雞trpv6 rna干擾質(zhì)粒的構(gòu)建及其對(duì)成骨細(xì)胞鈣轉(zhuǎn)運(yùn)基因表達(dá)的影響

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)THECoNSTRUCTIoNoFTRPV6RNAINTERFERENCEPLASMIDANDITSEFFECToNCALCIUMTRANSPoRTGENESINCHICKENoSTEoBLASTSByZhangJieSupervisedbyProfessorHouJiafaATHESISSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementForTheMasterDegreeoftheAgronom

2、yCompletedinMay,2014CommencementinJune,2014萬(wàn)方數(shù)據(jù)本研究由國(guó)家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目編號(hào):31272618,30972234)資助萬(wàn)方數(shù)據(jù)原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:j瓦丸沙7甲年莎月

3、9日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密口,在——年解密后適用本授權(quán)書(shū)。本學(xué)位論文屬于不保密彭(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:導(dǎo)師(需親筆)簽名:f%西壓嬸年<月中日沁£q年u后月呻萬(wàn)方數(shù)據(jù)目錄目錄摘要??????????????

4、??????????????????????????????.IABSTRACT..................?....?......??........?....?..............?????????........??....?.III縮略語(yǔ)?????????????????????????????????V前言????????????????????????????????.VII上篇文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????1第一章瞬時(shí)受體電位(TRP)鈣離

5、子通道在骨穩(wěn)態(tài)中的作用?????????.11細(xì)胞外鈣穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)及對(duì)骨穩(wěn)態(tài)的作用????????????????22骨細(xì)胞內(nèi)的鈣離子信號(hào)系統(tǒng)?????????????????????42.1破骨細(xì)胞內(nèi)的鈣信號(hào)系統(tǒng)???????????????????.42.2軟骨細(xì)胞內(nèi)的鈣信號(hào)系統(tǒng)???????????????????.42.3成骨細(xì)胞內(nèi)的鈣信號(hào)系統(tǒng)???????????????????.43TRP通道在骨生物學(xué)中的作用????????????????????53.1TRPV6??????????????

6、??????????????????????63.2TRPV5???????????????????????????????????..63.3TIov4????????????????????????????????????73.4TRPV2????????????????????????????????????.93.5TI沖Vl????????????????????????????????????9參考文獻(xiàn)?????????????????????????????..1l下篇試驗(yàn)研究???????

7、?????????????????????..17第二章雞TRPV6基因RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建???????????????171材料與方法???????????????????????????.181.1主要儀器??????????????????????????181.2主要試劑??????????????????????????181.3TRPV6特異性siRNA序列的設(shè)計(jì)???????????????.181.4shIⅢA序列DNA模板的設(shè)計(jì)?????????????????191.5shRNA與p

8、SIREN-RetroQ-ZsGreen載體的連接??????????201.5.1兩條shRNA的DNA單鏈退火形成雙鏈shRNA???????201.5.2雙鏈shRNA與pSIREN—RetroQ—ZsGreen載體的連接?????201.6轉(zhuǎn)化及擴(kuò)增重組質(zhì)粒?????????????????????201.7按堿裂解法抽提重組質(zhì)粒???????????????????2l萬(wàn)方數(shù)據(jù)雞"I'RPV6RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建及其

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