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1、水芹提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶促進(jìn)作用的影響作者：張紅英張順興秦孝智【關(guān)鍵詞】水芹；,,學(xué)習(xí)記憶；,,回避反應(yīng)；,,超氧化物歧化酶；,,丙二醛；,,小鼠 摘要：目的：研究探討水芹提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶及超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影響。方法：采用跳臺(tái)和避暗法及測(cè)定SOD活性、MDA含量的方法，觀察水芹提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶以及SOD活性、MDA含量的影響。結(jié)果：水芹提取物可明顯改善東莨菪堿、氯霉素、乙醇3種化學(xué)藥物所致記憶障礙，亦可提高紅細(xì)胞中SOD活性，降低肝臟組織中MDA含量。結(jié)論：水芹提取
2、物具有一定改善學(xué)習(xí)記憶的作用，其作用可能與提高SOD活性，降低MDA的含量有關(guān)?！ ￡P(guān)鍵詞：水芹；學(xué)習(xí)記憶；回避反應(yīng)；超氧化物歧化酶；丙二醛；小鼠水芹為傘形科植物，全草性味甘辛、涼，功能清熱利水［1］。主治黃疸性肝炎，水腫［2］，對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用［3］，并有抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用［4］，該實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討了水芹提取物（以下簡(jiǎn)稱(chēng)Sf-E）對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶及超氧化物歧酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量的影響?！ ?材料與儀器 1.1動(dòng)物 昆明種小鼠，體重（21±2）g，雌雄兼用，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)
3、動(dòng)物科供應(yīng)，合格證號(hào)（10-1022），訓(xùn)練前在實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)環(huán)境1d以上。 1.2藥品與試劑水芹OenantheStolonifera(Roxb)DA含量測(cè)定取小鼠30只，隨機(jī)分為對(duì)照組，Sf-E（10g/kg）組和Sf-E（5g/kg）組，每組10只。連續(xù)ig25d，1次/d。末次給藥1h后取血，測(cè)定SOD的活性［7］和MDA的含量［7］?！ ?.2行為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒捎靡淮涡员粍?dòng)回避反應(yīng)（Onetriapassiveavoidanceresponcse）-跳臺(tái)法和避暗法［5］?！ ?.2.1跳臺(tái)法實(shí)驗(yàn)裝置為小鼠跳
4、臺(tái)反應(yīng)箱，體積為30cm×12cm×30cm，分為3室，底面為可通電的銅柵。訓(xùn)練時(shí)置小鼠于反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)3min，然后通以36V連續(xù)電刺激5min，小鼠受到電擊后的正常逃避反應(yīng)為跳上橡皮臺(tái)（安全區(qū)）。記錄5min內(nèi)動(dòng)物跳下橡皮臺(tái)的次數(shù)作為訓(xùn)練期錯(cuò)誤次數(shù)。24h后在底部銅柵通電的情況下，依前法將動(dòng)物輕置于橡皮臺(tái)上，記錄3min內(nèi)的電擊次數(shù)作為測(cè)驗(yàn)期錯(cuò)誤次數(shù)，為主要觀察指標(biāo)?！ ?.2.2避暗法小鼠避暗箱大小為36cm×12cm×12cm，分為前部明室和后部暗室兩部分，兩室間有直徑3cm的空洞相通。底部為銅柵，后半部
5、暗室通以40V電壓。訓(xùn)練時(shí)將小鼠背對(duì)洞口放入明室。開(kāi)始計(jì)時(shí)，從小鼠放入至鉆進(jìn)暗室觸電的時(shí)間，為訓(xùn)練時(shí)潛伏期，同時(shí)觀察小鼠5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)。24h后進(jìn)行測(cè)驗(yàn)，記錄每只小鼠第1次進(jìn)入暗室的潛伏期和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)?！ ?.3紅細(xì)胞中SOD活性的測(cè)定取小鼠血50μl放入（50u肝素）刻度試管內(nèi)，2000r/min，離心3min，用玻璃吸管吸取上清液，然后加入雙蒸水0.2ml混勻,再加入95％乙醇0.1ml振蕩30s，加入三氯甲烷0.1ml置旋渦混勻器，抽提1min,3000r/min，離心3min，上
6、層為SOD抽提液，中層為血紅蛋白沉淀物，下層為三氯甲烷，記錄上層液體，取10μl做SOD活力測(cè)定［7］?！ ?.4肝臟組織中MDA含量的測(cè)定取5％肝組織勻漿液0.2ml，加入8.1％十二烷基硫酸鈉（SDS）0.2ml，pH3.5的20％醋酸1.5ml。0.8％TBA1.5ml,加雙蒸水至4.0ml，置95℃水浴箱加熱1h，自來(lái)水冷卻后再加蒸餾水1.0ml,然后加入正丁醇-吡啶（15：1,v/v）混合溶劑5.0ml．振蕩1min，離心取上層有機(jī)液相，于532nm波長(zhǎng)測(cè)定吸收度。計(jì)算組織中MDA含量（F:TEP標(biāo)準(zhǔn)
7、應(yīng)用液的吸收度，f:樣本的吸收度）?！ ?結(jié)果 3.1Sf-E對(duì)東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙的影響 3.1.1跳臺(tái)法Sf-E（10g/kg）組可對(duì)抗訓(xùn)練前10min，ip東莨菪堿（3mg/kg）所造成的小鼠學(xué)習(xí)記憶獲得障礙，表現(xiàn)為跳臺(tái)法錯(cuò)誤次數(shù)與東莨菪堿組相比顯著減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)有顯著性差異(P＜0.05)．結(jié)果見(jiàn)表1。表1跳臺(tái)法實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果(略) 3.1.2避暗法Sf-E（10g/kg，5g/kg）連續(xù)ig9d，可對(duì)抗訓(xùn)練前10min，ip東莨菪堿（3mg/kg）所造成的小鼠學(xué)習(xí)記憶獲得障礙，表現(xiàn)為避暗法的
8、錯(cuò)誤次數(shù)顯著減少,并且潛伏期顯著延長(zhǎng)．結(jié)果見(jiàn)表2。表2避暗法實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果(略) 3.2Sf-E對(duì)氯霉素所致小鼠記憶鞏固不良的影響 3.2.1訓(xùn)練前10min，ip氯霉素（200mg/kg）使小鼠在避暗法中的錯(cuò)誤次數(shù)顯著增加，Sf-E（10g/kg）組連續(xù)ig9d，可對(duì)抗氯霉素所致的記憶鞏固障礙。結(jié)果見(jiàn)表3。表3Sf-E對(duì)氯霉素所致小鼠記憶鞏固不良的影響(略) 3.3Sf-E對(duì)40
