微波消解法在蛋白質(zhì)含量測定中的應(yīng)用

《微波消解法在蛋白質(zhì)含量測定中的應(yīng)用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、微波消解法在蛋白質(zhì)含量測定中的應(yīng)用全德甫孫華杰白江濤林俊香（深圳市寶安區(qū)觀瀾預(yù)防保健所廣東深圳518110）【中圖分類號】R446【文獻標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-5085（2012）24-0018-02【摘要】目的探討微波消解法在食品中蛋白質(zhì)含量測定中的應(yīng)用的可行性。方法用微波消解法代替凱氐定氮法中的消化方式，消化好的試樣以定氮法測定。結(jié)果改進法與經(jīng)典方法比較，測定結(jié)果基木一致，經(jīng)t檢驗無顯著性差異（t=0.4262,P〉0.05），方法精密度：RSD<3%（n=6），平均回收率=98.2%。結(jié)論該法操作

2、簡便，分析速度快，空氣污染小，試劑用量少，可用于食品中蛋白質(zhì)的測定。【關(guān)鍵詞】微波消解法食品蛋白質(zhì)含量測定凱氏定氮法是測定食品中蛋白質(zhì)含量的法定方法［1］,測定結(jié)果穩(wěn)定、準確，但樣品的消化費事費時，試劑消耗量大，且消化時排放的SO2直接危害分析人員身體健康。微波消解法具有操作簡便，消化速度快，試劑用量少，空氣污染小等優(yōu)勢。實驗證明，用微波消解法代替凱氏定氮法中的消化方式，測定結(jié)果與法定方法無顯著性差異，適用于大批量蛋白質(zhì)含量的測定。1材料及方法1.1儀器及試劑1.1.1儀器XT-9900型智能微波消解儀（上海新拓微波

3、溶樣測試技術(shù)有限公司出品）;AUW220D電子天平；定氮蒸餾裝置。1.1.2試劑六次甲基四胺（標(biāo)準品）；C（HCI）=0.0100mol/L的鹽酸標(biāo)準滴定溶液；其余同國家標(biāo)準［1］。1.2實驗方法1.2.1樣品消解稱取0.1?0.5g混勻固體樣品或1?5mL液體樣品于溶樣杯中，加5?8mL硫酸，稍搖勻后加1?2mL過氧化氫，按表1進行樣品消解，消解后樣液應(yīng)為清澈的溶液，放冷后，定容至25?lOOmL，混勻備用。取與處理樣品相同的硫酸、過氧化氫按同一方法做試劑空白實驗。表1樣品消解程序同吋使用凱氏法[1】進行蛋白質(zhì)消解

4、，進行比較實驗；取乳及乳制品、保健品等5份樣品，分別稱取6份進行蛋白質(zhì)消解，進行精密度試驗；另用標(biāo)準品六次甲基四胺作準確度試驗。1.2.2定氮測定按國家標(biāo)準[1】中(GB/T5009.5-2003)食品中蛋白質(zhì)的測定方法(4.3)微量定氮法進行操作。2結(jié)果2.1不同消解方法蛋白質(zhì)測定結(jié)果的比較：對保健品、乳及乳制品等15份樣品，用凱氏燒瓶和微波消解儀消化樣品，分別測定蛋白質(zhì)含量，結(jié)果見表2。表2兩種消解方法蛋白質(zhì)測定結(jié)果比較兩種方法消化樣品，蛋白質(zhì)含量測得結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理表明無顯著差異。2.2方法精密度試驗結(jié)果見表3

5、。表3方法精密度試驗結(jié)果(n=6)2.3方法準確度試驗取3份樣品，分別加入一定量的六次甲基四胺，按上述方法測定，該基準物的理論含氮量為39.6%[2],結(jié)果見表4。表4冋收率試驗結(jié)果3討論3.1蛋白質(zhì)測定中消化方法改為微波消解法，由于樣品與試劑的反應(yīng)是在密閉的容器內(nèi)進行的，所以對環(huán)境的污染和對分析人員的毒害大大減?。挥肏2SO4-H2O2混合液為消化試劑，試劑用量少，消化速度快且消化徹底；儀器在設(shè)定好所需的壓力值、微波加熱時間和微波功率的條件下，即可自動完成全部操作，操作方便，減輕了分析人員的勞動強度，提高了工作效率

6、。3.2可視樣品蛋白質(zhì)含量高低，適當(dāng)增減取樣量，如遇在常溫下需要長時間起反應(yīng)的樣品，或樣品的稱量增加，可將準備好的樣品放置過夜，或在電熱板上低溫稍加熱進行預(yù)處理，并不斷搖動溶樣杯，待反應(yīng)緩和后再進行微波消解。過氧化氫可緩慢趁熱加入，并不斷搖動溶樣杯，效果會更好，且大大縮短消化吋間。3.3干的樣品放入溶樣杯后，需先用少量去離子水濕潤，溶樣杯內(nèi)溶液體積保持在5?15mL，液面太低壓力上升緩慢，太高容易造成壓力過沖，超壓泄氣。消解程序中的第一檔，功率可調(diào)至60%?80%,第二、三檔再調(diào)至100%,防止壓力上沖，造成危險。實

7、驗結(jié)果表明，改進法與經(jīng)典方法比較，測定結(jié)果基本一致，經(jīng)t檢驗無顯著性差異(t=0.4262,P>0.05)，方法精密度:RSD<3%(n=6)，平均冋收率=98.2%,且簡便易行，適用于大批量蛋白質(zhì)含量的測定。參考文獻[1]GB/T5009.5-2003食品中蛋白質(zhì)的測定.[2】單季先，陳悅.食品中蛋白質(zhì)含量測定方法的探討.中國衛(wèi)生檢驗雜志,2005,15(4),453.