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1、分類號(hào)：112—031密級(jí)：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位口學(xué)校代碼：學(xué)號(hào)：學(xué)科門類：lO0622010602718醫(yī)學(xué)夭洱醬科六垮了lA鞫JIN酗菱DleA薹_U鞫lVERSl鼉1碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目：活血開竅湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷NO含量及細(xì)胞凋亡的影響TITLEEffectofHuoXueKaiQiao—decoctionontheNOcontentandcellapoptosisinmodelratswithcerebralischemia—reperfusionlnjury一級(jí)學(xué)科：中西醫(yī)結(jié)合二級(jí)學(xué)科：
2、中西醫(yī)結(jié)合臨床論文作者：張麗麗指導(dǎo)教師：李平天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明IIIIIMMIHIIIIIIIIUlUlIIIIY2396470本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：襲壓—翻R期：糾拜r月?9日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即
3、：學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)。本論文屬于保密口，在——年解密后適用本授權(quán)書。不保密區(qū)Z(請(qǐng)?jiān)谙鄬?duì)應(yīng)的方框內(nèi)打“√”)學(xué)位論文導(dǎo)師期：功B鉉膨日期：訓(xùn)弓鋱黟日天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要背景與目的腦血管病是嚴(yán)重威脅人類尤其是中老年人健康的常見(jiàn)病、多發(fā)病，具有高發(fā)病率、高致殘率和高致死率的特點(diǎn)，其中70．80％是缺血性腦血管病IlJ。腦缺血再灌注損傷是缺血性腦梗死區(qū)在血液供應(yīng)恢復(fù)后出現(xiàn)的更嚴(yán)重的腦損傷，其損傷發(fā)
4、生機(jī)制比較復(fù)雜，抑制再灌注損傷是治療缺血性腦血管病的重要環(huán)節(jié)。盡管國(guó)內(nèi)外研究者對(duì)此進(jìn)行了大量的研究并取得一定進(jìn)展，但仍缺乏有針對(duì)性的治療策略【2．j1中藥治療缺血性腦血管病已有悠久的歷史，具有療效確切、不良反應(yīng)少、藥理作用廣泛等優(yōu)點(diǎn)，可以從多個(gè)層次和多個(gè)環(huán)節(jié)上起到保護(hù)作用，特別適合腦缺血所致的多種病理改變，日益引起醫(yī)學(xué)界的關(guān)注14·J。．．．活血開竅湯是導(dǎo)師李平教授治療缺血性腦卒中的經(jīng)驗(yàn)方，該方由天麻、牛膝、寄生、遠(yuǎn)志、葛根、川芎、地龍、丹參、赤芍組成，具有活血開竅、補(bǔ)腎通絡(luò)的功效。多年來(lái)的臨床實(shí)踐證明，此方在治療缺血性腦卒中方面確有療效。本實(shí)驗(yàn)研究通
5、過(guò)觀察缺血再灌注大鼠腦組織中NO含量和神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)的變化，探討活血開竅湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的機(jī)制，進(jìn)一步為臨床用藥提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)，以便推廣應(yīng)用。方法本課題采用Wistar雄性成年大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究活血開竅湯對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制。將大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、假手術(shù)組、模型組、活血開竅湯治療組。各組在相同條件下分籠喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)開始第一天起給予治療組活血開竅湯2．29／lOOmg／d灌胃，假手術(shù)組和模型組分別給予等量的生理鹽水灌胃，各組每天灌胃1次，連續(xù)灌胃給藥5天。至造模成功后繼續(xù)重復(fù)手術(shù)前的給藥方式致指定時(shí)間點(diǎn)。末次灌胃給
6、藥后2h根據(jù)改良的Zea—Longa∞1線栓法制作大腦中動(dòng)脈栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，90min后實(shí)施再灌注。分別于再灌注后24h、48h快速將大鼠斷頭處死，完整剝?nèi)〈竽X組織，其中每組的半數(shù)制成腦組織勻漿液用于N0檢測(cè)，另半數(shù)采用心臟灌注的方法固定大腦，用于染色以觀察細(xì)胞凋亡和病理變化。將腦組織勻漿液天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文標(biāo)本采用硝酸還原酶法測(cè)定N0含量，嚴(yán)格按試劑盒操作步驟完成。將用多聚甲醛固定的腦組織標(biāo)本采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口術(shù)端標(biāo)記(TUNEL)染色法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)。高
7、倍鏡下觀察，細(xì)胞核內(nèi)棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞，分別選擇5個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)TUNEL陽(yáng)性標(biāo)記細(xì)胞，計(jì)算平均每個(gè)高倍視野下100個(gè)細(xì)胞中的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。運(yùn)用HE染色方法觀察活血開竅湯對(duì)腦缺血損傷的組織形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果：經(jīng)實(shí)驗(yàn)觀察，活血開竅湯治療組大鼠缺血再灌注24h、48h后，病理顯示模型組大鼠的腦組織神經(jīng)細(xì)胞損傷數(shù)目較多，且損傷嚴(yán)重，而治療組顯示神經(jīng)細(xì)胞損傷程度明顯較輕。經(jīng)測(cè)定，模型組大鼠腦組織中N0的含量及神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)明顯升高(P<0．01)，活血_丌竅湯治療組N0的含量較模型組明顯下降(P<0．05)，細(xì)胞凋亡數(shù)較模型組也顯著減少(P(0．01)。結(jié)論活血開竅
8、湯能改善缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能，可通過(guò)減少腦組織中NO的含量減輕其對(duì)腦組織的損害，實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦
