il12重組載體的抗腫瘤作用論文

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1、IL12重組載體的抗腫瘤作用論文【關(guān)鍵詞】白細(xì)胞介素12遺傳載體抗腫瘤藥綜述細(xì)胞因子療法為臨床治療腫瘤提供了一種安全可行的方法，在目前腫瘤治療中占有一定地位，已經(jīng)展示出良好的應(yīng)用前景。在目前發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子中，白細(xì)胞介素12（IL12）是對(duì)體內(nèi)免疫活性細(xì)胞誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)作用最強(qiáng)、范圍最廣的一種細(xì)胞因子，是最有效的抗腫瘤細(xì)胞因子之一。由于直接注射IL12的副作用，介導(dǎo)IL12基因轉(zhuǎn)移進(jìn)行腫瘤基因治療是近年的研究熱點(diǎn)。近年來，其重組載體被越來越多地應(yīng)用于臨床，使它的作用更好地得到了發(fā)揮。本文就IL12的分子結(jié)構(gòu)特征、生物學(xué)功能、抗腫瘤作用及IL12重組載體應(yīng)用的研究作一綜述。1

2、IL12的分子結(jié)構(gòu)特征IL12主要是由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生的一種異二聚體細(xì)胞因子.freelIL12基因的重組腺病毒載體，從而從根本上克服了細(xì)胞內(nèi)同源重組法的種種缺陷。SEGAL等8將mIL12cDNA以重組腺病毒為載體，瘤內(nèi)直接注射，發(fā)現(xiàn)可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)以及促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移灶明顯消退，顯著延長(zhǎng)存活時(shí)間，而且激發(fā)了機(jī)體持久的免疫力。組織學(xué)觀察，腫瘤組織纖維化并伴有嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，瘤組織內(nèi)浸潤(rùn)的細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞以及一些巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。腺病毒載體的缺陷是容易誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)7。4.1.3其他的病毒載體其他的病毒載體系統(tǒng)如腺相關(guān)病毒載體(

3、AAV)以及重組鳥痘病毒載體(ALVAC)介導(dǎo)的IL12基因治療方案亦顯示出良好的療效。尤其是ALVAC載體，由于其感染宿主范圍廣，高效表達(dá)外源基因，不在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，更不會(huì)整合于宿主細(xì)胞，因而可以安全地用于人體。另外，由于ALVAC/IL12不能整合于宿主基因組中，一次注射，IL12在局部的表達(dá)僅能維持有限的時(shí)間，因而需要反復(fù)瘤內(nèi)注射8。RAKHMILEVICH等將載有IL12DNA的質(zhì)粒用基因槍轟擊腫瘤生長(zhǎng)部位，引起腫瘤消退。在致瘤后每3或4d注射一次，劑量為每次50μg，注射5～6次后測(cè)各種指標(biāo)。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是：所攜帶的IL12基因能較長(zhǎng)時(shí)間的表達(dá)(15

4、～30d);與其他方法相比基本沒有副作用;所引起的NK細(xì)胞活性較其他方法高3～4倍。不足的是IL12表達(dá)的量較其他方法低一些，但這種方法安全有效，簡(jiǎn)便，而且適用范圍廣泛，有望得到進(jìn)一步完善。直接瘤內(nèi)注射質(zhì)粒DNA，一方面可避免載體本身病毒蛋白誘發(fā)局部免疫反應(yīng)對(duì)病毒載體的清除；而瘤內(nèi)注射表達(dá)細(xì)胞因子的質(zhì)粒DNA，既可提高病灶局部細(xì)胞因子相對(duì)濃度，又可降低細(xì)胞因子引起的全身副作用，從而產(chǎn)生更好的抗腫瘤效應(yīng)。質(zhì)粒載體一般為5.0～7.0kb。4.2將編碼IL12的DNA克隆入放射處理后的腫瘤細(xì)胞或其他細(xì)胞收獲自體或異體的腫瘤細(xì)胞或成纖維細(xì)胞，體外轉(zhuǎn)染攜帶IL12基因的載體，再重

5、新移植給病人。以自體纖維母細(xì)胞為靶細(xì)胞轉(zhuǎn)染IL12基因，擴(kuò)增后直接注入體內(nèi)；或者與自體腫瘤細(xì)胞混合，經(jīng)外照射后作為腫瘤瘤苗輸回人體。在隨后進(jìn)行的臨床Ⅰ期試驗(yàn)中，將轉(zhuǎn)染IL12基因的自體纖維母細(xì)胞注射于6例黑色素瘤和乳癌病人腫瘤4周，每周1次，結(jié)果顯示，細(xì)胞每天產(chǎn)生300～400mg/L的IL12，誘導(dǎo)CD4+、CD8+細(xì)胞浸潤(rùn)和CD30的高表達(dá)以及大量指狀細(xì)胞的出現(xiàn)5。4.3利用攜帶IL12基因的病毒或非病毒載體感染或轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞利用相關(guān)重組蛋白和不同的病毒及非病毒轉(zhuǎn)染基因后所表達(dá)的IL12都能表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)目鼓[瘤活性。在加強(qiáng)腫瘤免疫方面，由于IL12能夠誘導(dǎo)NK細(xì)胞

6、和T細(xì)胞的增殖和活化，因而在免疫應(yīng)答中起著橋梁的作用。轉(zhuǎn)染攜帶相關(guān)基因腺病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒后的腫瘤細(xì)胞、DC、腫瘤成纖維細(xì)胞都可局部分泌IL12，發(fā)揮較好的抗瘤效果15。腺病毒介導(dǎo)的協(xié)同表達(dá)IL12和協(xié)同刺激分子B71可消退高免疫性的轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移腫瘤。與單獨(dú)病毒介導(dǎo)的IL12相比，瘤內(nèi)注射腺病毒介導(dǎo)的IL12/B71可延長(zhǎng)腫瘤免疫應(yīng)答，可完全消退動(dòng)物模型中80%的腫瘤16。IL12重組載體的轉(zhuǎn)基因治療今后發(fā)展方向主要有:增加基因轉(zhuǎn)染的效率；腫瘤特異主動(dòng)基因的研究；長(zhǎng)期表達(dá)及可調(diào)控的載體；與其他免疫和非免疫抗癌治療聯(lián)合應(yīng)用。關(guān)于IL12重組載體的抗腫瘤基因治療，已進(jìn)

7、展到Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。目前總的治療趨勢(shì)為單一治療向聯(lián)合治療方案過渡，單一基因治療向聯(lián)合多種不同的基因治療方案過渡。相信隨著分子生物學(xué)及基因工程技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，IL12重組載體抗腫瘤基因治療的應(yīng)用會(huì)取得更令人滿意的結(jié)果。【