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《紅霉素對哮喘大鼠外周血單個核細胞磷酸化jnk表達的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、紅霉素對哮喘大鼠外周血單個核細胞磷酸化JNK表達的影響：吳成云，張近波，李智強，戴元榮【摘要】目的：探討哮喘大鼠外周血單個核細胞(PBMCs)JNK磷酸化表達的變化及紅霉素對其影響。方法：分離培養(yǎng)正常對照組、哮喘組、紅霉素處理組大鼠的PBMCs。分別采用ELISA方法檢測細胞上清液中IL-4，IL-5濃度，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)、CsJNKmRNA、磷酸化JNK的表達。結果：哮喘組PBMCsJNK磷酸化蛋白、mRNA表達水平及細胞上清液中IL-4，IL-5的濃度較正常對照組顯著升高(P<0.05)，紅霉素處理組
2、JNKmRNA、磷酸化蛋白表達水平及細胞上清液中IL-4，IL-5的濃度較哮喘組顯著降低(P<0.05)。通過直線相關分析發(fā)現(xiàn)，PBMCsJNK磷酸化蛋白與細胞上清液中IL-4，IL-5的表達水平之間均呈顯著正相關(r分別為0.74和0.66，P均<0.05)。結論：JNK可能參與支氣管哮喘的病理生理過程。紅霉素可能通過作用于JNK這一靶點發(fā)揮其抗炎效應?！娟P鍵詞】支氣管哮喘;外周血單個核細胞;JNK蛋白激酶;紅霉素 Abstract:Objective:Tostudythechangesoftheexpressi
3、onofJNKmitogen-activatedproteinkinase(JNK-MAPK)inperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)inratsaandtheeffectsoferythromycinonit.Methods:PBMCsratsa，normalsubjectsanderythromycin-treatedgroup.ThelevelsofproteinofIL-4，IL-5inplasma，JNKmRNAandproteinofJNKinPBMCselinkedimmun
4、osorbentassay(ELISA)，reversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT-PCR)andRNA、phosphor-JNKinPBMCsandtheconcentrationofIL-4，IL-5insupernatantsaticgroupthanthoseinnormalgroup(P<0.05).Byerythromycintreated，theaboveindexesaticgroup(P<0.05).Thereayplayaroleinpathop
5、hysiologicalprocessofasthma.Erythromycincaneffectivelytreatasthmathroughinhibitingtheexpressionofp-JNK. Keya;peripheralbloodmononuclearcells;JNKmitogen-activated proteinkinase;erythromycin 支氣管哮喘是多種炎性細胞和細胞因子參與的氣道慢性炎癥。炎癥學說的確立，給哮喘的防治和研究帶來了很大的進展。已有的研究發(fā)現(xiàn)，淋巴細胞等炎癥細胞及其產(chǎn)生的
6、多種細胞因子(IL-4和IL-5等)和炎癥遞質(zhì)參與了哮喘的發(fā)病過程[1]。以紅毒素、羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等為代表的14環(huán)、15環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對支氣管哮喘有較好的治療作用，可以改善哮喘患者的臨床癥狀，降低氣道高反應性。然而其確切的作用機制尚未明確，有文獻表明，其抗哮喘作用可能與非抗菌性抗炎作用有關[2-3]。但有關紅霉素對哮喘患者外周血單個核細胞(PBMCs)JNK表達的影響目前尚未見報道，本研究通過復制卵白蛋白(OVA)致敏的哮喘大鼠模型，探討紅霉素對哮喘大鼠外周血單個核細胞JNK表達的影響?！ ?材料和方法 1.
7、1材料OVA(Sigma公司);乳糖酸紅霉素(大連美羅制藥公司);磷酸化JNK和JNK多克隆抗體(SantaCruz公司);Cs分離、培養(yǎng)無菌抽取肝素(30U/mL)抗凝大鼠下腔靜脈血5mL，以淋巴細胞分離液分離PBMCs。離心洗滌后，用RPMI-1640培養(yǎng)基調(diào)細胞濃度為1×106/L，培養(yǎng)體系中加刺激物PHA10μg/mL，接種于6孔培養(yǎng)板內(nèi)，相應分為正常對照組、哮喘組和紅霉素處理組(即加入終濃度為15μg/mL的紅霉素共同培養(yǎng))。置于5%CO2、37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，收集細胞和細胞上清液備用，-70℃保存。 1.4培
8、養(yǎng)上清中IL-4和IL-5測定采用ELISA法檢測各組培養(yǎng)上清液中IL-4和IL-5的表達水平，操作按試劑盒說明書進行?！ ?.5PBMCs中JNKmRNA檢測JNK上游引物為：5’-CCAGATTGGATATTTCCGTCAG-3’，下游引物：5’-TTCCC
