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《丹參注射液對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、丹參注射液對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響[]目的研究丹參注射液對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的影響。方法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型，采用HE染色法觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化、透射電鏡觀察腦組織超微結(jié)構(gòu)變化、黃嘌呤氧化酶法測定腦組織血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥法測定丙二醛(MDA)含量。結(jié)果丹參注射液組再灌注后與相應(yīng)假手術(shù)組相比腦組織MDA含量降低、SOD含量升高(P<0.01)；丹參注射液組再灌注后與模型組相比腦組織中MDA含量降低，SOD含量升高(P<0.05)。結(jié)論丹參注射液通過降低腦組織中NDA的含量，升高腦
2、組織中SOD的含量，從而減輕腦缺血損害?！ 關(guān)鍵詞]腦缺血再灌注；丹參注射液；超氧化物歧化酶；丙二醛 []R-33[]B[]1005-0515（2011）-12-041-02 近年來，氧化應(yīng)激學(xué)說在缺血性腦血管疾病中的地位日益重要[1]。腦缺血后氧化物生成系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)之間的平衡被打破，組織內(nèi)生成大量的自由基可以引起細胞膜脂質(zhì)過氧化，從而導(dǎo)致細胞膜破壞、細胞溶解、組織水腫和線粒體功能下降等一系列損害作用[2]。本研究采用栓塞大鼠大腦中動脈并再灌注模型，觀察丹參注射液對局灶性腦缺血再灌注損傷的影響及其作用機制?！ ?材料與方法
3、 1.1材料動物為健康清潔級SD大鼠,雌雄各50只,體重300g-350g，由重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提供；主要儀器為2135型石蠟切片機(德國LEICA公司)，H-600IV型透射電鏡(日本日立公司)，Olympus照相顯微鏡(日本)；試劑為丙二醛(MDA)試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒(南京建成生物有限公司)，丹參注射液(正大青春寶藥業(yè)有限公司)?！ ?.2實驗方法從50只大鼠隨機抽出10只為假手術(shù)組，余進行造模；符合納入標準的大鼠采用隨機數(shù)字表方法均分為模型組、丹參注射液組，每組10只。參考Zealonga[3]的方
4、法,結(jié)扎大鼠頸外動脈，自頸總動脈分叉處向頸內(nèi)動脈插入栓線18.5±0.5mm阻斷大腦中動脈血流，造成局灶性腦缺血。術(shù)后將栓線尾部置于皮下，缺血2h后輕拔栓線造成血流再灌注。假手術(shù)組大鼠只進行麻醉和血管分離術(shù)。參考Longa[3]的方法進行評分，評分在1-3分的大鼠納入實驗分組?！ ?.3治療方法①丹參注射液組：從術(shù)前3天開始等量丹參注射液腹腔注射，大鼠體重(kg)*20/3ml，每日1次。②模型組按同樣方法予以等量生理鹽水腹腔注射。③假手術(shù)組同樣抓取，不做其它任何處理?！ ?.4標本的制備與檢測 1.4.1腦組織病理切片的制取分別
5、于缺血再灌注后取各組大鼠各4只，用10%水合氯醛(0.3ml/100mg)腹腔注射麻醉，打開頸部，暴露右側(cè)頸總動脈，插管輸注4%多聚甲醛約50ml灌注固定，斷頭取腦,取左側(cè)大腦制作切片標本：在距額極2mm和距尾極1mm處各切一刀，取中間段制成光、電鏡標本，觀察神經(jīng)細胞的超微結(jié)構(gòu)變化?！ ?.4.2腦組織MDA、SOD檢測各組大鼠余下6只斷頭處死，在冰盤上迅速取腦，稱取左側(cè)大腦組織，放入玻璃勻漿管(玻璃勻漿管下端置于冰水混合物中)進行勻漿。將10%的組織勻漿在低溫離心機中以3000r/min，離心10min，取上清液根據(jù)試劑盒說明，進
6、行含量檢測。SOD采用黃嘌呤氧化酶法，MDA采用硫代巴比妥酸法檢測。 1.4.3HE染色切片經(jīng)脫蠟脫水后哈瑞氏蘇木精染核，1%鹽酸酒精分化，氨水返藍，伊紅染色，脫水，透明后中性樹膠封片?！ ?.5統(tǒng)計學(xué)方法全部數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，各項指標采用均數(shù)±標準差(x±s)表示，組間比較采用方差分析，不同組間比較用q檢驗。 2結(jié)果 2.1假手術(shù)組與模型組、丹參注射液組大鼠腦組織MDA、SOD含量的比較(x±S) 圖表說明：1)在假手術(shù)組大鼠腦組織MDA、SOD的含量呈基礎(chǔ)水平變化。2)模型組再灌注后與相應(yīng)假手術(shù)組相比腦組
7、織MDA含量升高、SOD的含量降低,有極顯著差異(P<0.01)。3)丹參注射液組再灌注后與假手術(shù)組、模型組相比腦組織MDA含量降低、SOD含量升高,有極顯著差異(P<0.01)?！ ?.2對缺血性再灌注后腦組織形態(tài)學(xué)觀察 2.2.1HE染色光鏡下觀察結(jié)果光鏡下檢查，模型組缺血側(cè)大腦皮層和紋狀體出現(xiàn)嚴重的神經(jīng)細胞變性壞死，其中皮層錐體細胞表現(xiàn)為胞體固縮,核濃縮、深染，染色質(zhì)濃縮、邊聚，胞漿呈嗜酸性改變，細胞與周圍組織形成顯著的間隙，間質(zhì)疏松，出現(xiàn)空泡性變性。而假手術(shù)組神經(jīng)細胞核仁清晰、核圓形，核膜完整。丹參注射液組可顯著改善上述病
8、理變化。圖示如下： 圖1丹參注射液組腦組織HE染色(×10) ?。枋觯耗X組織壞死程度最輕，極少部分腦組織稍水腫。） 2.2.2透射電鏡下觀察結(jié)果電鏡下檢查,模型組缺血側(cè)大腦組織超微結(jié)構(gòu)發(fā)生嚴重脫髓鞘病變，線粒體腫脹，粗面內(nèi)質(zhì)X擴
