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《丹參酮ⅱa對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、丹參酮ⅡA對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制論文李浩,劉開祥,俸軍林,曾愛源,唐永剛【摘要】目的探討丹參酮ⅡA(TanⅡA)對(duì)缺血再灌注損傷大鼠保護(hù)作用及對(duì)額頂部皮質(zhì)中性粒細(xì)胞浸潤、自由基含量、能量代謝的影響。方法將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、TanⅡA低劑量治療組和TanⅡA高劑量治療組,線栓法建立局灶性腦缺血再灌注模型。TanⅡA高、低劑量治療組于術(shù)前連續(xù)灌胃給藥3d,1次/d。用生化法觀察缺血90min再灌注24h大鼠額頂部皮質(zhì)髓過氧化物酶(MPO)活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(
2、MDA)含量、三磷酸腺苷(ATP)含量及腦含水量變化,并進(jìn)行2.freelicfrontalandparietalcortexofcerebralischemiareperfusion(I/R)rats.MethodsInthisexperiment,ratslydividedinto4groups,namelyshamoperatedgroup,I/Rgroup,loiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)modeladebysuture-occludedmethod.Rats
3、inMCAOfolloicfrontalandparietalcortexe.Resultsparedeinloanner(allP0.05).paredayaueviatecerebralischemia-reperfusioninjurybydecreasingtheinflammationreaction,freeradicalsandthedisbanlanceofenergymetabolism.Keyia-reperfusion;Myeloperoxidase;Freeradical;ATP;T
4、anshinoneⅡA丹參SalviamiltorrhizaBge為唇形科多年生草本植物,是我國傳統(tǒng)具有活血化淤作用的中藥,已被廣泛用于心腦血管疾病的治療,但其作用機(jī)制尚不十分清楚。丹參酮(Tanshinone)是丹參的有效活性組分,其中丹參酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)為丹參酮中含量最高的活性成分。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠局灶性腦缺血再灌注模型,研究丹參酮ⅡA對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷缺血區(qū)額頂部皮質(zhì)中性粒細(xì)胞浸潤、自由基含量、能量代謝、腦組織含水量及梗塞體積變化的影響,探討其對(duì)腦再灌注損傷保護(hù)作用機(jī)制
5、。1材料與方法1.1藥品與試劑TanⅡA由提供上海第一生化藥業(yè)有限公司提供,純度85%。髓過氧化物酶(MPO),丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。TTC購自中國醫(yī)藥集團(tuán)上?;瘜W(xué)試劑公司。1.2動(dòng)物分組及給藥方法健康PO活性的測定再灌注24h,將大鼠開顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),以試劑盒提供的勻漿介質(zhì)制成腦組織勻漿。嚴(yán)格按試劑盒說明書步驟要求操作,計(jì)算出MPO活力單位。1.5MDA和SOD的測定再灌注24h,
6、將大鼠開顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),以試劑盒提供的勻漿介質(zhì)制成腦組織勻漿(步驟和方法同上)。嚴(yán)格按試劑盒說明書步驟要求操作,計(jì)算出MDA和SOD含量。1.6三磷酸腺苷(ATP)含量測定再灌注24h,將大鼠開顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),迅速加入乙腈,混勻,冰浴離心脫蛋白,離心后取上清液水系濾膜過濾后,-86℃保存。用高效液相測定ATP含量。1.7腦含水量檢測再灌注24h,各組隨機(jī)取5只大鼠,斷頭
7、取腦后,快速稱取左右大腦半球濕重,置110~115℃烤箱內(nèi)烤至恒重,再分別稱其干重,用(濕重-干重)/濕重的百分比,作為衡量腦含水量指標(biāo)。1.8TTC染色再灌注24h,將各組另外5只大鼠深麻后開顱取腦。將鼠腦置于-4℃冰箱20min后,將其切成5等份冠狀位切片,置于2%TTC溶液中,水浴、多聚甲醛液固定。用計(jì)算機(jī)病理圖像分析儀及梯形法計(jì)算出梗塞灶體積,各腦片梗死灶體積之和即為梗塞體積。左側(cè)大腦半球梗死灶區(qū)呈白色,主要為額頂部皮質(zhì)和尾殼核,正常組織呈紅色。部分組織表現(xiàn)為由白色向紅色過度區(qū)。1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)
8、處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行運(yùn)算,結(jié)果以±s表示,組間差異顯著性檢驗(yàn)采用方差分析。2結(jié)果2.1TANⅡA對(duì)MPO活性的影響結(jié)果見表1。假手術(shù)組MPO活性呈低水平。缺血再灌注組缺血側(cè)MPO活性較假手術(shù)組明顯升高(P0.05);TANⅡA高、低劑量治療組MPO活性較缺血再灌注組明顯降低(均P0.05);高、低劑量組之間差異亦具有顯著性(P0.05)。表1TANⅡA對(duì)MPO,MDA,SOD,ATP含量,腦含水量