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1、東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響論文金莉莉,付美華,楊長(zhǎng)青【摘要】目的觀察東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)記憶障礙模型小鼠的作用效果。方法應(yīng)用氫溴酸東莨菪堿注射液(SCOP)制備小鼠記憶障礙模型,采用避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)和Y型電迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)等方法觀察不同劑量東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)記憶障礙模型小鼠的作用效果。結(jié)果與模型組比較,東當(dāng)歸乙醇提取物中、高濃度組均能改善記憶障礙,作用強(qiáng)度類似于石杉?jí)A甲。結(jié)論東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)SCOP誘導(dǎo)的小鼠記憶障礙具有良好的改善作用?!娟P(guān)鍵詞】東當(dāng)歸學(xué)習(xí)記憶避暗實(shí)驗(yàn)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)水迷宮實(shí)驗(yàn)老年癡呆是一種異質(zhì)性疾病,具有特征性神經(jīng)病理和神經(jīng)化學(xué)改變,發(fā)病多為老年
2、前期.freelg/kg,中劑量為250mg/kg,低劑量為125mg/kg,氫溴酸東莨菪注射液2mg/kg,石杉?jí)A甲85μg/kg。2.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶改善作用的研究實(shí)驗(yàn)分別采用避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)、Y型迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為6個(gè)組,每組含8~10只動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)給藥劑量組分為石杉?jí)A甲組(陽(yáng)性組)、SCOP組、空白組、東當(dāng)歸乙醇提取物高劑量組(東當(dāng)歸A組)、東當(dāng)歸乙醇提取物中劑量組(東當(dāng)歸B組)、東當(dāng)歸乙醇提取物低劑量組(當(dāng)歸C組),連續(xù)灌胃30d,期間所有動(dòng)物自由進(jìn)食飲水,小鼠末次給藥后除空白組外,其余各組均注射SCOP,10min后進(jìn)行各組實(shí)驗(yàn)。2
3、.3.1避暗實(shí)驗(yàn)采用被動(dòng)回避性條件反射儀進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn),將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)記錄裝置,記錄小鼠第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5min內(nèi)小鼠進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)作為記憶指標(biāo),24h后重復(fù)測(cè)試。2.3.2跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)將小鼠放入跳臺(tái)反射箱內(nèi)適應(yīng)3min,然后通以38V交流電,小鼠受到電擊后多數(shù)跳上跳臺(tái)逃避電擊。記錄小鼠第1次跳下時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5min內(nèi)小鼠跳下次數(shù),24h后重復(fù)測(cè)試。2.3.3水迷宮實(shí)驗(yàn)造模后10min進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練。第1次訓(xùn)練將小鼠放在安全臺(tái)附近G4處,讓其自行游上終點(diǎn)兩次,第2次訓(xùn)練將小鼠放在中部G2、G3處,然后第3次訓(xùn)練時(shí)
4、讓小鼠游全程。設(shè)定時(shí)間為2min,超過(guò)2min不能游出者按2min計(jì)。記錄小鼠自迷宮起點(diǎn)游至安全臺(tái)所需時(shí)間和途中進(jìn)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù),連續(xù)測(cè)試4d。2.3.4Y型迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)測(cè)試前將小鼠放置起步區(qū)的反射臂中,不通電,讓小鼠在三臂中進(jìn)行探索,約2~3min待其穩(wěn)定后將小鼠抓至起步區(qū),燈亮后2s時(shí),給予電刺激,直至小鼠最終逃到安全區(qū)后30s,熄燈,作為一次測(cè)驗(yàn)。在24h后檢測(cè)小鼠10次訓(xùn)練中的正確次數(shù)。2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,采用t檢驗(yàn),以P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。3結(jié)果3.1避暗實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果各組小鼠避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期和錯(cuò)誤次
5、數(shù)比較見(jiàn)表1。表1各組小鼠避暗實(shí)驗(yàn)測(cè)實(shí)結(jié)果(略)與空白組比較,*P0.05,..畢業(yè)△P0.001;與模型組學(xué)習(xí)后比較,﹟P0.05;n=83.2跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果各組小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)比較見(jiàn)表2。表2各組小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)實(shí)結(jié)果(略)與空白組比較,*P0.05,△P0.01;與模型組學(xué)習(xí)后比較,﹟P0.05,▲P0.01;n=103.3小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果各組小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)到達(dá)時(shí)間和錯(cuò)誤次數(shù)比較見(jiàn)表3~4。表3各組小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)實(shí)結(jié)果比較(略)與空白組比較,*P0.05,△P0.01;與模型組比較,﹟P0.05;n=10表4各組小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)入盲端錯(cuò)誤次數(shù)測(cè)實(shí)結(jié)果
6、比較(略)與空白組比較,*P0.05,△P0.001;與模型組比較,﹟P0.05,▲P0.01;n=103.4小鼠Y型迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果各組小鼠Y型迷宮實(shí)驗(yàn)在訓(xùn)練中達(dá)到9/10正確的實(shí)驗(yàn)次數(shù)與24h后10次中正確次數(shù)見(jiàn)表5。表5各組小鼠Y型迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)測(cè)實(shí)結(jié)果(略)與空白組比較,*P0.05;與模型組比較,﹟P0.05;n=104討論東當(dāng)歸是傘形科植物,化學(xué)成分主要含揮發(fā)油、有機(jī)酸、氨基酸、維生素等多種物質(zhì),阿魏酸鈉也是當(dāng)歸中有效單體成分,具有抗氧化、抗自由基、抗炎等藥理作用,有研究表明阿魏酸鈉能對(duì)抗Aβ引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷,改善小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能[4]。本研究通過(guò)進(jìn)行避暗實(shí)
7、驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)、Y型電迷宮穿梭實(shí)驗(yàn),均得出較相一致的結(jié)論,即在末次造模后,模型組與空白組比較,模型組成績(jī)明顯差于空白組,表明造模建立成功;東當(dāng)歸低濃度組與模型組比較無(wú)顯著性差異;東當(dāng)歸中、高濃度組與模型組比較,成績(jī)明顯優(yōu)于模型組。其中,中濃度組效果更加明顯;東當(dāng)歸中、高濃度組都與石杉?jí)A甲組比較無(wú)顯著性差異。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明東當(dāng)歸乙醇提取物中、高濃度組對(duì)記憶障礙小鼠有良好的改善作用,其作用強(qiáng)度類似于石杉?jí)A甲,為開(kāi)發(fā)臨床治療老年癡呆癥藥物提供理論依據(jù),具有一定的研究?jī)r(jià)值?!?/p>