夜12小時(shí)交替，室溫控制在18°C-22°C,濕度控制在50%-60%,食物與水可以自由攝取。待小鼠適應(yīng)1周后，把

6、雄鼠隨機(jī)分為40、400Ug/kg/dayBPA劑量染毒組和對(duì)照組，每組雄鼠5只；同時(shí)雌鼠隨機(jī)分為40、400Ug/kg/dayBPA劑量染毒組和對(duì)照組，每組雌鼠5只。從第2周開(kāi)始灌胃染毒，染毒持續(xù)30天，對(duì)照組（n=10）灌胃溶媒花生油，灌胃體積與時(shí)間同染毒組。染毒結(jié)束后，處死動(dòng)物頸動(dòng)脈采血，肝素抗凝，re保存?zhèn)溆?，檢測(cè)指標(biāo)采用SysmexF-820半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定，嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書(shū)操作。（五）檢測(cè)指標(biāo)1.小鼠血液紅細(xì)胞系各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）.紅細(xì)胞壓積（HCT）、

7、紅細(xì)胞的平均體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）。2.小鼠血液白細(xì)胞系各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、淋巴細(xì)胞百分比（W-SCR）、中性粒細(xì)胞比率（W-LCR）、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值（W-SCC）、中性粒細(xì)胞絕對(duì)值（W-LCC）o3.小鼠血液血小板系各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)：血小板量（PLT）、血小板分布寬度（PDW）、平均血小板體積（MPV）。（六）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS10.0統(tǒng)汁軟件進(jìn)行分析，組間比較采用方差分析，P