睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及受體的研究進(jìn)展

《睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及受體的研究進(jìn)展》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及受體的研究進(jìn)展關(guān)鍵詞：睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體基因表達(dá)摘要　　睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子自70年代發(fā)現(xiàn)以來倍受重視，其對神經(jīng)細(xì)胞的生長、分化具有明顯的營養(yǎng)作用。有關(guān)CNTF及其受體的組織分布、蛋白質(zhì)和基因的分子結(jié)構(gòu)、生長學(xué)活性、表達(dá)調(diào)節(jié)等的研究取得了新的進(jìn)展并展現(xiàn)了臨床應(yīng)用前景。1956年Cohen純化出第一個神經(jīng)營養(yǎng)因子——神經(jīng)生長因子，隨后陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子-3、神經(jīng)營養(yǎng)因子-4/5，構(gòu)成了神經(jīng)營養(yǎng)因子家族，它們對神經(jīng)細(xì)胞生長、分化有重要作用。睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子因最初從鳥的睫狀神經(jīng)節(jié)中提取出來，可維持副交感神經(jīng)節(jié)活性而得名，它不屬

2、于NTFs家族成員，與其無同源性，屬非靶源性神經(jīng)營養(yǎng)因子。CNTF最早由Helfand等在1976年發(fā)現(xiàn)，1984年Barbin等從雞睫狀神經(jīng)元提取獲得，并于1989年獲得CNTFcDNA。1CNTF及其受體的組織分布⑴CNTF陽性細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)，CNTF陽性細(xì)胞主要分布在大腦皮質(zhì)、嗅球、小腦皮質(zhì)下區(qū)。體外培養(yǎng)的Ⅰ型膠質(zhì)細(xì)胞也可見CNTF表達(dá)。細(xì)胞內(nèi)定位：膠質(zhì)細(xì)胞主要在胞體、突起呈陰性，神經(jīng)元細(xì)胞在胞核、胞漿呈陰性[1]；但亦有不一致的報道[2]。在周圍神經(jīng)系統(tǒng)，CNTF主要分布在髓鞘/雪旺細(xì)胞、睫狀神經(jīng)節(jié)；雪旺細(xì)胞CNT呈高水平表達(dá)，主要分布于胞體和突起

3、，而核中無陽性反應(yīng)。⑵睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)以小腦CNTFR-αmRNA水平最高，其他依次為后腦、中腦、丘腦、下丘腦、紋狀體、海馬、皮質(zhì)和嗅球，且腦脊液中也存在可溶性CNTFR-α，在外周組織中以胃髓肌CNTFR-αmRNA水平最高，其次為皮膚、肺、腸、腎、肝、脾和胸腺。周圍神經(jīng)系統(tǒng)的交感神經(jīng)節(jié)、副交感神經(jīng)節(jié)均存在CNTFR。CNTF和CNTFR的分子結(jié)構(gòu)⑴人類CNTFhCNTF分子質(zhì)量為×103，酸性蛋白質(zhì)，僅在第17位有一個Cys，分子內(nèi)無二硫鍵、也無N-糖基化位點(diǎn)和信號及肽，屬于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)，而非分泌蛋白質(zhì)，與LIF、IL-6、OSM、GOS

4、F等可能同屬一個家族，富含α-螺旋結(jié)構(gòu)，具有相似的四螺旋束樣空間結(jié)構(gòu)。有A、B、C、D等4個螺旋結(jié)構(gòu)，其C端形成松散的轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲，B螺旋結(jié)構(gòu)后段和C螺旋結(jié)構(gòu)可能形成蛋白質(zhì)的疏水核心[3]。⑵CNTFRCNTFR分子質(zhì)量52×103,是由三個亞基構(gòu)成的復(fù)合體。CNTFR-α是CNTF的特異結(jié)合蛋白質(zhì)，如果缺損，gp130將與LIF結(jié)合，而不與CNTF結(jié)合；人與大鼠CNTFRα的氨基酸序列有94%的同源性，屬非跨膜蛋白質(zhì)，其借糖基-磷脂酰肌醇鍵錨在細(xì)胞膜上[4]，但可被細(xì)胞膜上的磷脂酶裂解因此CNTFR-α可以結(jié)合形式或可溶形式存在[5]。LIFR-β和gp

5、130存在于細(xì)胞膜上，參與JAK/TYK偶聯(lián)，起信號傳遞作用[6]。CNTFGNcNTFR結(jié)合過程可能是：CNTF先與可溶性CNTFR-α結(jié)合，然后再連接LIFR-β和gp130，繼而激活JAK/STAT信號傳遞通路將信號向細(xì)胞內(nèi)傳遞。CNTF和CNTFR-α基因結(jié)構(gòu)⑴hCNTF基因位于第11號染色體長臂近端，屬單拷貝基因，編碼區(qū)長600bp，兩個外顯子之前有一個1kb左右的內(nèi)含子，內(nèi)含子位于第38-39個氨基酸之間，轉(zhuǎn)錄起始位于起始密碼子上游bp，此處存在可與轉(zhuǎn)錄因子ⅡD結(jié)合的TATA序列，該序列上游91bp存在jun和fos家族二聚體的結(jié)合位點(diǎn)5'-TGA

6、HTCA-3[5，7]；終止子后650bp處有兩個聚腺苷酸AATAAT序列，這兩個AATAAT系列與保守的AATAAT系列不完全相同，產(chǎn)生編印400核苷酸的3'翻譯區(qū)。人、兔、大鼠CNTF同源性達(dá)84%左右，而與NGF的同源性卻很低。⑵CNTFR-α基因由10個外顯子和9個內(nèi)含子組成，長度至少3bp，位于染色體的9P13位置，前兩個外顯子和第10個外顯子含5'、3'非翻譯區(qū)，第3個外顯子編碼信號肽，第4個外顯子編碼Ig樣結(jié)構(gòu)域，第5-8個外顯子編碼細(xì)胞因子受體樣結(jié)構(gòu)域，第9個外顯子編碼疏水的GPI識別序列。CNTF生物活性.1營養(yǎng)神經(jīng)元CNTF的營養(yǎng)作用突出表

7、現(xiàn)在對中樞和周圍運(yùn)動神經(jīng)元的營養(yǎng)作用，不僅表現(xiàn)在對培養(yǎng)的胚胎運(yùn)動神經(jīng)元具有營養(yǎng)作用，而且在體研究亦發(fā)現(xiàn)其影響胚胎運(yùn)動神經(jīng)元的發(fā)育、分化；神經(jīng)損傷后見到雪旺細(xì)胞CNTF呈高水平表達(dá)，神經(jīng)軸突逆轉(zhuǎn)運(yùn)CNTF增加，提示CNTF參與神經(jīng)損傷后的修復(fù)、再生[8-10]，損傷后CNTF反應(yīng)性增高是細(xì)胞的保護(hù)性反應(yīng)。此外，CNTF還影響交感神經(jīng)節(jié)、感覺神經(jīng)節(jié)均有CNTFR-α表達(dá)，因此被認(rèn)為是CNTF的靶組織。新生大鼠脊髓運(yùn)動神經(jīng)元胞體對軸突損傷反應(yīng)敏感，容易導(dǎo)致胞體變性、死亡，但生后3周這種易感性明顯減弱，可能與此時雪旺細(xì)胞CNTFmRNAT蛋白質(zhì)水平較高有關(guān)；利用同源重

8、組技術(shù)修飾CNTF基因使其失活，可導(dǎo)致