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《中藥治療對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后mrnangf表達(dá)的影響論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、中藥治療對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后mRNANGF表達(dá)的影響論文.freel處造成坐骨神經(jīng)擠壓傷，根據(jù)分組，術(shù)后給予不同的中藥喂養(yǎng)大鼠。術(shù)后不同時(shí)間，取緊鄰擠壓傷部位遠(yuǎn)側(cè)神經(jīng)干.freelRNA（mRNANGF）的表達(dá)。結(jié)果丹參組和黃芪組大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷后第2周起，坐骨神經(jīng)組織中mRNANGF表達(dá)明顯增加，至傷后第4周達(dá)到高峰。黨參治療坐骨神經(jīng)擠壓傷，治療后8周，mRNANGF表達(dá)較對(duì)照組明顯增加，差異有顯著性。在復(fù)方?jīng)_劑組，大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷后8周內(nèi)，神經(jīng)組織中mRNANGF表達(dá)始終處于高水平。各組大鼠坐骨神經(jīng)mRNANGF表達(dá)與對(duì)照組之間的差異具有顯著性（P＜0.05）。復(fù)方?jīng)_劑組大鼠坐骨神經(jīng)
2、mRNANGF表達(dá)與丹參和黃芪組之間的差異也具有顯著性。結(jié)論中藥黨參、丹參和黃芪可以促進(jìn)擠壓傷后大鼠坐骨神經(jīng)mRNANGF表達(dá)；這種作用在組成復(fù)方?jīng)_劑后，表現(xiàn)得更為明顯?！娟P(guān)鍵詞】中藥；坐骨神經(jīng)損傷；神經(jīng)生長(zhǎng)因子mRNA【Abstract】ObjectiveTodecideprovingtheregenerationofperipheralnerveafternervelesionandtostudythemechanismofChineseherb.Methods108SDrats(male，220～250g)ixedgroupandcontrolgroup.Theratsdistalto
3、sciaticnotch.AftersurgerytheratseafteroperationtheratpjustdistaltothecrushsiteovedtoevaluatethelevelofmRNANGF.mRNANGFeansofinsituhybridizationandthelevelinedbyimaginganalysis.ResultsInDanshenandHuangqigroupsthelevelsofmRNANGFinsciaticnervemarkedlyincreasedatthesecondRNANGFinthesetixedgroupthemRNANG
4、FareallinhighlevelparedRNANGFinDangshengroupixedherbscanincreasetheexpressionofmRNANGFofratsciaticnerveandimprovetheregenerationofsciaticnerveafternervecrushed.【KeyRNA復(fù)方神肌再生沖劑對(duì)神經(jīng)再生的促進(jìn)作用已經(jīng)被實(shí)驗(yàn)研究初步證實(shí)［1，2］。為了研究中藥復(fù)方神肌再生沖劑及其組成成分對(duì)神經(jīng)再生的影響，我們?cè)鴳?yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)中藥治療后損傷的大鼠坐骨神經(jīng)組織NGF蛋白表達(dá)［3］。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛躍發(fā)展，運(yùn)用先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)手段，
5、檢測(cè)神經(jīng)生長(zhǎng)因子mRNA（mRNANGF）在神經(jīng)組織中的表達(dá)來判斷神經(jīng)再生，其敏感度比檢測(cè)NGF的方法要高得多。我們應(yīng)用原位分子雜交的方法，研究復(fù)方神肌再生沖劑治療大鼠坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）mRNA（mRNANGF）的變化，確定中藥復(fù)方神肌再生沖劑中對(duì)神經(jīng)再生有促進(jìn)作用的單味中藥。1材料與方法1.1動(dòng)物選擇及分組SD大鼠，健康，雄性，體重230～250g，SPF級(jí)。由復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。實(shí)驗(yàn)組90只大鼠分為5個(gè)處理組，分別為黨參組、丹參組、黃芪組、生地組和復(fù)方?jīng)_劑組。每處理組18只大鼠再按術(shù)后取材時(shí)間分為術(shù)后2周、4周和8周3個(gè)時(shí)間組，每時(shí)間組6只。對(duì)照組30只大鼠分
6、為5個(gè)時(shí)間組，分別為術(shù)后2天、1周、2周、4周和8周，每時(shí)間組6只大鼠。1.2動(dòng)物模型制作1%硫噴妥鈉腹腔注射麻醉。局部脫毛，消毒。取右側(cè)為手術(shù)側(cè)。沿右側(cè)臀大肌纖維方向做右臀及大腿上部皮膚切口，分開臀肌顯露坐骨神經(jīng)。于坐骨結(jié)節(jié)遠(yuǎn)側(cè)0.8cm，坐骨神經(jīng)分出支配大腿肌肉的分支之近側(cè)，用帶卡扣的無齒顯微持針器夾住坐骨神經(jīng)，合攏卡扣30s，造成神經(jīng)擠壓傷（crush）［4］。在損傷部位用11-0的無損傷縫線固定于神經(jīng)外膜作為標(biāo)記，傷口內(nèi)置適量青霉素粉劑，關(guān)閉切口。術(shù)后將大鼠分籠飼養(yǎng)，每籠3只。常規(guī)供給大鼠專用飼料和飲用水，室內(nèi)20℃恒溫。根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組，每日給予相應(yīng)的中藥湯劑2ml灌胃。對(duì)照組大鼠術(shù)后
7、給等量生理鹽水灌胃。按分組要求，術(shù)后取緊鄰擠壓傷部位遠(yuǎn)側(cè)坐骨神經(jīng)干0.6cm，迅速置入4%多聚甲醛溶液固定。另取正常大鼠6只，取其右側(cè)坐骨神經(jīng)相應(yīng)部位神經(jīng)干，作為正常神經(jīng)標(biāo)本，用以檢測(cè)正常神經(jīng)mRNANGF。標(biāo)本經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定24h后，脫水，石蠟包埋。常規(guī)石蠟切片，厚度為4μm。載玻片需要經(jīng)過高溫滅活RNA酶，APES鍍膜。切片置4℃冰箱保存。1.3原位分子雜交實(shí)驗(yàn)方法［5］及步驟NGF型原位雜交檢測(cè)
