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《海木提取物對小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響論文》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、海木提取物對小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響論文李家洲,盧海嘯,李金弟,黎建玲【摘要】目的探討海木提取物對小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法運用避暗法、跳臺法、Morris水迷宮法等方法檢測海木枝葉不同萃取物對正常小鼠及鹽酸氯丙嗪、亞硝酸鈉、乙醇所致記憶障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,并篩選出最高活性部位。結(jié)果①海木各提取部位均能延長小鼠避暗實驗的潛伏期,減少錯誤次數(shù),其中氯仿部位活性最高(P<0.01);②氯仿萃取物的中、大劑量組與對照組比較,能顯著縮短正常小鼠定位航行實驗中的逃避潛伏期.freelg∕2ml,上海禾豐制
2、藥有限公司,生產(chǎn)批號:080502);亞硝酸鈉(北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司,生產(chǎn)批號:991116);無水乙醇(分析純)(廣東光華化學(xué)廠有限公司,生產(chǎn)批號:20090115)。1.3儀器BA—200小鼠避暗儀,DT—200小鼠跳臺測試箱,MT—200Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統(tǒng),均由成都泰盟科技有限公司提供,RE—200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠),SHZ—D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏儀市予華儀器有限責(zé)任公司),電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)等。2方法2.1海木萃取物的制備稱取海木
3、干枝葉適量,加入適量的無水乙醇,加熱回流2h,用四層紗布過濾,得到的上清液提取液,重復(fù)提取3次,合并提取液,減壓回收溶劑,得膏狀物,將此膏狀物用乙醇∶水=1∶3的比例除去葉綠素,回收溶劑至干,即得粗提部分。將所得粗提物分成兩份,一份備用,另一份依次用石油醚、氯仿、正丁醇、水進(jìn)行固-液萃取,即得到石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分、水提部分。將各部分分別減壓回收溶劑至干,最后得到的膏狀物即是石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水提物。2.2動物分組在各項實驗分組之前均用相應(yīng)的儀器對小鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)測試
4、和篩選,剔除與其他小鼠具有較大差異的,再將其余的小鼠隨機(jī)分組,每組10只。2.3海木對正常小鼠學(xué)習(xí)記憶功能作用的活性部位篩選(避暗法)將小鼠分為正常組、粗提物組、石油醚組、氯仿組、正丁醇組、水提物組和陽性對照組共7組。各給藥組按100mg/kg劑量灌胃1ml,正常對照組灌胃等容量的生理鹽水,陽性對照組按16mg/kg劑量灌胃等容量銀杏葉片溶液,1次/d,連續(xù)給藥10d,于給藥第9天進(jìn)行避暗訓(xùn)練,第10天給藥后30min按文獻(xiàn)[5]方法測定小鼠在避暗儀中30min內(nèi)的錯誤次數(shù)(進(jìn)入暗室受到電擊的次數(shù))和潛
5、伏期(每只小鼠放入明室從開始測試到第一次進(jìn)入暗室的時間)。2.4海木氯仿萃取物對正常小鼠空間記憶功能的影響(Morris水迷宮法)將小鼠分為正常組、氯仿萃取物小、中、大劑量組和陽性對照組共5組。給藥組分別按50,100,150mg/kg劑量灌胃海木氯仿萃取物1ml,正常對照組灌胃等量生理鹽水,陽性對照組按16mg/kg劑量灌胃等量銀杏葉片溶液,1次/d,連續(xù)給藥10d。于給藥第5天進(jìn)行1次定位航行訓(xùn)練,于末次給藥后30min按文獻(xiàn)[6]方法測定小鼠尋找平臺潛伏期及撤除平臺后經(jīng)過原平臺的次數(shù)及在原平臺象限
6、停留的時間。2.5海木氯仿萃取物對鹽酸氯丙嗪所致記憶獲得障礙小鼠的影響(避暗法)動物分組和給藥與“2.4”同,除正常對照組外,實驗小鼠于給藥第9天皮下注射鹽酸氯丙嗪注射液(4mg/kg),30min后進(jìn)行避暗訓(xùn)練,第10天末次給藥30min后測定小鼠在避暗箱中30min內(nèi)的錯誤次數(shù)和潛伏期。2.6海木氯仿萃取物對亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠的影響(跳臺法)動物分組和給藥與“2.4”同,除正常對照組外,實驗小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺訓(xùn)練后立即皮下注射亞硝酸鈉水溶液(120mg/kg),第10天末次給藥30m
7、in后按文獻(xiàn)[5]方法測定小鼠在跳臺測試箱中30min內(nèi)的錯誤次數(shù)及潛伏期。2.7海木氯仿萃取物對乙醇所致記憶再現(xiàn)障礙小鼠的影響(跳臺法)動物分組和給藥與“2.4”同,實驗小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺訓(xùn)練,第10天除正常對照組外,在末次給藥后灌胃40%乙醇(0.1ml/10g),30min后測定小鼠在跳臺測試箱中30min內(nèi)的錯誤次數(shù)及潛伏期。2.8數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)以±s表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS13.forin的潛伏期均有增大,其中大劑量組的潛伏期最長,有非常顯著性差異(P<0.01),其次是中劑量組
8、的,有顯著性差異(P<0.05);各劑量組錯誤次數(shù)均明顯減少,差異非常顯著(P<0.01)。表3海木氯仿萃取物對鹽酸氯丙嗪所致記憶獲得障礙小鼠的影響(略)3.4海木氯仿萃取物對亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠的影響結(jié)果見表4。與模型組比較,大、中、小3個劑量組在30min的潛伏期均有增大,其中,大、中劑量組的潛伏期相對較長,有顯著性差異P<0.05);各劑量組錯誤次數(shù)均明顯減少,有非常顯著性差異(P<0.01)。表4海木氯仿萃取物對亞硝酸鈉所致