抗體工程重點.pdf

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1、精品文檔第二章抗體的結(jié)構(gòu)與功能*重點章節(jié)。(一個名詞解釋)1、(Ab):抗原剌激機體后,由漿細胞產(chǎn)生的并能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。免疫球蛋白(Ig):具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白3.功能區(qū):Ig分子的H鏈和L鏈可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若干個球形結(jié)構(gòu),每一個球形結(jié)構(gòu)由110個氨基酸組成,具有一定的生理功能,稱為功能區(qū)。又叫結(jié)構(gòu)域。4.變異度(variability):某一位置的變異度為該位置出現(xiàn)的不同氨基酸數(shù)與該位置最常出現(xiàn)的氨基酸殘基的出現(xiàn)頻率之間的比值。5、免疫球蛋白超家族immunogloblinsuperfamilyIGSF:含有免疫球蛋白折疊結(jié)

2、構(gòu)樣功能區(qū)的分子。Ig分子超家族的成員多數(shù)為細胞膜表面分子6、按免疫球蛋白抗原特性分類:1)同種型:指同一物種內(nèi)所有個體的抗體共同具有的抗原特異性,存在于恒定區(qū)。同種型抗原特異性因種屬而異,主要包括Ig的類、亞類,型和亞型。2)同種異型:是指同一種屬不同個體間Ig分子所具有的不同抗原特異性??勺鳛檫z傳標記,存在Ig的恒定區(qū)。3)獨特型:每一個抗體形成細胞克隆所產(chǎn)生的抗體分子上所特有的抗原特異性。由VH或VL可變區(qū)氨基酸序列的不同所決定。與抗體結(jié)合抗原的特異性密切相關。7、CDR表位:VH和VL緊密地結(jié)合在一起,形成一個致密的球狀結(jié)構(gòu),成為Fv段,6個CDR襻位于Pv段

3、的N端,叫做CDR表面(CDRsurface),即抗原結(jié)合部位。8、結(jié)合力:抗原抗體的結(jié)合依靠靜電引力、氫鍵、范德華力等,需要合適的溫度、pH、離子強度及完整的抗體,這種結(jié)合是可逆的。9、抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity,ADCC):抗體分子與靶細胞表面抗原結(jié)合后,可通過其Fc段與殺傷細胞表面的Fc受體相結(jié)合,促進對靶細胞的殺傷作用,稱為ADCC。單核巨噬細胞、中性粒細胞、NK細胞第三章多克隆抗體(一個簡答)1、多克隆抗體的概念傳統(tǒng)的抗體制備方法是將一種天然抗原經(jīng)不同免疫途徑免疫動物,由

4、于抗原性物質(zhì)具有多個抗原決定簇,可以刺激機體產(chǎn)生多種抗體形成細胞克隆,合成和分泌抗各種決定簇的抗體,故在其血清中實際上是含多種抗體的混合物,所以稱這種免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體。2、抗體應答反應中初次應答和記憶應答的各自的特點。初次應答:潛伏期長。抗體類型最早產(chǎn)生IgM,接著才產(chǎn)生IgG,2w~2m才產(chǎn)生IgA??贵w總量低。維持時間短。親和力弱。記憶應答:潛伏期短??贵w類型IgG為主,IgM很少??贵w總量高。維持時間長。親和力強。3、免疫佐劑:(概念、作用、主要類型)概念:先于抗原或與抗原混合同時注入動物體內(nèi),能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應答

5、,發(fā)揮1歡迎下載。精品文檔輔助作用的物質(zhì),被稱為佐劑或免疫佐劑。生物學作用:1、增加抗原的免疫原性2、提高抗體的滴度(抗體的滴度其實也就是抗體的濃度)3、改變抗體的類型IgM—IgG4、引起或增強遲發(fā)型超敏反應佐劑的作用方式:在接種部位形成抗原貯存庫增加抗原的表面積促進局部的炎癥反應主要的免疫佐劑的類型:無機佐劑;乳化油劑;微生物極其代謝產(chǎn)物;人工合成佐劑;生物分子類。4、蛋黃抗體IgY:概念:是指蛋黃中存在的抗體,也稱蛋黃免疫球蛋白特點:IgY化學性質(zhì)穩(wěn)定??贵w產(chǎn)量大。成功率高。應用:作為抗生素的替代品,用于畜禽疾病的預防和治療。酶和激素的IgY:尿酶的IgY、膽囊

6、收縮素抗體。新的飼料添加劑。第四章單克隆抗體(*重點章節(jié)。考一個論述)1、原理:一個淋巴細胞只接受一個抗原決定簇刺激及經(jīng)刺激后擴增的淋巴細胞產(chǎn)生均一的同質(zhì)抗體,此即單克隆抗體技術的理論基礎。2定義:由一個識別單一抗原決定簇(表位)的B細胞克隆所產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)與功能完全相同的同源抗體。3、單克隆抗體的應用。A生命科學研究:蛋白質(zhì)組學研究領域(人類蛋白質(zhì)組計劃);細胞抗原研究及鑒定分類(人類白細胞分化抗原、淋巴細胞亞群分類、淋巴細胞亞群分離純化);細胞受體研究(受體的分離純化、細胞定位、結(jié)構(gòu)研究、功能分析);B疾病診斷與治療:感染性疾病診斷(檢測病原體微生物的抗原、對各類病原

7、體的分型及鑒定);腫瘤診斷及預后判斷(檢測血液中的腫瘤標志物);其它診斷及研究疾病治療(生物導彈治療性抗體)4、單抗制備的實驗方案。A融合前的準備工作:組織培養(yǎng)材料的準備(設備組織培養(yǎng)用水培養(yǎng)基血清抗生素);小鼠免疫(抗原動物選擇免疫途徑載體)B細胞融合:骨髓瘤細胞的選擇(生化缺陷型骨髓瘤細胞系NS1細胞株,SP2/0細胞株。)骨髓瘤細胞的培養(yǎng)(細胞處于對數(shù)生長期;形態(tài)和活性佳(活性大于95%);約需1×108個骨髓瘤細胞;融合前用含8-氮鳥嘌呤的培養(yǎng)基作適應培養(yǎng)。)骨髓瘤細胞懸液的制備脾細胞懸液的制備2歡迎下載。精品文檔飼養(yǎng)細胞的制備細胞融合與選擇

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