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1、海木提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響:李家洲,盧海嘯,李金弟,黎建玲【摘要】 目的探討海木提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。方法運(yùn)用避暗法、跳臺(tái)法、Morris水迷宮法等方法檢測(cè)海木枝葉不同萃取物對(duì)正常小鼠及鹽酸氯丙嗪、亞硝酸鈉、乙醇所致記憶障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響,并篩選出最高活性部位。結(jié)果①海木各提取部位均能延長(zhǎng)小鼠避暗實(shí)驗(yàn)的潛伏期,減少錯(cuò)誤次數(shù),其中氯仿部位活性最高(P<0.01);②氯仿萃取物的中、大劑量組與對(duì)照組比較,能顯著縮短正常小鼠定位航行實(shí)驗(yàn)中的逃避潛伏期,增加經(jīng)過(guò)原平臺(tái)的次數(shù)以及在原平臺(tái)象限停留的時(shí)間(P<0.05);③氯仿萃取物對(duì)鹽酸氯丙嗪、亞硝酸鈉及
2、乙醇所致記憶障礙小鼠均具有顯著的改善作用(P<0.05)。結(jié)論海木提取物具有增強(qiáng)正常小鼠學(xué)習(xí)記憶能力,改善學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的作用,其中氯仿萃取物為最高活性部位,其作用呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系?!娟P(guān)鍵詞】海木;小鼠;學(xué)習(xí)記憶 海木Trichiliaconnaroides為楝科(Meliaceae)植物,別名老虎楝、雞波、鷓鴣花,在我國(guó)主要分布于廣西、云南、貴州[1]。民間用藥中,海木的根常被作為治療關(guān)節(jié)炎、咽喉炎、扁桃體炎和其他疾病的方藥[2],有清熱解毒,祛風(fēng)濕腰腿痛和心、胃氣痛等功效[3]。有研究報(bào)道,海木氯仿提取物對(duì)通過(guò)化學(xué)處理、熱處理和甲醛誘導(dǎo)處理的昆明小鼠
3、和T—200Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統(tǒng),均由成都泰盟科技有限公司提供,RE—200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠),SHZ—D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏儀市予華儀器有限責(zé)任公司),電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)等。 2方法 2.1海木萃取物的制備 稱取海木干枝葉適量,加入適量的無(wú)水乙醇,加熱回流2h,用四層紗布過(guò)濾,得到的上清液提取液,重復(fù)提取3次,合并提取液,減壓回收溶劑,得膏狀物,將此膏狀物用乙醇∶水=1∶3的比例除去葉綠素,回收溶劑至干,即得粗提部分。將所得粗提物分成兩份,一份備用,另一份依次用石油醚、氯仿、正丁醇、水進(jìn)行固-液萃取,即得到
4、石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分、水提部分。將各部分分別減壓回收溶劑至干,最后得到的膏狀物即是石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水提物?! ?.2動(dòng)物分組在各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)分組之前均用相應(yīng)的儀器對(duì)小鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)測(cè)試和篩選,剔除與其他小鼠具有較大差異的,再將其余的小鼠隨機(jī)分組,每組10只?! ?.3海木對(duì)正常小鼠學(xué)習(xí)記憶功能作用的活性部位篩選(避暗法)將小鼠分為正常組、粗提物組、石油醚組、氯仿組、正丁醇組、水提物組和陽(yáng)性對(duì)照組共7組。各給藥組按100mg/kg劑量灌胃1ml,正常對(duì)照組灌胃等容量的生理鹽水,陽(yáng)性對(duì)照組按16mg/kg劑量灌胃等容量銀杏葉片溶液,1次/d,連
5、續(xù)給藥10d,于給藥第9天進(jìn)行避暗訓(xùn)練,第10天給藥后30min按文獻(xiàn)[5]方法測(cè)定小鼠在避暗儀中30min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)(進(jìn)入暗室受到電擊的次數(shù))和潛伏期(每只小鼠放入明室從開(kāi)始測(cè)試到第一次進(jìn)入暗室的時(shí)間)?! ?.4海木氯仿萃取物對(duì)正常小鼠空間記憶功能的影響(Morris水迷宮法)將小鼠分為正常組、氯仿萃取物小、中、大劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組共5組。給藥組分別按50,100,150mg/kg劑量灌胃海木氯仿萃取物1ml,正常對(duì)照組灌胃等量生理鹽水,陽(yáng)性對(duì)照組按16mg/kg劑量灌胃等量銀杏葉片溶液,1次/d,連續(xù)給藥10d。于給藥第5天進(jìn)行1次定位航行訓(xùn)練,于末次給藥后30m
6、in按文獻(xiàn)[6]方法測(cè)定小鼠尋找平臺(tái)潛伏期及撤除平臺(tái)后經(jīng)過(guò)原平臺(tái)的次數(shù)及在原平臺(tái)象限停留的時(shí)間?! ?.5海木氯仿萃取物對(duì)鹽酸氯丙嗪所致記憶獲得障礙小鼠的影響(避暗法)動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同,除正常對(duì)照組外,實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天皮下注射鹽酸氯丙嗪注射液(4mg/kg),30min后進(jìn)行避暗訓(xùn)練,第10天末次給藥30min后測(cè)定小鼠在避暗箱中30min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)和潛伏期?! ?.6海木氯仿萃取物對(duì)亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠的影響(跳臺(tái)法)動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同,除正常對(duì)照組外,實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺(tái)訓(xùn)練后立即皮下注射亞硝酸鈉水溶液(120mg/kg),
7、第10天末次給藥30min后按文獻(xiàn)[5]方法測(cè)定小鼠在跳臺(tái)測(cè)試箱中30min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)及潛伏期?! ?.7海木氯仿萃取物對(duì)乙醇所致記憶再現(xiàn)障礙小鼠的影響(跳臺(tái)法)動(dòng)物分組和給藥與“2.4”同,實(shí)驗(yàn)小鼠于給藥第9天進(jìn)行跳臺(tái)訓(xùn)練,第10天除正常對(duì)照組外,在末次給藥后灌胃40%乙醇(0.1ml/10g),30min后測(cè)定小鼠在跳臺(tái)測(cè)試箱中30min內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)及潛伏期?! ?.8數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)以±s表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.fororris水迷宮法)(略) 3.4海木氯仿萃取物對(duì)亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠的影響結(jié)果