雞trpv6 rna干擾質粒的構建及其對成骨細胞鈣轉運基因表達的影響

雞trpv6 rna干擾質粒的構建及其對成骨細胞鈣轉運基因表達的影響

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1、萬方數(shù)據(jù)THECoNSTRUCTIoNoFTRPV6RNAINTERFERENCEPLASMIDANDITSEFFECToNCALCIUMTRANSPoRTGENESINCHICKENoSTEoBLASTSByZhangJieSupervisedbyProfessorHouJiafaATHESISSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementForTheMasterDegreeoftheAgronom

2、yCompletedinMay,2014CommencementinJune,2014萬方數(shù)據(jù)本研究由國家自然科學基金(項目編號:31272618,30972234)資助萬方數(shù)據(jù)原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文,是本人在導師的指導下,獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者(需親筆)簽名:j瓦丸沙7甲年莎月

3、9日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權南京農(nóng)業(yè)大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編學位論文。保密口,在——年解密后適用本授權書。本學位論文屬于不保密彭(請在以上方框內(nèi)打“√”)學位論文作者(需親筆)簽名:導師(需親筆)簽名:f%西壓嬸年<月中日沁£q年u后月呻萬方數(shù)據(jù)目錄目錄摘要??????????????

4、??????????????????????????????.IABSTRACT..................?....?......??........?....?..............?????????........??....?.III縮略語?????????????????????????????????V前言????????????????????????????????.VII上篇文獻綜述?????????????????????????????1第一章瞬時受體電位(TRP)鈣離

5、子通道在骨穩(wěn)態(tài)中的作用?????????.11細胞外鈣穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)及對骨穩(wěn)態(tài)的作用????????????????22骨細胞內(nèi)的鈣離子信號系統(tǒng)?????????????????????42.1破骨細胞內(nèi)的鈣信號系統(tǒng)???????????????????.42.2軟骨細胞內(nèi)的鈣信號系統(tǒng)???????????????????.42.3成骨細胞內(nèi)的鈣信號系統(tǒng)???????????????????.43TRP通道在骨生物學中的作用????????????????????53.1TRPV6??????????????

6、??????????????????????63.2TRPV5???????????????????????????????????..63.3TIov4????????????????????????????????????73.4TRPV2????????????????????????????????????.93.5TI沖Vl????????????????????????????????????9參考文獻?????????????????????????????..1l下篇試驗研究???????

7、?????????????????????..17第二章雞TRPV6基因RNA干擾質粒的構建???????????????171材料與方法???????????????????????????.181.1主要儀器??????????????????????????181.2主要試劑??????????????????????????181.3TRPV6特異性siRNA序列的設計???????????????.181.4shIⅢA序列DNA模板的設計?????????????????191.5shRNA與p

8、SIREN-RetroQ-ZsGreen載體的連接??????????201.5.1兩條shRNA的DNA單鏈退火形成雙鏈shRNA???????201.5.2雙鏈shRNA與pSIREN—RetroQ—ZsGreen載體的連接?????201.6轉化及擴增重組質粒?????????????????????201.7按堿裂解法抽提重組質粒???????????????????2l萬方數(shù)據(jù)雞"I'RPV6RNA干擾質粒的構建及其

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