活血開竅湯對大鼠腦缺血再灌注損傷NO含量及細胞凋亡的影響

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1、分類號：112—031密級：學位類別：科學學位口專業(yè)學位口學校代碼：學號：學科門類：lO0622010602718醫(yī)學夭洱醬科六垮了lA鞫JIN酗菱DleA薹_U鞫lVERSl鼉1碩士學位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目：活血開竅湯對大鼠腦缺血再灌注損傷NO含量及細胞凋亡的影響TITLEEffectofHuoXueKaiQiao—decoctionontheNOcontentandcellapoptosisinmodelratswithcerebralischemia—reperfusionlnjury一級學科：中西醫(yī)結(jié)合二級學科：

2、中西醫(yī)結(jié)合臨床論文作者：張麗麗指導教師：李平天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月學位論文原創(chuàng)性聲明IIIIIMMIHIIIIIIIIUlUlIIIIY2396470本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個人在導師指導下獨立進行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學位論文作者簽名：襲壓—翻R期：糾拜r月?9日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，即

3、：學校有權(quán)將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學校向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫。本論文屬于保密口，在——年解密后適用本授權(quán)書。不保密區(qū)Z(請在相對應(yīng)的方框內(nèi)打“√”)學位論文導師期：功B鉉膨日期：訓弓鋱黟日天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要背景與目的腦血管病是嚴重威脅人類尤其是中老年人健康的常見病、多發(fā)病，具有高發(fā)病率、高致殘率和高致死率的特點，其中70．80％是缺血性腦血管病IlJ。腦缺血再灌注損傷是缺血性腦梗死區(qū)在血液供應(yīng)恢復后出現(xiàn)的更嚴重的腦損傷，其損傷發(fā)

4、生機制比較復雜，抑制再灌注損傷是治療缺血性腦血管病的重要環(huán)節(jié)。盡管國內(nèi)外研究者對此進行了大量的研究并取得一定進展，但仍缺乏有針對性的治療策略【2．j1中藥治療缺血性腦血管病已有悠久的歷史，具有療效確切、不良反應(yīng)少、藥理作用廣泛等優(yōu)點，可以從多個層次和多個環(huán)節(jié)上起到保護作用，特別適合腦缺血所致的多種病理改變，日益引起醫(yī)學界的關(guān)注14·J。．．．活血開竅湯是導師李平教授治療缺血性腦卒中的經(jīng)驗方，該方由天麻、牛膝、寄生、遠志、葛根、川芎、地龍、丹參、赤芍組成，具有活血開竅、補腎通絡(luò)的功效。多年來的臨床實踐證明，此方在治療缺血性腦卒中方面確有療效。本實驗研究通

5、過觀察缺血再灌注大鼠腦組織中NO含量和神經(jīng)細胞凋亡數(shù)的變化，探討活血開竅湯對大鼠腦缺血再灌注損傷保護作用的機制，進一步為臨床用藥提供理論和實驗依據(jù)，以便推廣應(yīng)用。方法本課題采用Wistar雄性成年大鼠作為實驗動物，研究活血開竅湯對局灶性腦缺血再灌注損傷的保護機制。將大鼠隨機分為空白對照組、假手術(shù)組、模型組、活血開竅湯治療組。各組在相同條件下分籠喂養(yǎng)，實驗開始第一天起給予治療組活血開竅湯2．29／lOOmg／d灌胃，假手術(shù)組和模型組分別給予等量的生理鹽水灌胃，各組每天灌胃1次，連續(xù)灌胃給藥5天。至造模成功后繼續(xù)重復手術(shù)前的給藥方式致指定時間點。末次灌胃給

6、藥后2h根據(jù)改良的Zea—Longa∞1線栓法制作大腦中動脈栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，90min后實施再灌注。分別于再灌注后24h、48h快速將大鼠斷頭處死，完整剝?nèi)〈竽X組織，其中每組的半數(shù)制成腦組織勻漿液用于N0檢測，另半數(shù)采用心臟灌注的方法固定大腦，用于染色以觀察細胞凋亡和病理變化。將腦組織勻漿液天津醫(yī)科大學碩士學位論文標本采用硝酸還原酶法測定N0含量，嚴格按試劑盒操作步驟完成。將用多聚甲醛固定的腦組織標本采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的缺口術(shù)端標記(TUNEL)染色法檢測神經(jīng)細胞凋亡數(shù)。高

7、倍鏡下觀察，細胞核內(nèi)棕黃色為陽性細胞，分別選擇5個高倍視野計數(shù)TUNEL陽性標記細胞，計算平均每個高倍視野下100個細胞中的陽性細胞數(shù)。運用HE染色方法觀察活血開竅湯對腦缺血損傷的組織形態(tài)學改變。結(jié)果：經(jīng)實驗觀察，活血開竅湯治療組大鼠缺血再灌注24h、48h后，病理顯示模型組大鼠的腦組織神經(jīng)細胞損傷數(shù)目較多，且損傷嚴重，而治療組顯示神經(jīng)細胞損傷程度明顯較輕。經(jīng)測定，模型組大鼠腦組織中N0的含量及神經(jīng)細胞凋亡數(shù)明顯升高(P<0．01)，活血_丌竅湯治療組N0的含量較模型組明顯下降(P<0．05)，細胞凋亡數(shù)較模型組也顯著減少(P(0．01)。結(jié)論活血開竅

8、湯能改善缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能，可通過減少腦組織中NO的含量減輕其對腦組織的損害，實驗結(jié)果亦