蜂膠中酶活力的測定

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1、萬方數(shù)據(jù)嬰墨121:主2塑2:魚主墾些些△塑£型巡娶星QEg奠!盟△堇墼嬰窒亟壹2【文章標號10412--4367(2008)06-0007-03蜂膠中酶活力的測定章彬佳胡福良’鄭火青朱威(浙江大學動物科學學院,杭州310029)摘要:根據(jù)蜜蜂在采膠過程中可能添加進了腺體分泌物,對蜂膠中d一淀粉酶、蔗糖酶、蛋白酶的活力進行了研究,以期從特征組分酶的角度探討蜂膠真?zhèn)舞b別問題。試驗結(jié)果表明:不同地區(qū)的蜂膠及混合蜂膠反應(yīng)時間小于45rain時,檢測不到三種酶;當混合蜂膠、新鮮蜂膠反應(yīng)時間迭3h以上,未檢測到僅一淀粉酶,而在檢測蔗糖酶和蛋白酶時測試管與陰性對照管出現(xiàn)明顯色差,證明兩種酶的

2、存在,但活力較小。上述結(jié)果表明:要從這3種酶活力的角度來鑒別蜂膠真?zhèn)斡泻艽蟮碾y度。關(guān)鍵詞:蜂膠;Ot一淀粉酶;蔗糖酶;蛋白酶【中圖分類號】s8%.8【文獻標i.qii馬lBDeterminationofenzymeactivityinpropolisZhangBinjiaHuFuliang’ZhengHuoqingZhuWei(CollegeofAnimalSciences,ZhejiangUniversity,Hangzhou310029,China)Abstract:Inordertofindanefficientdistinguishingmethodfromtheaspe

3、ctofenzyme,studyhadbeencar-fledouttodetecttheactivityofot-amylase,saccharaseandproteaseinpropolis.TheresultsshowedthatwhenthepropolisfromdifferentareasinChinaandthemixedpropolisreactedwithsubstrateforlessthan45min.the僅一amylase.saccharaseandproteasecouldnotbedetected.W1lenthemixedpropolisandth

4、efreshpropolisreactedwithsubstrateformorethan3hours,a-amylasewasalsonotdetected,whilethesaccharaseandproteaseweredetectedwithlowactivities.Itindicatesthatitisverydifficulttodistinguishauthenticpropolisfromthefakebydetectingofa-amylase,saccharaseandprotease.Keywords:propolis;a-amylase;sacchara

5、se;protease蜂膠是一種天然保健品,具有抗病原微生物、增研碎,轉(zhuǎn)移至50mL燒杯,超聲波提取20min,再于磁強免疫、延緩衰老、降血脂、降血糖、抗腫瘤、促進組力攪拌器攪拌3h。四層紗布過濾,將濾液轉(zhuǎn)移至織再生等多種生物學功能【1-oq,因而蜂膠在保健品領(lǐng)50mL離心管中,冷凍離心(1-40C,10000rpm)20min,域備受青睞,同時已逐步被應(yīng)用到醫(yī)藥及日用化工取上清液,定容至100mL,保存于冰箱中備用。領(lǐng)域。近20多年來,雖然蜂膠的研究方興未艾,但1.2.2蜂膠酶活力測定許多新技術(shù)的應(yīng)用仍未能解決蜂膠質(zhì)量控制中真?zhèn)?.2.2.1a一淀粉酶活力測定參照蔣傳葵的方法【

6、111,鑒別這一熱點問題。一些學者認為由于蜜蜂在采膠活力單位定義(U):一定條件下,每分鐘待測酶液水過程中加入了自身的分泌物,因而蜂膠中存在多種解可溶性淀粉產(chǎn)生l斗M麥芽糖的酶量。活性酶[7-10],但有關(guān)蜂膠中酶活力的基礎(chǔ)性研究卻未1.2.2.2蔗糖酶活力測定采用3,5一二硝基水楊酸見報道。本試驗從酶的角度對蜂膠的真?zhèn)舞b別進行(DNS)法112I,活力單位定義(U):一定條件下,每分鐘摸索,測定了多個不同來源的蜂膠樣品中儀一淀粉待測酶液水解蔗糖釋放出Img還原糖的酶量。酶、蔗糖酶、蛋白酶的活力,以期確定是否有可能作1.2.2.3蛋白酶活力測定采用Folin酚法【131,活力單為

7、蜂膠真?zhèn)舞b別的指標。位定義(U):一定條件下,每分鐘待測酶液水解酪蛋1材料與方法白釋放出lmg酪氨酸的酶量。1.1材料1.2.3最佳試驗條件的選擇僅一淀粉酶的測定采用蜂膠分別采自安徽、東北、河北、山東、浙江等正交試驗設(shè)計,且不考慮各因素之間的互作。通過不地,由杭州天廚蜜源保健品有限公司提供;新鮮蜂膠同溫度、不同酶液濃度和不同反應(yīng)時間的組合,盡可樣品采自浙江大學動物科學學院實驗蜂群。能達到酶的最佳反應(yīng)條件,使酶表現(xiàn)出最高活性,利1.2方法于檢測。綜合蜜蜂和酶的生物學特性,蔗糖酶的代

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