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1、羽毛降解菌的篩選、鑒定及產(chǎn)酶卷‘“冗,;樣‘、條件優(yōu)化■■‘二孓杏;■‘■…‘‘、‘‘、八‘‘;分類號(hào)密級(jí)公開碩士學(xué)位論文羽毛降解菌的篩選、鑒定及產(chǎn)酶條件優(yōu)化劉婕學(xué)科專業(yè)生物化工指導(dǎo)教師何熙璞副教授陳趟論文答辯日期年月日學(xué)位授予日期答辯委員會(huì)主席劉幽燕教授廣西大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)聲明本人聲明所呈交的論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除已特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,也不包含本人或他人為獲得廣西大學(xué)或其它單位的學(xué)位而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同事對(duì)本論文的
2、研究工作所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說(shuō)明。本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所完成的學(xué)位論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬?gòu)V西大學(xué)。本人授權(quán)廣西大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán),即學(xué)校有權(quán)保存并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播,可以釆用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于:口保密,在年解密后適用授權(quán)。不保密。請(qǐng)?jiān)谝陨舷鄳?yīng)方框內(nèi)打“”)論文作者簽名:日期:指導(dǎo)教師簽名:好找、曰期作者聯(lián)系電話:電子郵箱:羽毛降解菌的篩選、鑒定及產(chǎn)酶條件優(yōu)化摘
3、要羽毛廢棄物中含有豐富的角蛋白,若加以適當(dāng)處理可將其轉(zhuǎn)換為可利用的氨基酸,使用物理方法、化學(xué)方法進(jìn)行處理會(huì)對(duì)環(huán)境造成很大的污染。采用微生物降解法既可避免對(duì)環(huán)境造成污染,又可以將其有效的轉(zhuǎn)換為可利用蛋白質(zhì)。本文從土壤中篩選出兩株以羽毛作為唯一的碳源和氮源,能高效降解羽毛的細(xì)菌與。經(jīng)形態(tài)學(xué)、生理生化和鑒定,初步確定為枯草芽孢桿菌菌株為巨大芽孢桿菌目前在國(guó)內(nèi)還未見有巨大芽孢桿菌降解羽毛的報(bào)道。對(duì)菌株和產(chǎn)角蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化并對(duì)其所產(chǎn)角蛋白粗酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了研究。對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)在外加碳源蔗糖與外加氮源蛋白胨的
4、條件下,產(chǎn)酶能力分別比對(duì)照組增加了和。該菌株發(fā)酵產(chǎn)酶的最適為最適溫度為°轉(zhuǎn)速為最適接種量為羽毛含量為裝液量對(duì)產(chǎn)酶能力影響不大。對(duì)菌株所產(chǎn)角蛋白粗酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了研究發(fā)現(xiàn)其最適反應(yīng)溫度為°,最適為。金屬離子、、、、以及試劑、和對(duì)角蛋白粗酶的酶活有抑制作用;、(5%)、對(duì)酵活有促進(jìn)作用。酶動(dòng)力學(xué)特性研究表明其值為。對(duì)菌株產(chǎn)角蛋白酶的發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,結(jié)果表明:在外加碳源葡萄糖與外加氮源的條件下,產(chǎn)酶能力分別比對(duì)照組提高了倍和倍。其發(fā)酵產(chǎn)酶的最適為最適溫度為°最佳轉(zhuǎn)速為;最適接種量為羽毛含量為裝液量對(duì)產(chǎn)酶能力影響不大。菌株所產(chǎn)角蛋白酶粗酶
5、的最適反應(yīng)溫度為最適為。、、、、、、、和對(duì)其角蛋白粗酶的酶活有抑制作用;、、、對(duì)其角蛋白粗酶的酶活有促進(jìn)作用。酶動(dòng)力學(xué)特性研究表明其值為。該兩個(gè)菌株所產(chǎn)角蛋白酶在清潔劑行業(yè)、制革工業(yè)脫毛處理工藝以及在角蛋白廢棄物的降解中有一定的應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞:羽毛降解角蛋白酶發(fā)酵條件優(yōu)化Screening,IdentificationandOptimizationofFermentationConditionofFeather-degradingBacteriaABSTRACTFeatherswasteslocksupabundantofkerati
6、n,whichcouldbeconvertedtousefulproteinandaminoacids.Theprocessingincludingphysicalandchemicalmethodswillcausegreatenvironmentalpollutionproblems.Theenzymatichydrolysisbymicroorganismscanavoidtheenvironmentalpollution,anditcanbeeffectivelyconvertedfeatherstoavailableprote
7、in.Twofeather-degradingstrainsGZD-23andLFJ-11wereisolatedfromsoilwhichproducedhigherfeather-degradingactivity.Andthestrainscouldutilizefeatherasthesolecarbonsourcetogrow.Basedonthedetailedanalysisofmorphologica,physiological-biochemicalpropertiesand16SrDNAsequencing,thes
8、trainsGZD-23andLFJ-11wasidentifiedasBacillusmegateriumandBacillusmegatherium.ItwasthefirsttimeBacillusm