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1、ELISA,RPR、Trust、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果分析劉裨成易明忠1.常寧市疾病預(yù)防控制屮心檢驗科421500;2.常寧市屮醫(yī)院檢驗科421500【摘要】目的:分析ELISA,RPR、TRUST、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果。方法:選擇我中心性病艾滋病科2014年7月-2015年6月進行檢查的157份梅毒患者血淸標(biāo)本,選擇同期在我屮心性病艾滋病科進行檢查的非梅毒患者血清146份。所有血液樣本均經(jīng)ELISA,RPR、TRUST、TPPA四種方法檢測,回顧性分析患者檢查結(jié)果。結(jié)果:梅毒患者經(jīng)四種檢驗方法檢測為陽性率分別為96.82%、96.18%、80
2、.25%、86.62%;而非梅毒患者檢出陽性患者較少,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。另外,經(jīng)卡方檢驗,TPPA和ELISA在陽性及假陽性檢出率上均顯著優(yōu)于Trust和RPR,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。而RPR與Trust比較無明顯差異(p>0.05)o結(jié)論:TPPA和ELISA可以作為檢驗梅毒螺旋體抗體的指標(biāo),RPR與Trust則不適用于篩查梅毒螺旋體抗體,因此在實際的臨床診斷屮應(yīng)合理使用?!娟P(guān)鍵詞】梅毒螺旋抗體;酶聯(lián)免疫吸附;明膠凝集試驗;陽性率梅毒是臨床上常見的一種經(jīng)性途徑傳播的疾病,因蒼白螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性疾病。梅毒螺旋體存在于患者的皮膚、黏膜屮,當(dāng)
3、攜帶梅毒螺旋體的患者與正常人性接觸后,皮膚或粘膜如果有細(xì)微的破損,可導(dǎo)致正?;颊呋疾?。梅毒的潛伏期較長,傳染性較高,很多患者在患病后早期無明顯癥狀,因此及早的診斷和治療是控制傳染率,提高患者生活質(zhì)量的關(guān)鍵[1】。ELISA,RPR、Trust、TPPA四種方法是臨床上針對該病的主要診斷方式,本次研宄就我屮心性病艾滋病科檢查的157例梅毒患者作為研宂對象,探討四種檢測方法檢測梅毒螺旋體的效果。1資料與方法1.1一般資料選擇我中心性病艾滋病科2014年7月-2015年6月進行檢查的157份梅毒患者血清標(biāo)本,選擇同期在我中心性病艾滋病科進行檢査的非梅毒患者血清146份。157例梅毒患者中
4、,男66例,女91例,年齡最小的15歲,年齡最大的65歲,平均(41.4±6.5)歲。146例非梅毒患者中男75例,女71例,年齡最大的68歲,最小的17歲,平均(42.4±6.8)歲。排除意識障礙、嚴(yán)重肝腎功能疾病和不簽署同意書的患者,兩組患者在性別、年齡等資料上比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)o1.2試劑與儀器ELISA檢測試劑:上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)RPR檢測試劑:上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)Trust檢測試劑:上海榮盛生物藥業(yè)冇限公司生產(chǎn)TPPA檢測試劑:日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)試劑均在效期內(nèi)使用儀器:意人利亞特斯公司生產(chǎn)NEXG
5、ENfour–ADALTIS全自動酶聯(lián)免疫分析儀,離心機,水浴箱,OLYMPUS光學(xué)顯微鏡1.3方法和結(jié)果判定1.3.1所冇檢測操作程序和結(jié)果均按照試劑及儀器說明書嚴(yán)格執(zhí)行。1.3.2抽取患者靜脈血3ml,置于真空采血管中,加入3.2%檸檬酸鈉抗凝劑(四川綿竹鴻基制藥有限責(zé)任公司,國藥準(zhǔn)字H20073118),用羥乙基淀粉以離心機3000r/min離心兩次,將部分紅細(xì)胞和多余的血漿分離,并置于-20°C的冰箱內(nèi)保存[3]。1.3.3TPPA陽性:將血清和TPPA混合,將梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與血清中梅毒螺旋抗體結(jié)合,產(chǎn)生玫瑰紅色時判斷為陽性。EUSA陽性:使用純化的梅毒
6、螺旋體重組蛋白抗原以包被固相板條,加梅毒血清和辣根過氧化物酶標(biāo)記的人IgG抗體,利用儀器檢測特異性梅毒抗體數(shù)量。RPR陽性:將RPR抗原懸浮液加入血清中,以旋轉(zhuǎn)儀水平轉(zhuǎn)動紙卡,在光線充足的情況下,形成黑色凝集塊則判定為陽性。Trust陽性:使用卵磷脂、心磷脂和膽固醇作絮狀凝集試驗,Trust中加入甲苯胺紅顆粒,出現(xiàn)紅色絮狀凝集則判斷為陽性。1.4統(tǒng)計學(xué)處理將統(tǒng)計數(shù)據(jù)納入統(tǒng)-表格,以SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件,對其進行合理數(shù)據(jù)處理與分析,經(jīng)卡方驗證計數(shù)資料(n%),經(jīng)t驗證計量資料(?x±s),當(dāng)P<0.05時,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果梅毒患者經(jīng)四種檢驗方法檢測為
7、陽性率分別為96.82%、96.18%、80.25%、86.62%;而非梅毒患者未檢出陽性患者較少,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。另外,經(jīng)卡方檢驗,TPPA和ELISA在陽性及假陽性檢出率上均顯著優(yōu)于Trust和RPR,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。而RPR與Trust比較無明顯差異(p>0.05),詳見表1。3討論梅毒螺旋體也就是梅毒的病原體,其不易著色、透明,只在人類中感染,分為獲得性梅毒和胎傳梅毒兩種類型。獲得性梅毒主要通過性接觸傳染,而胎傳梅毒