HBVDNA與乙肝兩對半檢測結果的相關性探討.doc

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1、HBVDNA與乙肝兩對半檢測結果的相關性探討【摘要】目的：探討HBVDNA的檢出情況與乙肝兩對半結果之間的關系。方法：運用熒光定量PCR（FQPCR）檢測307例疑似乙肝患者血清中的HBVDNA，同時運用ELISA方法進行兩對半指標的檢測，并對結果進行相關性探討。結果：HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)組（大三陽組）患者血清HBVDNA檢出率為98.8%（84/85），平均拷貝數(shù)為1.82E+07/ml；HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)組（小三陽組）患者血清HBVDNA檢出率為64.6%（53/82），平均拷貝數(shù)為1.82E+04/

2、ml；HBsAg(+)HBcAb(+)組血清HBVDNA檢出率為63.6%（7/11），平均拷貝數(shù)為7.94E+04/ml。結論：血清HBVDNA水平與HBVM表現(xiàn)模式有關，HBsAg（+）/HBeAg（+）/HBcAb（+）的標本HBVDHA值顯著高于HBsAg（+）/HBeAb（+）/HBcAb（+）的標本和HBsAg（+）/HBcAb（+）的標本，提示HBsAg與HBeAg的存在影響HBVDNA水平。FQPCR能實現(xiàn)準確定量，可以檢測HBV的真實感染和復制情況，對于乙型肝炎的臨床診斷、治療方案的選擇和療效考察有較大的指導意義。【關鍵詞】肝炎病毒；乙型；DNA

3、；定量PCR　　乙型肝炎病毒(HBV)感染是影響我國人民健康最重要的傳染病之一，現(xiàn)我國約有1.2億人口為HBV攜帶者［1］，HBV感染所致的慢性乙型肝炎病程遷延，有進一步發(fā)展為肝硬化或肝功能衰竭的可能，甚至于發(fā)展成肝癌，因此對HBV的檢測是較為關注的課題。我們采用熒光定量聚合酶鏈反應方法檢測了211份臨床血清標本，并同時采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）進行對照檢測，報告如下?！　?材料與方法　　1.1材料　　1.1.1標本來源211份臨床血清標本來自2006年1月至2007年1月到我科作乙型肝炎血清標志檢測者標本，根據(jù)其HBVM表現(xiàn)模式分為9組，所有標本均為隨機抽樣?！　?/p>

4、1.1.2儀器德國羅氏公司LightCycler熒光定量PCR儀?！　?.1.3HBVDNA定量檢測試劑盒深圳匹基生物工程技術股份有限公司出品?！　?.1.4HBVELISA檢測試劑盒廈門新創(chuàng)生物工程有限公司出品?！　?.2方法　　1.2.1HBVDNA定量檢測采用德國羅氏公司LightCycler熒光定量PCR儀及深圳匹基生物工程股份有限公司生產的HBV3DNA熒光定量檢測試劑盒進行HBVDNA定量檢測，嚴格按照儀器及試劑盒說明書操作?！　?.2.2HBVM檢測采用ELISA方法檢測，嚴格按照試劑盒說明書操作?！　?.2.3定量結果統(tǒng)計方法定量結果采用求對數(shù)平均

5、值的方法計算HBVDNA的平均拷貝數(shù)，遇有陰性結果，不參與平均值的統(tǒng)計。統(tǒng)計學方法采用配對t檢驗。　　2結果　　2.1PCR檢測HBVDNA定量結果見表1?！　”?各HBVM表現(xiàn)模式及FQPCR檢測其HBVDNA定量結果（略）　　注：遇有陰性結果，不參與平均值的統(tǒng)計?！　?.2常見HBVM表現(xiàn)模式其HBVDNA檢測結果的比較見表2?！　”?HBV標志物不同模式HBVDNA檢測結果（略）　　與模式1相比P值2P＜0.013P＜0.01　　3討論　　FQPCR是進行臨床基因診斷的有效手段，它采用了完全閉管檢測，不需要PCR后處理，避免了交叉感染；同時采用實時檢測技

6、術，所得Ct值和原始模板數(shù)量完全呈線形相關，定量準確率極高［2］，它不僅具有普通PCR的高靈敏性，而且由于熒光探針的應用，可以通過光電傳導系統(tǒng)直接探測PCR擴增過程中熒光信號的變化以獲得定量結果，所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜的高精確性，克服了常規(guī)PCR的許多缺點［3］。ELISA法檢測乙肝兩對半是臨床診斷HBV感染的傳統(tǒng)手段，它檢測的是人體對HBV的免疫反應狀態(tài)，而FQPCR則可以準確的反應出HBVDNA的復制水平、病程變化和治療恢復情況等。本文結果顯示，85例大三陽組中，其HBVDNA陽性84例，檢出率達98.8%，而且呈較高的拷貝量，經(jīng)統(tǒng)計學處理大三陽組和

7、HBsAg(+)HBcAb(+)組及小三陽組差異有顯著性，說明這些患者HBV具有較高的復制水平，是具有傳染性的重要標志。通過采用熒光定量聚合酶鏈反應檢測，我們可以發(fā)現(xiàn)1組與2組(P＜0.01)，及1組與3組(P＜0.01)，2組與3組(P＜0.05)相比差異有顯著性，從而可知HBVDNA的水平與HBeAg的存在有顯著的關系，與HBsAg的存在也有明顯的關系，說明HBeAg和HBsAg的存在一定程度上能反應HBV的復制程度。5組HBcAb單一陽性的標本其HBVDNA定量檢測值雖然為陰性，但國內學者證明［4］，單純