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1、HBV感染患者外周血IL作者：馮美仙葉君倪超周歡【關(guān)鍵詞】HBV IL-15參與單核/巨噬細胞與T、B淋巴細胞之間的調(diào)控。本研究對105例乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清IL-10、IL-15、HBVDNA和ALT進行檢測,以探討其在HBV感染慢性化中的意義?！ ?資料與方法 1.1一般資料 105例HBV感染患者為2006年9月至2007年10月，本院及臺州市第二人民醫(yī)院收治的慢性乙型肝炎52例、肝炎后肝硬化30例及原發(fā)性肝癌23例，男70例,女35例；年齡26～68歲。為HBV感染疾病組。肝炎后肝硬化診斷標準，參照2000年全國第10次(西安)傳染病與寄生蟲病會議修訂的診
2、斷標準［３］,原發(fā)性肝癌診斷標準參照1999年第四屆全國肝癌學術(shù)會議修訂的原發(fā)性肝癌的診斷標準和臨床分期標準［４］。各種肝炎病毒血清標志物均為陰性的健康體檢者15例，為正常對照組。 1.2標本處理 受檢對象取靜脈血3ml,盡快低溫離心,分離血清裝2支試管,-80℃保存待測,預留取部分血清進行肝功能檢測。待收集齊標本,由專人一次性檢測IL-10、IL-15與HBVDNA?！ ?.3方法 (1)IL-10檢測:采用雙抗體夾心ELISA法,試劑為YESBiotechLaboratoriesLTD產(chǎn)品(Canada),LotNum:I10JA200-2,酶聯(lián)物為辣根過氧化物酶。(2)I
3、L-15含量用雙抗體夾心ELISA法檢測,試劑盒由上海晶美公司提供。(3)HBVDNA定量PCR:采用實時FQ-PCR,連續(xù)檢測反應體系中熒光信號變化。測定儀器為PE7700熒光定量基因分析儀(PerkinElmerUSA)。測定試劑由深圳匹基公司提供。(4)ALT用速率法在全自動生化分析儀(OLYMPUSAU640,日本)檢測。以上均嚴格按說明書操作?！ ?.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件，兩標本比較用t檢驗，多個樣本均數(shù)比較用方差分析。 2結(jié)果HBV感染患者血清IL-10、IL-15水平與HBVDNA復制水平的關(guān)系見表1。HBV感染患者血清IL-10、IL-15與
4、ALT關(guān)系見表2。HBV感染不同階段IL-10、IL-15水平比較見表3。表1HBV感染患者血清IL-10、IL-15水平與HBVDNA復制水平關(guān)系(略)注:與正常對照組相比較P<0.05表2HBV感染患者血清IL-10、IL-15與ALT關(guān)系(略)注:與正常對照組相比較P<0.05表3HBV感染不同階段IL-10、IL-15水平比較(略)注：與慢性乙型肝炎及肝炎后肝硬化組比較*P<0.05 3討論HBV感染的成年人中大約有5%～10%的人轉(zhuǎn)為慢性,其慢性化機制在很大程度上仍不清楚。原發(fā)性肝癌與乙型肝炎病毒感染有很大關(guān)系,這也得到了很多學者的認可。而它的發(fā)病機制至
5、今卻仍不很清楚,細胞因子可能參與了乙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展及結(jié)局。Th1/Th2細胞失衡與乙型肝炎慢性化有關(guān)。研究認為:急性HBV感染恢復者的CD4+T細胞表現(xiàn)為Ⅰ型反應;而慢性HBV感染者T細胞克隆表現(xiàn)出占優(yōu)勢的Ⅱ型反應［５］。IL-10由Th2細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞和B細胞等產(chǎn)生,是Th2型細胞因子中一個重要下調(diào)因子,是一種雙抑制的反饋因子,對Th1細胞和Th2細胞增殖有雙向調(diào)節(jié)作用［６］。HyodoN等［７］研究發(fā)現(xiàn),抗原呈遞細胞(APC)產(chǎn)生的IL-10可能是決定機體產(chǎn)生有效的免疫反應抵抗HBV感染的關(guān)鍵因子。IL-10合成增加將限制IFN-γ的合成,削弱IFN-γ殺滅HBV
6、的作用,導致HBV在體內(nèi)持續(xù)存在。IL-15的組織來源非常豐富，許多組織均可以表達。IL-15是T淋巴細胞產(chǎn)生細胞因子及其受體的化學誘導劑，盡管活化T細胞表達的親和力IL-2R比NK細胞表達的親和力IL-2R高100倍，但是T細胞的活化只能在獲得性免疫過程中方可產(chǎn)生，是機體免疫發(fā)育中的晚期事件，IL-15誘導的細胞免疫功能可啟動局部的免疫反應，導致炎癥的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn),HBV感染患者血清IL-10及IL-15水平明顯增高,提示IL-10及IL-15合成增加，限制了機體對HBV的殺滅作用,可能在乙型肝炎慢性化的過程中有重要參與。在慢性肝炎患者中,ALT升高是肝炎活動的重要標志。乙肝病
7、毒感染的疾病發(fā)生主要取決于宿主的免疫應答,而病毒的異質(zhì)性與復制程度也是免疫應答的重要因素。在慢性乙肝病毒感染中,可以由免疫耐受的高感染狀態(tài)至免疫清除的低感染狀態(tài)。免疫應答早期,HBV高水平復制,肝內(nèi)存在復制型病毒;隨著感染的持續(xù),細胞毒性T細胞破壞感染的肝細胞、肝組織病變活動,病毒復制水平逐漸降低。本實驗表明,慢性乙型肝炎患者血清IL-10及IL-15水平在HBV-DNA陽性組及ALT異常組明顯升高,表明IL-10及IL-15水平升高不僅可抑制宿主抗HBV
