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1、沙棘粉對(duì)衰老模型小鼠腦組織MDA和GSH含量的影響及其抗疲勞效果的研究作者:陳軼玉,喬慧,陸培培,黃成【摘要】采用昆明小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)飼喂不同比例的沙棘粉飼料4周以后，在抗疲勞實(shí)驗(yàn)中，以血清乳酸脫氫酶(LDH)活力、血乳酸(BLA)、肌糖原(MG)、肝糖原(LG)等4個(gè)生理參數(shù)為指標(biāo)觀察沙棘粉的抗疲勞效應(yīng)，結(jié)果表明，飼喂4周沙棘粉劑的小鼠，其LDH、LG含量均顯著高于對(duì)照組；其抗疲勞時(shí)間亦顯著增長(zhǎng)，且抗疲勞實(shí)驗(yàn)30min和60min后的血乳酸水平均低于對(duì)照組。在檢測(cè)小鼠腦組織的MDA和GSH含量時(shí)發(fā)現(xiàn)4％～6％劑量沙棘粉能降低MDA含量，提高GSH含
2、量，表明沙棘粉能拮抗D-半乳糖的損傷，達(dá)到維生素相同效果?！娟P(guān)鍵詞】沙棘粉；衰老小鼠；腦組織氧化還原物質(zhì)；抗疲勞效果沙棘制品不僅可以作為餌料中的維生素源，還可制成供人類食用的產(chǎn)品。沙棘果享有“維生素倉(cāng)庫(kù)”和“神秘果”之稱，沙棘果中含有豐富的生物活性物質(zhì)，具有祛痰、利肺、養(yǎng)胃、健脾等功效，對(duì)心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗腫瘤、抗衰老、抗炎、抗輻射損傷等方面均有顯著的藥理效應(yīng)［1］?？梢灶A(yù)見，沙棘制品的市場(chǎng)前景十分可觀，而目前我國(guó)沙棘資源浪費(fèi)嚴(yán)重。因此開發(fā)利用此資源已迫在眉睫。西部地區(qū)政府及種植戶迫切希望高等學(xué)校、科研院所開展沙棘資源開發(fā)利用的研究，本實(shí)驗(yàn)采用沙棘
3、果的干粉作為實(shí)驗(yàn)材料，通過(guò)飼喂昆明鼠4周以后，進(jìn)行其抗疲勞效果的研究，為沙棘資源開發(fā)利用提供基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)參數(shù)。1材料與方法動(dòng)物來(lái)源及實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選自南京安立默實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖調(diào)劑中心，在分組前選用了出生日齡及體重都基本相同的昆明小鼠；實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所為南京大學(xué)藥業(yè)有限公司動(dòng)物房。實(shí)驗(yàn)分組取小白鼠147只，隨機(jī)分成7個(gè)大組，每組均為21只，組1作為飼喂添加復(fù)合維生素的對(duì)照組，組2作為飼喂無(wú)復(fù)合維生素飼料的空白對(duì)照組，組3～組7作為飼喂添加比例不同的沙棘粉飼料實(shí)驗(yàn)組，小鼠均單籠飼養(yǎng)4周。飼喂劑量及配方每日投喂足量飼料和水，各組飼料配方如表1。表1各組配方成分表LDH活
4、力、BLA、MG、LG含量測(cè)試抗疲勞實(shí)驗(yàn)前，從每組取小鼠3只，眼眶放血制血清送檢，測(cè)試乳酸脫氫酶活力、肌糖原和肝糖原，LDH活力，參數(shù)King氏法測(cè)定［2］?？蛊趯?shí)驗(yàn)抗疲勞試驗(yàn)依陳奇方法［3］，將飼喂4周的小組分別取12只按小鼠體重10%負(fù)重砝碼，于水溫25～27℃、40cm深、直徑為20cm的標(biāo)本瓶中游泳，進(jìn)行抗疲勞試驗(yàn)。待其頭部沒入水下5秒時(shí)迅速撈起，記錄游泳時(shí)間，待其恢復(fù)30min后各取6只眼眶放血，制備血清，待送檢測(cè)試BLA，各組剩余6只待其恢復(fù)60min后再眼眶放血，制血漿送檢測(cè)試BLA?？紤]到在對(duì)每一只鼠的每一次取血操作時(shí)，對(duì)動(dòng)物造成不同程
5、度傷害性刺激，由此引起的抗疲勞強(qiáng)度無(wú)法保持一致，故而設(shè)計(jì)成每一個(gè)實(shí)驗(yàn)測(cè)定都分批取樣，進(jìn)行一次性采血。小鼠腦組織MDA、GSH含量取飼喂4周的小鼠，每組6只，斷頸處死，迅速取出大腦，用冰冷的PBS緩沖液制備10%腦勻漿，離心后取上清液進(jìn)行MDA和GSH含量測(cè)定。測(cè)定步驟按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，MDA、GSH測(cè)定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。2結(jié)果飼喂4周后各組小鼠LDH活力、MG、LG與BLA值見表2。飼喂4周后各組小鼠血液指標(biāo)初始值，各組取6只小鼠眼眶測(cè)試MG、LG、BLA和LDH，因這批動(dòng)物取自抗疲勞動(dòng)物之前，故稱為初始數(shù)值，表2為測(cè)試結(jié)果。表2各組
6、小鼠LDH活力、MG、LG與BLA初始值(x±s)注：表中不同組的相同指標(biāo)中，*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性由表2統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果可知，g3～g5沙棘粉組的小白鼠，其MG和LG含量均顯著大于空白組(PPP抗疲勞及血乳酸指標(biāo)各組隨機(jī)取12只鼠，做抗疲勞實(shí)驗(yàn)，于其休息30min、60min兩個(gè)階段各取6只放血制血清測(cè)試BLA含量，各組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行均數(shù)差顯著性檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。表3抗疲勞時(shí)間、30min與60min的BLA數(shù)值及其均數(shù)差檢驗(yàn)(x±s)注：*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性由表3測(cè)試結(jié)果可推算：飼喂2%～6%沙棘粉的小白
7、鼠抗疲勞時(shí)間比對(duì)照組延長(zhǎng)～，且差異有非常顯著性（PPP血乳酸變異級(jí)差及其恢復(fù)速度由于各組抗疲勞運(yùn)動(dòng)前的血乳酸含量初始值不同，故僅僅使用抗疲勞后30min和60min的血乳酸含量差異性還不足以說(shuō)明動(dòng)物在疲勞運(yùn)動(dòng)后乳酸清除速度大小，因此依據(jù)表3與表2可推算各組血乳酸變異級(jí)差和恢復(fù)速度，見表4。表4抗疲勞后30min與60min血乳酸BLA濃度變異級(jí)差和恢復(fù)速度注：BLA濃度變異級(jí)差：Bt-B0；恢復(fù)速度：(Bt2-Bt1)/(t2-t1)各組小鼠腦組織MDA、GSH含量灌喂沙棘油后各組小鼠腦組織MDA、GSH含量變化見表5。表5灌喂沙棘油各組小鼠腦組織GSH
8、及MDA含量(x±s)注：*表示差異有顯著性；**表示差異有非常顯著性由表5可以
