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1、姜黃素對(duì)人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞抑制作用探究【摘要】目的研究姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖的抑制作用,探索防治青光眼手術(shù)區(qū)濾過(guò)泡纖維瘢痕化的新途徑。方法用0～80μg/ml姜黃素作用體外培養(yǎng)的人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞,觀察24～96h后不同濃度姜黃素對(duì)人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞的影響。CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)活性。結(jié)果在0～80μg/ml濃度作用24～96h范圍內(nèi),姜黃素可以抑制人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞的增長(zhǎng),且呈劑量和時(shí)間依賴性。結(jié)論姜黃素可抑制體外培養(yǎng)人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖?！娟P(guān)鍵詞】姜黃素;青光眼;Tenon囊成纖維細(xì)胞;CCK-
2、8InhibitioneffectsofcurcuminonhumanTenoncapsulefibroblastinvitroLANYu-qing,ZHENGHai-sheng,ZHANGChi,etal.DepartmentofOphthalmology,theSecondAffiliatedHospitalofSunYat-SenUniversity,Guangzhou510120,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofcurcuminonproliferationofhumanTenoncapsule
3、fibroblastinvitro.MethodsTheCCK-8methodwas9usedtoassaytheactivityofhumanTenoncapsulefibroblastat24h,48h,72hand96haftertreatedwith10,20,40,80μg/mlcurcumininvitro.ResultsTheactivityofhumanTenoncapsulefibroblastat24h,48h,72hand96haftertreatedwith10,20,40,80μg/mlcurcuminwasinhibitedsignifi
4、cantlycomparedwiththecontrolanditwasdose-dependentandtime-dependent.ConclusionTheproliferationofhumanTenoncapsulefibroblastwasinhibitedsignificantlybycurcumin.【Keywords】Curcumin;Glaucoma;Tenoncapsulefibroblast;CellcountingKit-8基金項(xiàng)目:廣東省中醫(yī)藥管理局基金(項(xiàng)目編號(hào):2007106)作者單位:510120廣州,中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科9青光
5、眼已成為世界范圍內(nèi)占第二位的不可逆性致盲眼病,而濾過(guò)手術(shù)是治療青光眼的重要手段之一,其方法是通過(guò)被切除的小梁組織形成一濾過(guò)通道,使房水外流從而達(dá)到降低眼壓,保存殘存視功能的目的。但濾過(guò)手術(shù)存在10%～30%的失敗率[1],其失敗的直接原因主要是濾過(guò)口處成纖維細(xì)胞的增殖、遷移而導(dǎo)致濾過(guò)道的纖維瘢痕化,使濾過(guò)通道堵塞.這也是青光眼臨床與研究中所面臨的難題之一,術(shù)中應(yīng)用抗增殖藥物如絲裂霉素(mitomycin,MMC)經(jīng)術(shù)后的臨床觀察可提供手術(shù)的成功率,但也存在一定的毒副作用限制其使用。因此許多眼科工作者為防治濾過(guò)手術(shù)的失敗而尋找安全、有效抑制成纖維細(xì)胞增殖的方法進(jìn)行著不
6、懈的努力。姜黃素是一種歷史悠久的傳統(tǒng)中藥,具有多種療效:抗纖維增殖作用[2]、抑制血管生成[3]、抗腫瘤作用[4]、抗氧化作用[5]、抗炎作用等多種藥理作用,且無(wú)明顯毒副作用具有較好的臨床應(yīng)用前景。目前其在對(duì)其他器官和組織的成纖維細(xì)胞方面的研究和應(yīng)用中取得了一定的成果和進(jìn)展,但在研究姜黃素對(duì)人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞中的作用還比較少,為研究姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)的人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞的抗增殖的作用效果,從而探索防治青光眼手術(shù)區(qū)濾過(guò)泡纖維瘢痕化的新途徑,提高青光眼手術(shù)成功率。筆者設(shè)計(jì)以下實(shí)驗(yàn)。1材料和方法1.1材料與主要儀器設(shè)備1.1.1試劑CCK-8(CellCou
7、ntingKit-8)(Dojindo公司)、姜黃素(購(gòu)自SIGMA公司)、vimentin單克隆抗體(博士德公司)、DAB顯色試劑(博士德公司)。1.1.2主要儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱(德國(guó)HeraeusBB16)、手術(shù)顯微鏡(德國(guó)Zeiss)、光學(xué)倒置顯微鏡(德國(guó)LeicaMPS-30)、WellscanMK3酶標(biāo)儀(美國(guó)LabsystemDragon)、1.2方法91.2.1人眼Tenon囊成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)、鑒定眼球結(jié)膜下Tenon囊組織標(biāo)本為中山大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科青光眼手術(shù)切除組織,采用組織塊培養(yǎng)法原代接,第3～6代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。按常規(guī)方法培養(yǎng)細(xì)胞[6],
