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1、丹參酮ⅡA對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的保護(hù)作用及機(jī)制作者:李浩,劉開(kāi)祥,俸軍林,曾愛(ài)源,唐永剛【摘要】 目的探討丹參酮ⅡA(TanⅡA)對(duì)缺血再灌注損傷大鼠保護(hù)作用及對(duì)額頂部皮質(zhì)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、自由基含量、能量代謝的影響。方法將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、TanⅡA低劑量治療組和TanⅡA高劑量治療組,線栓法建立局灶性腦缺血再灌注模型。TanⅡA高、低劑量治療組于術(shù)前連續(xù)灌胃給藥3d,1次/d。用生化法觀察缺血90min再灌注24h大鼠額頂部皮質(zhì)髓過(guò)氧化物酶(MPO)活性、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、三磷酸腺苷
2、(ATP)含量及腦含水量變化,并進(jìn)行2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色檢測(cè)腦梗塞體積。結(jié)果TanⅡA治療組腦梗塞體積較缺血再灌注組減小,高、低劑量組之間差異亦具有顯著性(P<0.05);與缺血再灌注組比較,TanⅡA治療組顯著降低MPO活性、MDA含量,增加SOD、ATP含量,降低腦組織含水量,高、低劑量組之間差異亦具有顯著性(P<0.05)。結(jié)論TanⅡA對(duì)缺血再灌注腦損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能與減輕缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng),減輕氧化性損傷和改善能量代謝有關(guān)?!娟P(guān)鍵詞】缺血再灌注;髓過(guò)氧化物酶;自由基;三磷酸腺苷;
3、丹參酮Ⅱ Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofTanshinoneⅡA(TanⅡA)onneutrophilsinfiltrationandthecontentsoffreeradicalandATPinischemicfrontalandparietalcortexofcerebralischemiareperfusion(I/R)rats.MethodsInthisexperiment,ratslydividedinto4groups,namelyshamoperatedgroup,I/Rgro
4、up,loiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)modeladebysuture-occludedmethod.RatsinMCAOfolloicfrontalandparietalcortexe.Resultsparedeinloanner(allP<0.05).paredayaueviatecerebralischemia-reperfusioninjurybydecreasingtheinflammationreaction,freeradicalsandthedisbanlanceofener
5、gymetabolism. Keyia-reperfusion;Myeloperoxidase;Freeradical;ATP;TanshinoneⅡA丹參SalviamiltorrhizaBge為唇形科多年生草本植物,是我國(guó)傳統(tǒng)具有活血化淤作用的中藥,已被廣泛用于心腦血管疾病的治療,但其作用機(jī)制尚不十分清楚。丹參酮(Tanshinone)是丹參的有效活性組分,其中丹參酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)為丹參酮中含量最高的活性成分。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠局灶性腦缺血再灌注模型,研究丹參酮ⅡA對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷缺血區(qū)額頂部皮質(zhì)中
6、性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、自由基含量、能量代謝、腦組織含水量及梗塞體積變化的影響,探討其對(duì)腦再灌注損傷保護(hù)作用機(jī)制?! ?材料與方法 1.1藥品與試劑 TanⅡA由提供上海第一生化藥業(yè)有限公司提供,純度85%。髓過(guò)氧化物酶(MPO),丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。TTC購(gòu)自中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司?! ?.2動(dòng)物分組及給藥方法 健康PO活性的測(cè)定 再灌注24h,將大鼠開(kāi)顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),以試劑盒提供的勻漿介質(zhì)制成腦組織勻漿
7、。嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟要求操作,計(jì)算出MPO活力單位?! ?.5MDA和SOD的測(cè)定 再灌注24h,將大鼠開(kāi)顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),以試劑盒提供的勻漿介質(zhì)制成腦組織勻漿(步驟和方法同上)。嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟要求操作,計(jì)算出MDA和SOD含量。 1.6三磷酸腺苷(ATP)含量測(cè)定 再灌注24h,將大鼠開(kāi)顱取腦,置于4℃冰箱5min,在冰浴下取左側(cè)距離嗅球尖端7~11mm之間的額頂部皮質(zhì),迅速加入乙腈,混勻,冰浴離心脫蛋白,離心后取上清液水系濾膜過(guò)濾后,-86℃保存。
8、用高效液相測(cè)定ATP含量?! ?.7腦含水量檢測(cè) 再灌注24h,各組隨機(jī)取5只大鼠,斷頭取腦后,快速稱取左右大腦半球濕重,置110~115℃烤箱內(nèi)烤至恒重,再分別稱其干重,用(濕重-干重)/濕重的百分比,