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《一株纖維素降解菌的篩選及其產(chǎn)酶條件優(yōu)化》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、第49卷第1期湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)Vol．49No.120第101年期1月HubeiAgriculturalSciencesJan．，2010一株纖維素降解菌的篩選及其產(chǎn)酶條件優(yōu)化盧月霞1121，宋惠月，劉凱楠，黃慧敏（1．河北工程大學(xué)農(nóng)學(xué)院，河北邯鄲056021；2．河北省永年縣林業(yè)局，河北永年057150）摘要：從長期富含枯枝落葉的土壤和造紙廠排污口污泥中分離篩選到一株能降解纖維素的放線菌，對其在以羧甲基纖維素為惟一碳源的產(chǎn)酶培養(yǎng)基上進(jìn)行產(chǎn)酶條件研究，結(jié)果表明，該菌產(chǎn)酶較合適的溫度是28℃，培養(yǎng)基起始pH值是7．0，接種培養(yǎng)24h的種子液產(chǎn)酶量較高，以2％的接種量接種酶活較高，其在優(yōu)化條件
2、下的酶活可達(dá)到44．76U／mL。關(guān)鍵詞：纖維素降解；放線菌；篩選；產(chǎn)酶條件中圖分類號：Q939.97文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：0439－8114（2010）01－0095-03ScreeningofACellulose－decomposingActinomycesStrainandStudyofItsEnzyme－producingConditionsLUYue－xia1，SONGHui－yue1，LIUKai－nan2，HUANGHui－min1（1．DepartmentofAgriculture，HebeiUniversityofEngineering，Handan056021，H
3、ebei，China；2．ForestryBureauofYongnianCounty，Yongnian057150，Hebei，China）Abstract：ACellulose－decomposingactinomycesstrainwasisolatedfromtherichhumussoilandthesludgeinlimberholeofthepapermill．Carboxymethylcelluloseasthesolecarbonsourceinthemediawasusedinthestudyofenzyme－producingcondition．Theresult
4、sshowedthattheoptimumenzyme－producingconditionswereat28℃withmediumprimarypH7．0，andinoculatedwith2％inoculumwhichhadbeencultivatedfor24hours．Itsenzymeactivitycouldreach44．76U／mLundertheoptimumconditions．Keywords：cellulosedecomposition；actinomyces；screening；enzymeproducingconditions纖維素是地球上分布最廣的碳水化合
5、物，同時1材料和方法又是自然界中數(shù)量最大的可再生資源［1］。在工業(yè)、農(nóng)業(yè)和生活廢料中，纖維素含量占有相當(dāng)大的比重，1．1材料尤其是農(nóng)村作物秸稈，由于沒有有效的處理方式通1．1．1樣品來源試驗分離所用樣品來自長期富常被大量焚燒，這樣不僅污染了環(huán)境，而且浪費了含枯枝落葉的土壤和造紙廠排污口污泥。資源［2］，因此我們迫切需要一種既無污染又可生產(chǎn)1．1．2培養(yǎng)基初篩培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基及液體發(fā)有用產(chǎn)品的處理方式。利用微生物降解纖維素因具酵培養(yǎng)基均參照文獻(xiàn)［5］配方制作。有經(jīng)濟(jì)、有效、節(jié)約等優(yōu)點而成為當(dāng)前熱點之一［3］。1．2方法能夠降解纖維素的微生物目前研究較多的是絲狀1．2．1纖維素降解菌的初
6、篩稱取0．5g樣品加入真菌和細(xì)菌，對放線菌的研究還比較少［4］到49．5mL含有玻璃珠的生理鹽水中，作為10－2稀。本研究從長期富含枯枝落葉的土壤和造紙廠釋度，振蕩30min混勻，并將上清液做10－3－4－5，10，10排污口污泥中篩選出一株能較好降解纖維素的放稀釋，各取1mL稀釋液，采用初篩培養(yǎng)基進(jìn)行基內(nèi)線菌，并對其產(chǎn)酶條件進(jìn)行了初步研究，旨為纖維接種稀釋涂布法，每個稀釋度作2次重復(fù)，28℃培養(yǎng)素資源的有效降解和合理利用提供一定的理論依48h，挑取生長較快的菌株進(jìn)行純化，純化2次，鏡據(jù)。檢，接種到初篩培養(yǎng)基斜面，4℃保存。收稿日期：2009－08－03作者簡介：盧月霞（1973－），
7、女，河北邯鄲人，講師，碩士，從事微生物學(xué)方面的教學(xué)與科研工作，（電話）13932057145（電子信箱）luyuexia727399＠163．com。96湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)2010年1．2．2纖維素降解菌活性定性檢測初篩得到的起始pH值、菌齡和接種量對產(chǎn)酶的影響。菌株用滅菌牙簽點接到鑒別培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)2結(jié)果與分析48h，選擇菌落周圍產(chǎn)透明圈的菌株進(jìn)行液體發(fā)酵測定酶活。2．1纖維素降解菌的分離篩選與純化1．2．3菌株的復(fù)篩將產(chǎn)透明圈的菌株接種于液
