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《蜂膠中β葡萄糖苷酶活性的測定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、蜂產(chǎn)品分析【2】宋心仿．蜜蜂產(chǎn)品的應(yīng)用及檢測加工技術(shù)【M】．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000：l18，177，192，198【3】劉新迎．使用阿貝折射儀檢測蜂蜜水分含量應(yīng)注意的幾個問題【J】．蜜蜂雜志，1999，(5)：27．蜂膠中p一葡萄糖苷酶活性的測定張翠平，陳璇，易松強(qiáng)，胡福良2(浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，杭州310029)摘要：本文采用一種快速簡便的方法首次在新鮮蜂膠中檢測出B一葡萄糖苷酶。該法以對一硝基B—D一葡萄糖苷(pNPG)為底物進(jìn)行酶解，用分光光度法測定水解后釋放出來的對一硝基苯酚含量確定酶活性的強(qiáng)弱。對影響酶活性的參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，最優(yōu)條
2、件為：磷酸氫二鈉一檸檬酸緩沖液的pH值為6．0，evpp力H人量為蜂膠量的20％，反應(yīng)溫度57℃，底物濃度30Mm，反應(yīng)時間1．5～3．5ho研究結(jié)果還提示：B一葡萄糖苷酶活力的高低與蜂膠的新鮮度可能相關(guān)。關(guān)鍵詞：蜂膠；p一葡萄糖苷酶；酶活性DeterminationofB-glucosidaseactivityinpropolisZhangCui-ping，ChenXuan，YiSong—qiang，HuFu—liang(CollegeofAnimalSciences，ZhejiangUniversity，Hangzhou310029)Abstra
3、ct：Amethodwasdescribedfortherapidandsimpleassayofg-glucosidaseactivityinpropolis．Itinvolvescolorimetricestimationofp—nitrophenolreleasedbyg-glucosidaseactivity．Anumberofparametersaffectingg-glucosidaseactivitywereevaluated，theoptimalconditionswerewhentheenzymeWasextractedwithas
4、uitableamountofPVPPis20％tothatofpropolisinphosphate—citratebuffer(pH6．O)withP--nitrophenyl-·13—·D·-glucosideat57oCfor30Mmsubstrateastheadditionlevelofpolyvinyp01ypyrt01idone(PVPP)as20％ofpropolis．ItWasalsosuggestedthattheenzymeactivitymaybeanindicatorforthefreshnessofpropolis．Ke
5、ywords：propolis，13-glucosidase，enzymeactivity蜂膠化學(xué)成分復(fù)雜，目前已從蜂膠中分離鑒定出的化學(xué)成分有黃酮類、萜烯類、醌類、酯類、醇類、醛類、酚類、有機(jī)酸類，還有大量的氨基酸、酶類、維生素類、多糖及多種微量元素等。尤其是含有大量的類黃酮、萜烯類化合物是蜂膠的重要特基金項(xiàng)目：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(nyhyzx07—041o作者簡介：張翠平(1980-)，女，博士研究生。{通訊作者：胡福良(1964．)，男，博士，教授。Tel：0571．86971952，E．mail：flhu@zju．edu．cn159蜂
6、產(chǎn)品分析征u’。黃酮類化合物是植物中最豐富的一類多酚類化合物，天然存在的黃酮類化合物多以糖苷形式存在。例如，黃酮醇類多為3—0一糖苷，也有的為7一。一糖苷和4’一。一糖苷他1，而黃酮和二氫黃酮及異黃酮類多為7—0一糖苷1310但是，蜂膠中已分離鑒定出的黃酮類化合物大都以游離黃酮苷元形式存在。因此，推測蜜蜂在采集蜂膠的過程中加入了自身分泌物，使黃酮苷水解成黃酮苷元141o天然存在的黃酮苷基本上都是p—D一葡萄糖苷，因此，蜜蜂很可能在采集蜂膠的過程中加入了B—D一葡萄糖苷酶。但迄今為止，還沒有蜂膠中B—D一葡萄糖苷酶研究的相關(guān)報道，為了證實(shí)該酶的存在，有
7、必要建立蜂膠中p—D一葡萄糖苷酶提取檢測的方法。B一葡萄糖苷酶，又稱B—D一葡萄糖苷水解酶，別名龍膽二糖酶、纖維二糖酶和苦杏仁苷酶，屬于水解酶類。它可催化水解結(jié)合于末端非還原性的p—D一糖苷鍵，同時釋放出配基與葡萄糖體臨10p一葡萄糖苷酶廣泛存在于自然界中，可來源于植物、微生物，也可來源于動物161。Gilliametal(1988)在西方蜜蜂的中腸和后腸中發(fā)現(xiàn)p一葡萄糖苷酶¨10Pontohetal(2002)從西方蜜蜂的消化道、蜜囊、咽下腺中均分離純化出B一葡萄糖苷酶，而且分離出的酶是相同的‘810因此，他們推斷p一葡萄糖苷酶產(chǎn)生于蜜蜂的咽下腺，
8、在蜜蜂取食時分泌到口器里，傳遞到蜜囊中，然后再轉(zhuǎn)移到巢房和消化道中。在蜂蜜中已發(fā)現(xiàn)B一葡萄糖苷酶的活性拇1，
