熊果酸的研究進(jìn)展

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1、熊果酸的研究進(jìn)展作者：肖坤福鄭云法劉成左張春?！娟P(guān)鍵詞】熊果酸；,,,檢測方法；,,,提取方法；,,,動物實(shí)驗(yàn)；,,,臨床研究熊果酸是廣泛存在于白花蛇舌草、女貞子、烏梅、夏枯草等天然植物中的一種五環(huán)三萜類化合物，有研究表明熊果酸具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、降血糖等多種生物學(xué)效應(yīng)，早在1996年，日本學(xué)者神藏美枝子等人從杜鵑花科越桔屬植物越桔葉中提取了具有較高熊果酸濃度的熊果酸產(chǎn)品，產(chǎn)品中除含有25%的熊果酸外，尚含有大量的熊果酸衍生物、熊果苷和其它三萜類化合物等，具有多種活性成分，用于增強(qiáng)機(jī)體免疫力、預(yù)防心血

2、管系統(tǒng)疾病、穩(wěn)定肝功能等?，F(xiàn)在人們對其研究越來越多，并在很多方面取得了可喜的研究進(jìn)展。　　1提取方法對三萜類化合物的分離提純是其研究起點(diǎn)，沒有較好的提取工藝，就更談不上對其進(jìn)一步研究。近年來，許多科研工作者在這方面做出了突出的貢獻(xiàn)。有些科研工作者［1～5］，通過正交實(shí)驗(yàn)確定85%～95%的乙醇提取熊果酸效果最佳。崔星明等［6］采用超臨界流體萃取得到的蘆筍提取物，用甲醇溶解，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測，得到了56個(gè)組分。發(fā)現(xiàn)有保留時(shí)間和熊果酸基本一致的峰。其質(zhì)譜分子離子峰和特征碎片峰都與熊果酸的一致，確定該化合物

3、為熊果酸。　　2檢測方法在檢測方法方面，有不少科研工作者對其進(jìn)行了較深入的研究。熊慧敏［7］全面地論證了薄層層析-雙波長掃描法測定大山楂咀嚼片中熊果酸含量的檢測限的線性范圍可行性，并考查了此方法的測定熊果酸的穩(wěn)定性和重復(fù)性，從而證明薄層層析-雙波長掃描法測定熊果酸精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、回收率均都達(dá)有關(guān)規(guī)定的要求，本方法操作簡單方便，結(jié)果可靠，可作為檢驗(yàn)產(chǎn)品質(zhì)量的一個(gè)快速而實(shí)用的定量方法。朱玉琴等［8］在采用薄層掃描檢測保駕膠囊中熊果酸的含量時(shí)首次對顯色劑進(jìn)行了改進(jìn)，并驗(yàn)證了醋酸-濃硫酸(9∶1)比10%硫酸乙醇

4、顯色要好，檢測限低等優(yōu)點(diǎn)。與此同時(shí)，楊云等［9］在采用薄層層析檢測牙周康泰膠囊熊果酸的含量驗(yàn)證了10%磷鉬酸乙醇液比10%硫酸乙醇顯色要好。羅啟劍等［10］采用分光光度法測定連錢草中熊果酸含量。郭艷玲等［11］和陳志強(qiáng)［12］采用薄層掃描法分別測定了補(bǔ)腎顆粒和消食貼中熊果酸含量，方法簡便、快速、準(zhǔn)確，可作為該產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法。周靜等［13］探求用毛細(xì)管氣相色譜法測定女貞子中齊墩果酸和熊果酸含量。取女貞子氯仿提取液自然揮發(fā)干，甲醇溶解經(jīng)甲酯化后，進(jìn)樣分析。色譜條件：HP－1毛細(xì)管柱，柱溫280℃，氮?dú)鉃檩d氣，氫火

5、焰檢測器。分析結(jié)果表明熊果酸的線性良好，回收率為%±%。所建立的氣相色譜法可以作為女貞子藥材的質(zhì)量檢測方法。施慧君等［14］采用HPLC法測定知柏地黃沖劑中熊果酸的含量。選用ODS-C：色譜柱，流動相：甲醇-水(99∶1)，磷酸調(diào)，檢測波長：20nm，流速：/min，柱溫25℃的條件下，熊果酸線性關(guān)系良好(r=)平均回收率達(dá)%(RSD=%)。羅曉清等［15］采用RP-HPLC法測定石精葉中熊果酸含量，色譜柱為ZorbaxODS柱，用甲醇，醋酸水溶液(88∶12)為流動相。檢測波長為215nm。結(jié)果熊果酸和齊墩果酸

6、的平均收率分別為%、%(n=3)。RSD分別為%，%(n=3)。方法準(zhǔn)確、靈教、快速，可作為石抽葉藥材的質(zhì)量檢測方法之一。楊書良等［16］采用高效液相色譜法從影響熊果酸測定的各個(gè)方面(例如：粒度、煎煮次數(shù)、溶媒量、提取時(shí)間等)進(jìn)行測定和和正交分析，從而論證了它比薄層層析法更精確、更可靠、靈敏度更高，重現(xiàn)性更好。鞠建華等［17］，也采用高效液相色譜測定熊果酸含量，但他在前人的基礎(chǔ)上調(diào)節(jié)流動相的比例和加入改性劑乙酸胺，驗(yàn)證了此改進(jìn)方法可以使熊果酸和它的同分異構(gòu)體齊墩果酸達(dá)到基線分離，并使基線平穩(wěn)、峰型和分離效果較佳。

7、鄢立新等［18］在采用高效液相色譜測定熊果酸時(shí)通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了在流動相中加入少量的醋酸可提高熊果酸的分離度，因?yàn)樯倭看姿岬募尤胧沽鲃酉嗾舭l(fā)所需的漂移管溫度和氣體流速應(yīng)比初始條件高，可以在試驗(yàn)中逐漸增加漂移管溫度和氣體流速。劉海興等［19］首先采用毛細(xì)管電泳法測定熊果酸含量的方法,此方法能有效地分離和測定熊果酸，測定精密度比其它方法高，最易適合低含量測定，此方法準(zhǔn)確、樣品及試劑消耗少等優(yōu)點(diǎn)。但此方法可操作性難度大，不適合簡捷檢測。閆花麗等［20］曾經(jīng)采用重氮甲烷衍生化氣相色譜法測定熊果酸的含量，此方法精密度高，檢測限

8、低，并克服了齊墩果酸和熊果酸(二者是性質(zhì)和結(jié)構(gòu)相似)難分離、難分別測定等優(yōu)點(diǎn)。但此方法工藝繁鎖，可操作性難度大，故現(xiàn)在很少有人使用此方法。也有人如皮文霞等［21］采用分光光度法測定熊果酸的含量。此方法很少有人采用，因?yàn)榇朔椒ň_度不夠，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差，不便采用。3藥理效應(yīng)在藥理研究方面也取得了可喜的成就。黃鏡等［22］采用MTT法、DNA凝膠電泳、形態(tài)學(xué)等方法觀察到熊果酸抑