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《芽孢桿菌n6的鑒定及其產(chǎn)β甘露聚糖酶最適條件的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)中國農(nóng)業(yè)大學學報2006,11(3):36—40JournalofChinaAgriculturalUniversity芽孢桿菌N.6的鑒定及其產(chǎn)p.甘露聚糖酶最適條件的研究張清霞1周洪友2唐文華1(1.中國農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學與生物技術學院,北京100094;2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院,呼和浩特010019)摘要為獲得產(chǎn)酶量高、產(chǎn)酶快的菌株,采用碘液染色法從土樣分離到1株產(chǎn)B一甘露聚糖酶量高的菌株Bacillussp.N一6,通過16SrDNA序列相似性比較及生理生化性狀鑒定為枯草芽抱桿菌;為得到最佳產(chǎn)酶配方進行了發(fā)
2、酵條件優(yōu)化。結果表明:100mL培養(yǎng)基加入2g魔芋粉、1g酵母粉、1g豆餅粉、起始pH8.0、32℃150r/min振蕩培養(yǎng)18h。產(chǎn)酶量最高。達316.53U/mL。該酶在pH5.0~9.0和40--55℃下穩(wěn)定,作用最適條件pH6.0和50℃。C02+對酶有激活作用,F(xiàn)e”。舨+和EDTA對酶有較強抑制作用。關鍵詞甘露聚糖酶;枯草芽孢桿菌;鑒定中圖分類號Q93—331;Q939.124文章編號1007—4333(2006)03-0036—05文獻標識碼AIndentificatiOnandoptimization
3、.ofBacillussp.N-6for13-mannanaseproductionZhangQingxial,ZhouHongyou2,TangWenhual(1.CollegeofAgronomyandBiotechnology,ChinaAgriculturalUniversity。Beijing100094,China;2.CollegeofAgriculture,AgriculturalUniversityofInnerMongolia,Huhhot010019,China)AbstractN一6strai
4、nofhighextracellularpmannanaseactivitywasisolatedfromsoilsamplesbyiodinedyedmethodinOrderIoobtainfhestrainwhichrapidlyproducedmannanase.ThestrainwasidentifiedasBacillussubtil/sby16SrDNABLASTintheGenbank,morphologicalandphysiologicalcharacteristicsanalysis,There
5、sultshowedthattheactivitywas316.53U/mLinthe100mLculturemedium,containing2gKonjakpowder,1gyeastextract,1gbeancakepowder.TheoptimalpH,temperature。agitationspeedandculturetimewere8.0,32℃,150r/minand18h,respectively.TheactivitywasstableatpH5.0~9.0andbelow55℃.Theopt
6、imalconditionoftheenzymewaspH6.0and50℃。re—spectively.Theenzymeactivitywasenhancedbyc02+andwasinhibitedbyFe3+,Ag+andEDTA.Keywordspmannanase;Bacillussubtilis;identification
7、3一甘露聚糖酶來源廣泛,在動植物和微生物中都有該酶存在[1吲。其中芽孢桿菌因產(chǎn)酶量高、產(chǎn)酶周期短、耐熱和抗逆性強而受關注。國內(nèi)報道了許多其產(chǎn)酶菌株的篩選和產(chǎn)酶條件的優(yōu)化,但絕大多數(shù)
8、菌株活力低、產(chǎn)酶周期長r2,91;國外對其產(chǎn)酶條件的優(yōu)化研究較少r10]。本研究旨在篩選產(chǎn)酶活力高、產(chǎn)酶周期短的菌株,并通過優(yōu)化發(fā)酵條件提高甘露聚糖酶的產(chǎn)量,為生產(chǎn)應用和后續(xù)研究提供理論依據(jù)。B一甘露聚糖酶(EC3.2.1.78)是內(nèi)切水解酶,催化水解半纖維素中的半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳葡甘露聚糖和甘露聚糖主鏈上的B.1,4一甘露糖苷鍵‘11;另一方面,可降解植物膠的低聚糖可用作雙歧桿菌促生長因子等保健食品及飼料工業(yè)中抗營養(yǎng)因子的開發(fā)等r2訓。1材料與方法1.1菌株來源從內(nèi)蒙、北京、江蘇、河北等地采集的土樣中,
9、按照Williams報道的多糖染料和多糖底物反應生成收稿Et期:2005—10—14基金項目:澳大利亞國際農(nóng)業(yè)中心資助項目(PHT/1998/140)作者簡介:張清霞。博士研究生,E—mail:zqx817@126.corn;唐文華,教授,通訊作者,主要從事植物病害生物防治研究,E—mail:wenhuatang@sohu.corn萬方數(shù)據(jù)第3