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1、區(qū)分等位基因內突變和非等位基因間突變實驗一、【目的】1、熟練掌握果蠅的雜交技術。2、能通過實驗區(qū)分等位基因間和非等位基因間的突變。二、【原理】·基因突變：一個基因座的內部結構發(fā)生改變，導致基因的一種等位形式變成另一等位形式，也叫做點突變。·野生型等位基因：將自然界中普遍出現(xiàn)或指定實驗用的某一品系的性狀作為“野生型”或“正?！钡男誀睿c這種性狀相關的等位基因稱為野生型等位基因。·突變型等位基因：任何不同于野生型等位基因的相同座位的基因稱為突變型等位基因。·正向突變：從野生型等位基因變?yōu)橥蛔冃偷任换?。恢復突變：從突變型等位基因變?yōu)橐吧偷任换?/p>
2、因?！ね蛔凅w的表型特征：（1）形態(tài)突變：突變導致生物體外觀上可見的形態(tài)結構的改變。例如果蠅的紅眼→白眼突變：（2）生化突變：突變影響生物的代謝過程，導致一個特定生化功能的改變或喪失。如微生物的營養(yǎng)缺陷型（3）致死突變：嚴重影響生物體生活力，導致個體死亡的突變?？煞譃轱@性致死突變（雜合態(tài)即可致死）和隱性致死突變（純合態(tài)才致死）（4）條件致死突變；引起生物體在某些條件下致死的突變。如噬菌體的溫度敏感性突變·突變發(fā)生的時期和部位突變在生物體生長發(fā)育的任何階段以及任何部位都可以發(fā)生，突變發(fā)生的越遲，對生物體的影響越輕，對于有性生殖的真核生物來說，體
3、細胞發(fā)生的顯性突變會影響當代的表型，而生殖細胞發(fā)生的突變有可能傳遞給下一代?！ね蛔兊亩喾较蛐院蛷偷任换蛞粋€基因內有很多突變位點，所以，一個基因的突變也有多方向性，從而導致一個基因可以有兩個以上的等位形式——復等位基因。突變的有害性和有利性:·多數(shù)為隱性致死（recessivelethal），也有少數(shù)顯性致死（dorminantlethal）?！ぐ樾灾滤溃╯exlinkedlethal）：即致死突變發(fā)生在性染色體上。·致死突變一般不利，但也有利，如用于檢測基因突變和控制♀♂個體的平衡致死品系。自發(fā)突變的原因·自然界中的輻射—電離輻射和非電離
4、輻射·溫度的極端變化以及氣候變化·生物體生長發(fā)育環(huán)境中的化學物質的影響生物體本身產生的生物或化學物質的影響·錯義突變：堿基改變導致密碼子改變、結果引起氨基酸序列的改變?！o義突變：編碼氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子的點突變。·移碼突變：基因編碼序列中插進額外堿基引起插入點及后面編碼信息發(fā)生改變?？梢疱e意、無義及終止密碼子突變·同義突變（沉默突變）：由于密碼子的簡并性，堿基改變，但編碼氨基酸不變?！そK止密碼子突變：終止密碼子堿基發(fā)生改變，導致氨基酸合成不能正常終止果蠅突變的檢出·（1）Muller-5方法檢出果蠅X染色體的突變·（2）利用平衡
5、致死系檢出果蠅常染色體的突變誘發(fā)突變輻射與誘變（1）輻射：上下左右四面八方傳遞能量的過程？電離輻射：X射線、α射線、β射線、γ射線、中子和質子等非電離輻射：紫外線a和b射線的穿透力很弱，故只能用“內照射”。實際應用時，一般不用a射線，只用b射線。b射線常用輻射源是P32和S35，尤以P32使用較多（2）電離輻射誘變途徑：物理作用→化學作用→生物學作用。（3）輻射劑量及表示方法定義：單位質量被照射的物質所吸收的能量數(shù)值，稱為輻射劑量。（4）電離輻射致變的機理照射→原發(fā)電離→次級電離→基因分子結構改組→基因突變基因突變的頻率與輻射劑量成正比，即
6、劑量增加一倍，突變頻率增加一倍，但突變率不受輻射強度的影響。輻射強度是指單位時間內照射的劑量數(shù)，即劑量率，倘若照射劑量不變，不管單位時間內所照射是多還是少，基因突變率總是保持一致?！ぃ?）非電離輻射誘變①種類：UV（紫外線2600A0）紫外線雖然能量比電離輻射低，但由于核酸的吸收峰波長在紫外線波長范圍內，因而也會引起基因突變。但效率比較低。由于其穿透力較弱，很少用于高等生物的誘變劑，多用于微生物、花粉或體細胞培養(yǎng)中的誘變劑。②作用機理：激發(fā)作用→離折→配對差錯→突變③適用：微生物、配子化學誘變1941年Auerbach和Robson第一次發(fā)
7、現(xiàn)芥子氣可以誘發(fā)基因突變。1943年Oehlkers第一次發(fā)現(xiàn)氨基甲酸乙酯(NH2COO2H5）可以誘發(fā)染色體結構的變異。（1）特點：比輻射誘變劑溫和，較容易控制，有一定的突變傾向性。某些化學藥物的誘變作用是有特異性的，即一定性質的藥物能夠誘發(fā)一定類型的變異。（2）種類：參見教材上的表10-3①烷化劑：甲基磺酸乙酯[EMS，CH3SO4（OC2H5）]、硫酸二乙酯[DES，SO2(OC2H5)2]、乙烯亞胺（EI）等。它們都有含有一個或多個不穩(wěn)定的烷基（C2H5），這些烷基能移到電子密度較高的其他分子中去，這種通過烷基置換其它分子的氫原子的
8、作用，叫做烷化作用。烷化劑就是通過這種烷化作用而改變基因的分子結構，從而造成基因突變。②堿基類似物：5-溴尿嘧啶（Bu）、5-溴脫氧尿核苷（BudR）、2-氨基嘌呤（Ap）等。前
