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《bcl-2基因cpg島甲基化對雞與鵪鶉屬間雜交種早期胚胎發(fā)育的影響》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：密級：學(xué)號：2009108004單位代碼：10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文bcl-2基因CpG島甲基化對雞與鵪鶉屬間雜交種早期胚胎發(fā)育的影響學(xué)位申請人劉唯依指導(dǎo)教師廖廖和榮（教授）榮教授申請學(xué)位門類別農(nóng)學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱動物遺傳育種與繁殖研究方向動物遺傳學(xué)所在學(xué)院動物科技學(xué)院中國〃新疆〃石河子2012年6月Theimpactonembryonicdevelopmentwithearlythebcl-2geneCpGislandmethylationinchicken-quailhybridsADissertationSubmit
2、tedtoShiheziUniversityInFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricμltureByWeiyiLiu(Genetics)DissertationSupervisor:Prof.LiaoHe-rongJune,2012石河子大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢
3、獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中作了明確的說明并表示謝意。研究生簽名：時間：年月日使用授權(quán)聲明本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文在學(xué)校圖書館保存并允許被查閱。有權(quán)自行或許可他人將學(xué)位論文編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫提供檢索服務(wù)。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。研究生簽名：時間：年月日導(dǎo)師簽名：時間：年月摘要【目的】雞與鵪鶉屬間雜交面臨著受精率低和孵化率低等遠(yuǎn)緣雜交不親和性，特別是雜交種早期胚胎大量死亡，嚴(yán)重影響雞與鵪鶉
4、屬間雜交的推廣應(yīng)用。本研究在對雞、鵪鶉及其雜交種胚胎樣本進(jìn)行性別鑒定的基礎(chǔ)上，采用與細(xì)胞凋亡和增殖相關(guān)的bcl-2基因的啟動子區(qū)CpG島甲基化檢測和熒光定量PCR驗(yàn)證的方法，對比分析bcl-2基因的甲基化程度和基因表達(dá)水平，以探討bcl-2基因甲基化對雞與鵪鶉屬間雜交種早期胚胎死亡的影響作用?！痉椒ā浚?）用CHD基因分析雞、鵪鶉及其雜交種性別比率采集雞、鵪鶉及其雜交種胚胎胚齡為60h、66h、72h、84h、96h、108h、120h、132h、144h、156h、168h（7d）共11個時間點(diǎn)的胚胎組織樣并提取基因組DNA，孵化雜交種
5、蛋2465枚，采集胚胎樣550枚（每個時間點(diǎn)采集50枚，共11個時間點(diǎn)）,通過PCR的方法選擇與性別分化相關(guān)的CHD基因進(jìn)行性別鑒定。（2）用MSP方法對雞、鵪鶉及其雜交種胚胎組織中bcl-2基因進(jìn)行甲基化程度檢測。采用甲基化特異性PCR(MSP)方法對雞、鵪鶉及其屬間雜交種早期胚胎發(fā)育至60h、66h、72h、84h、96h、108h、120h、132h、144h、156h、168h11個不同胚齡胚胎組織bcl-2基因啟動子區(qū)CpG島甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測與對比分析，用甲基化引物擴(kuò)增出182bp的目的片段即判定為甲基化狀態(tài)，而用非甲基化引物
6、能擴(kuò)增出片段長為181bp的目的條帶就說明該bcl-2基因發(fā)生了非甲基化?！窘Y(jié)果】（1）雜交種蛋孵化至60h時其受精率僅能達(dá)到13.7%；當(dāng)母本朝鮮鵪鶉達(dá)到其產(chǎn)蛋高峰期時，受精率則有所提高，孵化至156h可達(dá)35.7%，總體的平均受精率為22.3%。（2）雞和鵪鶉胚胎的各時間點(diǎn)雌雄比均趨近于1:1，雞胚和鵪鶉胚的總體雌性百分率為49.697%和52.424%，與之相對應(yīng)的二者的總體雄性百分率為50.303%和47.576%，雌雄比平均值比分別約為1和1.04；而雜交種胚胎性別的鑒定結(jié)果則與雞、鵪鶉明顯不同，在胚胎發(fā)育至72h-168h時平
7、均雄性百分率為72.5%，顯然遠(yuǎn)高于雌性百分率27.5%，所有時間點(diǎn)上的總體雌雄比率為1:4，雌性胚胎枚數(shù)有明顯差異。（3）正常發(fā)育的雞胚和鵪鶉胚齡在60h、66h、72h、120h大部分樣本均呈高甲基化狀態(tài)，鵪鶉胚胎在96h和108h鵪鶉胚為非甲基化狀態(tài)，雞胚在96h和108h仍然為甲基化狀態(tài)；而雞與鵪鶉屬間雜交種胚胎在60h、66h、72h、96h、108h和120h則與雞、鵪鶉明顯不同，呈現(xiàn)出甲基化或非甲基化無規(guī)律性并存甚至于檢測不到甲基化狀態(tài)，但在84h則只檢測到非甲基化狀態(tài)?！窘Y(jié)論】（1）雜交種早期胚胎的雌性胚胎在發(fā)育過程中出現(xiàn)
8、性別分化異常而導(dǎo)致大批死亡。（2）雜交種早期胚胎組織中bcl-2基因的甲基化呈異常狀態(tài)，是影響胚胎發(fā)育進(jìn)程和造成胚胎早期死亡的原因之一。關(guān)鍵詞：bcl-2基因;基因甲基化;雞與鵪鶉；雜交胚胎；
