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1、具有抗腫瘤活性的胡蘿卜脂溶性成分研究【關(guān)鍵詞】胡蘿卜；谷甾醇；抗腫瘤藥，植物；色譜法，高壓液相；藥理活性 ?。跘bstract］Objective:Tosearchforpound（s）lipophilicfractionofDaucuscarota.Methods:ExtractionfromD.carotaicalmeanssuchassolventextraction,thin-layerchromatography,columnchromatography,andhighperformanceliquidchro
2、matogram.Thestructuralidentificationinationofthechemicalandphasicalconstants,1H-NMR,13C-NMRandultravioletspectrum.Results:Threeconstituents,β-sitosterol,laserineandepilaserine,thelipophilicfractionofD.carota.Amongthe3constituents,epilaserineshoiacell,HL-60,andlas
3、erineandepilaserineD.carotaforthefirsttime.Conclusion:D.carotahasanticancerconstituent,epilaserine,initslipophilicfraction. ?。跭eyatography,highpressureliquid;pharmacoactive胡蘿卜（DaucuscarotaL.Var.sativaDC）是一種食用植物，其中含有蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、鈣、磷、鐵、鈉、維生素B1、維生素B2、煙酸以及維生素C等有益健康的物質(zhì)［1
4、］。很多研究表明胡蘿卜的脂溶性部位含有的類胡蘿卜素（carotenoids），與胡蘿卜的營養(yǎng)和促健康作用相關(guān)［2］。胡蘿卜的脂溶性部位得到的人參炔醇（panaxynol）等天然聚乙炔醇類化合物（polyacetylenes），具有抗癌、抗菌、抗真菌、殺蟲、免疫抑制等多種生物活性［3］。為了進一步了解胡蘿卜的脂溶性部位的化學(xué)成分與其生物活性之間的相互關(guān)系，對胡蘿卜石油醚提取部位的化學(xué)成分進行了研究，以期從中分離出具有生物活性的單體化合物?！ ?儀器、試劑和原料 1.1儀器 R譜與已知化合物譜圖比對可知b為Epilase
5、rine，（2,3-Dimethyl-but-2-enoicacid-1-（7-methoxy-benzo〖1,3〗dioxol-5-yl）-2-（2-methyl-1-methylene-but-2-enyloxy）-propylester）。其1H-NMR譜如圖4所示?！ D2中c為白色針狀晶體（丙酮），易溶于氯仿、乙醚，難溶于水、甲醇。Mp：138℃-139℃（CHCl3），Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性，提示為甾體化合物。其波譜數(shù)據(jù)中1HNMR（CDCl3）δ：5.34（1H,d,J=8.92H
6、z,H-6），3.51（1H,d,J=5.87Hz,H-3）；13MR（CDCl3）δ：71.85（d，C-3），121.73（d，C-6），140.79（s，C-5），11.88（q，C-18），19.41（q，C-19）。均與已知化合物β-谷甾醇（β-Sitosterol）特征峰符合，且c在數(shù)種展開劑條件下進行薄層層析，其Rf值與β-谷甾醇對照品一致，兩者混合熔點不下降。由此可確定c為β-谷甾醇（β-Sitosterol）?！ ?.3Laserine、Epilaserine的藥理活性研究 藥物：將分得的Lase
7、rine和Epilaserine用乙醇溶解，備用。分組：Laserine濃度分別為10-4，10-5，10-6，10-7，10-8mol/L5組；Epilaserine濃度分別為10-4，10-5，10-6，10-7，10-8mol/L5組；空白對照組?！ C12細胞接種于經(jīng)多聚賴氨酸包被過的35mm培養(yǎng)板中，加入10%（V/V）馬血清和5%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，并根據(jù)分組不同加入不同濃度的Laserine和Epilaserine，置37℃，5%CO2條件下培養(yǎng)。A549細胞用含10％小牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基在
8、37℃、5％CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)進行培養(yǎng)，濕度75％。HL-60細胞在RPMI1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其中有10%的小牛血清,100U/ml青霉素，和100mg/L鏈霉素，在5%CO2的37℃孵箱中孵育。 2.3.1Laserine對HL-60的抑制活性見圖5?！ ?.3.2Epilaserine對HL-60的抑制活性
