抗體工程重點(diǎn).pdf

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1、精品文檔第二章抗體的結(jié)構(gòu)與功能*重點(diǎn)章節(jié)。（一個(gè)名詞解釋）1、（Ab）：抗原剌激機(jī)體后，由漿細(xì)胞產(chǎn)生的并能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白。免疫球蛋白（Ig）：具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白3.功能區(qū)：Ig分子的H鏈和L鏈可通過鏈內(nèi)二硫鍵折疊成若干個(gè)球形結(jié)構(gòu)，每一個(gè)球形結(jié)構(gòu)由110個(gè)氨基酸組成，具有一定的生理功能，稱為功能區(qū)。又叫結(jié)構(gòu)域。4.變異度（variability):某一位置的變異度為該位置出現(xiàn)的不同氨基酸數(shù)與該位置最常出現(xiàn)的氨基酸殘基的出現(xiàn)頻率之間的比值。5、免疫球蛋白超家族immunogloblinsuperfamilyIGSF：含有免疫球蛋白折疊結(jié)

2、構(gòu)樣功能區(qū)的分子。Ig分子超家族的成員多數(shù)為細(xì)胞膜表面分子6、按免疫球蛋白抗原特性分類：1）同種型：指同一物種內(nèi)所有個(gè)體的抗體共同具有的抗原特異性，存在于恒定區(qū)。同種型抗原特異性因種屬而異，主要包括Ig的類、亞類，型和亞型。2）同種異型：是指同一種屬不同個(gè)體間Ig分子所具有的不同抗原特異性。可作為遺傳標(biāo)記，存在Ig的恒定區(qū)。3）獨(dú)特型：每一個(gè)抗體形成細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體分子上所特有的抗原特異性。由VH或VL可變區(qū)氨基酸序列的不同所決定。與抗體結(jié)合抗原的特異性密切相關(guān)。7、CDR表位：VH和VL緊密地結(jié)合在一起，形成一個(gè)致密的球狀結(jié)構(gòu)，成為Fv段，6個(gè)CDR襻位于Pv段

3、的N端，叫做CDR表面(CDRsurface)，即抗原結(jié)合部位。8、結(jié)合力：抗原抗體的結(jié)合依靠靜電引力、氫鍵、范德華力等，需要合適的溫度、pH、離子強(qiáng)度及完整的抗體，這種結(jié)合是可逆的。9、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(antibodydependentcellmediatedcytotoxicity，ADCC)：抗體分子與靶細(xì)胞表面抗原結(jié)合后，可通過其Fc段與殺傷細(xì)胞表面的Fc受體相結(jié)合，促進(jìn)對(duì)靶細(xì)胞的殺傷作用，稱為ADCC。單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞第三章多克隆抗體（一個(gè)簡(jiǎn)答）1、多克隆抗體的概念傳統(tǒng)的抗體制備方法是將一種天然抗原經(jīng)不同免疫途徑免疫動(dòng)物，由

4、于抗原性物質(zhì)具有多個(gè)抗原決定簇，可以刺激機(jī)體產(chǎn)生多種抗體形成細(xì)胞克隆，合成和分泌抗各種決定簇的抗體，故在其血清中實(shí)際上是含多種抗體的混合物,所以稱這種免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體。2、抗體應(yīng)答反應(yīng)中初次應(yīng)答和記憶應(yīng)答的各自的特點(diǎn)。初次應(yīng)答：潛伏期長(zhǎng)?？贵w類型最早產(chǎn)生IgM，接著才產(chǎn)生IgG，2w～2m才產(chǎn)生IgA?？贵w總量低。維持時(shí)間短。親和力弱。記憶應(yīng)答：潛伏期短?？贵w類型IgG為主，IgM很少?？贵w總量高。維持時(shí)間長(zhǎng)。親和力強(qiáng)。3、免疫佐劑：（概念、作用、主要類型）概念：先于抗原或與抗原混合同時(shí)注入動(dòng)物體內(nèi)，能非特異性地改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的特異性免疫應(yīng)答

5、，發(fā)揮1歡迎下載。精品文檔輔助作用的物質(zhì)，被稱為佐劑或免疫佐劑。生物學(xué)作用：1、增加抗原的免疫原性2、提高抗體的滴度（抗體的滴度其實(shí)也就是抗體的濃度）3、改變抗體的類型IgM—IgG4、引起或增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)佐劑的作用方式：在接種部位形成抗原貯存庫(kù)增加抗原的表面積促進(jìn)局部的炎癥反應(yīng)主要的免疫佐劑的類型：無(wú)機(jī)佐劑；乳化油劑；微生物極其代謝產(chǎn)物；人工合成佐劑；生物分子類。4、蛋黃抗體IgY：概念：是指蛋黃中存在的抗體，也稱蛋黃免疫球蛋白特點(diǎn)：IgY化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定?？贵w產(chǎn)量大。成功率高。應(yīng)用：作為抗生素的替代品，用于畜禽疾病的預(yù)防和治療。酶和激素的IgY：尿酶的IgY、膽囊

6、收縮素抗體。新的飼料添加劑。第四章單克隆抗體（*重點(diǎn)章節(jié)。考一個(gè)論述）1、原理：一個(gè)淋巴細(xì)胞只接受一個(gè)抗原決定簇刺激及經(jīng)刺激后擴(kuò)增的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生均一的同質(zhì)抗體，此即單克隆抗體技術(shù)的理論基礎(chǔ)。2定義：由一個(gè)識(shí)別單一抗原決定簇（表位）的B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)與功能完全相同的同源抗體。3、單克隆抗體的應(yīng)用。A生命科學(xué)研究：蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域（人類蛋白質(zhì)組計(jì)劃）；細(xì)胞抗原研究及鑒定分類（人類白細(xì)胞分化抗原、淋巴細(xì)胞亞群分類、淋巴細(xì)胞亞群分離純化）；細(xì)胞受體研究（受體的分離純化、細(xì)胞定位、結(jié)構(gòu)研究、功能分析）；B疾病診斷與治療：感染性疾病診斷（檢測(cè)病原體微生物的抗原、對(duì)各類病原

7、體的分型及鑒定）；腫瘤診斷及預(yù)后判斷（檢測(cè)血液中的腫瘤標(biāo)志物）；其它診斷及研究疾病治療（生物導(dǎo)彈治療性抗體）4、單抗制備的實(shí)驗(yàn)方案。A融合前的準(zhǔn)備工作：組織培養(yǎng)材料的準(zhǔn)備(設(shè)備組織培養(yǎng)用水培養(yǎng)基血清抗生素)；小鼠免疫（抗原動(dòng)物選擇免疫途徑載體）B細(xì)胞融合：骨髓瘤細(xì)胞的選擇（生化缺陷型骨髓瘤細(xì)胞系NS1細(xì)胞株，SP2/0細(xì)胞株。）骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)（細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期；形態(tài)和活性佳（活性大于95％）；約需1×108個(gè)骨髓瘤細(xì)胞；融合前用含8-氮鳥嘌呤的培養(yǎng)基作適應(yīng)培養(yǎng)。）骨髓瘤細(xì)胞懸液的制備脾細(xì)胞懸液的制備2歡迎下載。精品文檔飼養(yǎng)細(xì)胞的制備細(xì)胞融合與選擇