大黃蟲丸經(jīng)旁分泌途徑對早期肝纖維化的干預(yù)作用.doc

《大黃蟲丸經(jīng)旁分泌途徑對早期肝纖維化的干預(yù)作用.doc》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、大黃蟲丸經(jīng)旁分泌途徑對早期肝纖維化的干預(yù)作用作者：成家茂，潘志恒，謝瑤，何宏文，曲懷剛【摘要】目的觀察大黃蟲丸經(jīng)旁分泌途徑對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖及其表迗TGF-P1基因的影響。方法采用Nycodenz分離液非連續(xù)密度梯度離心法同步分離急性CC14損傷模型大鼠和正常大鼠肝的枯否細(xì)胞和星狀細(xì)胞。在制備正常鼠血清和大黃蟲丸藥物血清的基礎(chǔ)上，將它們分別加入KC培養(yǎng)板內(nèi)作用48h后制備成正常鼠KC條件培養(yǎng)液和損傷鼠KC條件培養(yǎng)液。將NKCCM和KCCM作用于活化的HSC24h后，采用MTT法和3H-TdR摻入法檢測HSC增殖的變化；采用半定量RT-PCR法擴(kuò)增TGF-3ImRNA以檢測

2、HSC表達(dá)TGF_P1基因的情況。結(jié)果旁分泌組各組的HSC增殖幅度及TGF-01基因的相對表達(dá)量較正常對照組NKCCM組均明顯增加。同時(shí)旁分泌組中，含藥血清作用的5%，10%和20%KCCM組較無藥物血清作用的0%KCCM組HSC的增殖能力及TGF-01基因的相對表達(dá)量則下降，且隨藥物濃度的升高逐漸降低，其組間差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論大黃蟲丸可明顯抑制經(jīng)旁分泌途徑活化的大鼠HSC的增殖及TGF-31基因的表達(dá)，且其抗肝纖維化效應(yīng)與藥物劑量間存在一定的依賴關(guān)系?！娟P(guān)鍵詞】大黃蟲丸肝纖維化肝星狀細(xì)胞旁分泌Abstract:ObjectiveToobservetheeffectso

3、fDahuangZhechongPillontheproliferationofrathepaticstellatecells(HSCs)activatedbyparacrinepathwayandtheexpressionoftransforminggrowthfactor-beta1(TGF_31)CC14-injuredandnormalratKupffercells(KCs),hepaticstellatecellswereseparatedbynon-continuousdensitygradientcentrifugationofNycodenzmedium.A

4、fterthecommonratandthedrugseraprepared,theywereaddedrespectivelyintoKupffercellcultureplatesfornormalKupffercellsconditionedmedium(NKCCM)andinjuredratKupffercellsconditionedmedium(KCCM)after48h.WeobservedthechangesofproliferativeHSCsbythemethodsofMTTand3H-thymidine(3H-TdR)incorporationassa

5、y,andtheexpressionofTGF-31geneinHSCsbysemi-quantitativeRT-PCRwhenHSCswereactivedfor24hbythoseconditionedallparacrinegroups,themultiplicationofHSCsandtherelativeexpressionofTGF-0lgenewereincreasedmarkedlycomparedtonormalcontrolgroup(P

6、ngPillcanobroliferationofratHcrinepathwayandthegeneinHSCsanddeereinaconcentration一uallydecreasedinalmgroupswithelevatetdiferencesamongalviouslyinhibitthepSCsactivatedbyparaexpressionofTGF-31Liverfasehepaticfibrosisdependentmanner.ibrosis；Keywords:DahuangZhechongPill；Hepaticstellatecell；Par

7、acrine肝纖維化是從各型慢性肝病轉(zhuǎn)化為肝硬化的一個(gè)重要病變過程，有效逆轉(zhuǎn)肝纖維化已成為防治肝硬化的重要手段它是一個(gè)伴隨肝內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)增多和沉積的瘢痕化過程，在細(xì)胞和分子水平上以HSC的活化、轉(zhuǎn)化生長因子31及其下游細(xì)胞調(diào)節(jié)因子活性異常為主要特征［1］。因此，抑制HSC活化和減少肝組織內(nèi)TGF-P1的表迗是逆轉(zhuǎn)肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。大黃蟲丸具有緩中補(bǔ)虛、活血化瘀、通絡(luò)軟堅(jiān)等功效，以往的臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明該藥在防治肝纖維化方面效果明顯［2,3］。本實(shí)驗(yàn)擬觀察大黃蟲丸對CC14損傷大鼠肝組織內(nèi)經(jīng)旁分泌途徑活化的星狀細(xì)胞