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1、具有抗腫瘤活性的胡蘿卜脂溶性成分研究論文【摘要】目的:對(duì)胡蘿卜脂溶性部位的化學(xué)成分進(jìn)行研究,以期從中分離出具有抗腫瘤活性的單體化合物。方法:胡蘿卜提取采用溶劑萃取、薄層色譜、柱色譜、高效液相色譜等化學(xué)方法,結(jié)構(gòu)鑒定采用測定理化常數(shù)、1H-NMR、13C-NMR、紫外等方法。結(jié)果:從胡蘿卜的脂溶性部位分離得到3個(gè)化合物:β-谷甾醇、Laserine、Epilaserine,其中Epilaserine對(duì)白血病細(xì)胞HL-60有顯著的抑制活性,Laserine、Epilaserine系從胡蘿卜中提取得到。結(jié)論:
2、胡蘿卜中的Laserine、Epilaserine具有抗腫瘤活性?!娟P(guān)鍵詞】胡蘿卜;谷甾醇;抗腫瘤藥,植物;色譜法,高壓液相;藥理活性[Abstract]Objective:Tosearchforpound(s)lipophilicfractionofDaucuscarota.Methods:ExtractionfromD.carotaicalmeanssuchassolventextraction,thin-layerchromatography,columnchromatography,andhig
3、hperformanceliquidchromatogram.Thestructuralidentificationinationofthechemicalandphasicalconstants,1H-NMR,13C-NMRandultravioletspectrum.Results:Threeconstituents,β-sitosterol,laserineandepilaserine,thelipophilicfractionofD.carota.Amongthe3constituents,ep
4、ilaserineshoiacell,HL-60,andlaserineandepilaserineD.carotaforthefirsttime.Conclusion:D.carotahasanticancerconstituent,epilaserine,.freelatography,highpressureliquid;pharmacoactive胡蘿卜(DaucuscarotaL.Var.sativaDC)是一種食用植物,其中含有蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、鈣、磷、鐵、鈉、維生素B1、維生素B2、煙酸
5、以及維生素C等有益健康的物質(zhì)[1]。很多研究表明胡蘿卜的脂溶性部位含有的類胡蘿卜素(carotenoids).freelethyl-but-2-enoicacid-1-(7-methoxy-benzo〖1,3〗dioxol-5-yl)-2-(2-methyl-1-methylene-but-2-enyloxy)-propylester)。其1H-NMR譜如圖4所示。圖2中c為白色針狀晶體(丙酮),易溶于氯仿、乙醚,難溶于水、甲醇。Mp:138℃-139℃(CHCl3),Liebermann-Burcha
6、rd反應(yīng)呈陽性,提示為甾體化合物。其波譜數(shù)據(jù)中1HNMR(CDCl3)δ:5.34(1H,d,J=8.92Hz,H-6),3.51(1H,d,J=5.87Hz,H-3);13MR(CDCl3)δ:71.85(d,C-3),121.73(d,C-6),140.79(s,C-5),11.88(q,C-18),19.41(q,C-19)。均與已知化合物β-谷甾醇(β-Sitosterol)特征峰符合,且c在數(shù)種展開劑條件下進(jìn)行薄層層析,其Rf值與β-谷甾醇對(duì)照品一致,兩者混合熔點(diǎn)不下降。由此可確定c為β-谷甾
7、醇(β-Sitosterol)。2.3Laserine、Epilaserine的藥理活性研究藥物:將分得的Laserine和Epilaserine用乙醇溶解,備用。分組:Laserine濃度分別為10-4,10-5,10-6,10-7,10-8mol/L5組;Epilaserine濃度分別為10-4,10-5,10-6,10-7,10-8mol/L5組;空白對(duì)照組。PC12細(xì)胞接種于經(jīng)多聚賴氨酸包被過的35mm培養(yǎng)板中,加入10%(V/V)馬血清和5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液,并根據(jù)分組不同加入不同濃度
8、的Laserine和Epilaserine,置37℃,5%CO2條件下培養(yǎng)。A549細(xì)胞用含10%小牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基在37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),濕度75%。HL-60細(xì)胞在RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng),其中有10%的小牛血清,100U/ml青霉素,和100mg/L鏈霉素,在5%CO2的37℃孵箱中孵育。2.3.1Laserine對(duì)HL-60的抑制活性見圖5。2.3.2Epilaserine對(duì)HL-60的抑制活性見圖6