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1、HPLC法測定人血漿中萘普生濃度【摘要】目的建立高效液相色譜法測定萘普生血藥濃度的方法。方法采用HPLC法測定普生緩釋片中萘普生的血漿藥物濃度。大連依利特HypersilODS(5μm，4．6mm×250mm)柱，柱溫40℃；流動相為甲醇-磷酸二氫鈉緩沖液(50mmol/L磷酸二氫鈉水溶液，含0．3%三乙胺，用磷酸調(diào)pH值為3．7)=68．9∶31．1；流速1．0ml/min。紫外檢測波長為230nm。結(jié)果萘普生在0．93～93．20μg/ml線性關(guān)系良好，r?2=?0．9999?，最低檢測濃度為0．10μg/ml。結(jié)論本法快速、靈敏，適用于
2、萘普生血藥濃度的監(jiān)測。【關(guān)鍵詞】萘普生；高效液相色譜法DeterminationofNaproxeninthehumanplasmabyHPLCKANGJun-min.ThePeople’SHospitalofShaoshang，XiangtanHunan411300,China【Abstract】ObjectiveToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofnaproxeninthehumanplsamw.MethodsTheconcentrationsofNaproxenweredetermin
3、edbyHPLC．ThechromatographiccolumnwasHypersilODS(5μm，4．6mm×250mm)andthetemperature5was40℃.Themobilephasewasmethanol-SodiumDihydrogenPhosphatebuffersolution(50mmol/LSodiumDihydrogenPhosphate，contain0．3%TEA，usephosphoricacidadjustpHwas3．7)=68．9∶31．1ResultsTherangeofnaproxen0．9
4、3~93．20μg/ml，r?2=?0．9999?，thelowestdetermineconcentrationwas0．10μg/ml.ConclusionThemethodisrapid、sensitiveandefficient．Itappliestodeferminenaproxeninplasma.【Keywords】Naproxen；HPLC萘普生(Naproxen)為苯丙酸類非甾體鎮(zhèn)痛藥，其吸收迅速、起效快、毒副反應(yīng)小、作用時間長。腸溶膠囊由于胃內(nèi)藥物濃度低，從而減少對胃的直接損害作用。為了有效測定萘普生的藥動學(xué)，我們在參考文
5、獻的基礎(chǔ)上采用作了適當(dāng)改進，建立了HPLC法測定人血漿中萘普生濃度的方法，現(xiàn)報告如下。1儀器與試藥1．1實驗藥品與試劑試驗藥：萘普生膠囊，杭州康恩貝制藥有限公司，批號：030201，規(guī)格：萘普生每片125mg。參比藥：萘普生片，成都錦華藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號:030504，規(guī)格：每片1255mg。萘普生標(biāo)準(zhǔn)對照品：由海南惠普森醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)提供；地西泮標(biāo)準(zhǔn)對照品，購自國家麻醉品實驗室。甲醇：HPLC級，天津科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。水為自制重蒸水。1．2儀器Agilent1100高效液相色譜儀(Agilen
6、t1100VWD紫外檢測器)，離心機(賽特湘儀離心機儀器有限公司)，旋渦震蕩儀(上海琪特分析有限公司)2方法與結(jié)果2．1色譜條件固定相：大連依利特HypersilODS(5μm，4．6mm×250mm)柱，柱溫40℃；流動相：甲醇：磷酸二氫鈉緩沖液(50mmol/L磷酸二氫鈉水溶液，含0．3%三乙胺，用磷酸調(diào)pH值為3．7)=68．9∶31．1；流速1．0ml/min。紫外檢測波長為230nm。2．2血樣處理方法精密取血漿0．1ml(用前搖勻，離心)，加內(nèi)標(biāo)(地西泮，0．34mg/ml)10μl，混勻，加入乙腈0．3ml，旋渦震蕩2min，于
7、10000r/min，離心5min，取上層清液，進樣10μl，用內(nèi)標(biāo)法以峰面積定量。2．3色譜行為圖1分別為空白血漿、對照品溶液、含對照品的血漿以及受試者血樣的典型色譜圖。從圖中可以看出，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測定，萘普生與血漿雜質(zhì)分離較好，萘普生和內(nèi)標(biāo)的保留時間分別為5．6、7．2min。2．4線性范圍和最低檢測濃度5取一定量空白血漿，加入萘普生的對照溶液，依次配制成萘普生濃度為0．93、2．33、4．66、11．65、23．30、46．60、93．20μg/ml的一系列標(biāo)準(zhǔn)血漿，按樣品處理項下操作，內(nèi)標(biāo)法定量，以待測物濃度對其峰面積與內(nèi)標(biāo)
8、峰面積之比進行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=0．0577X-0．0056(r2=?0．9999?)。以S/N>3，確定最低檢測濃度為0．10μg/ml。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲
