柴胡加龍骨牡蠣湯有效部位抗抑郁作用研究

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1、柴胡加龍骨牡蠣湯有效部位抗抑郁作用研究作者：康大力瞿融朱維莉馬世平【摘要】　　目的考察柴胡加龍骨牡蠣湯有效部位(CLMAF)抗抑郁作用。方法采用小鼠強(qiáng)迫游泳、懸尾、利血平拮抗、5羥色胺酸（5HTP）誘導(dǎo)甩頭、慢性應(yīng)激等抑郁動(dòng)物模型，觀察CLMAF的抗抑郁作用。結(jié)果CLMAF20，40，80mg/kg均能不同程度地縮短小鼠強(qiáng)迫游泳、懸尾不動(dòng)時(shí)間，能拮抗高劑量利血平降低小鼠體溫作用，增加5HTP誘導(dǎo)小鼠甩頭次數(shù)，改善慢性應(yīng)激小鼠被動(dòng)回避能力。結(jié)論CLMAF具有顯著的抗抑郁作用?！娟P(guān)鍵詞】柴胡加龍骨牡蠣湯；有效部位；抗抑郁　　Abstract：ObjectiveTostud

2、ytheantidepressant-likeeffectofChaihuJiaLongguMuliDecoction'sactivefraction(CLMAF).MethodsForcedsmingtest,tailsuspendingtest,reserpinereversal,5HydroxyDLtryptophan(5HTP)inducedhead-todelandchronicstresstestinmiceinistrationofCLMAF,theimmobilitytimeofforcedsmingtestandtailsuspendingtest

3、inmiceperaturedropinducedbyreserpineice.ConclusionCLMAFpossessesasignificantantidepressant-likeeffect.　　Key，直徑14cm），上海醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；小鼠開闊箱(直徑30cm，高20cm，底部19等分)；電子肛溫計(jì)，深圳市勝利電子科技有限公司產(chǎn)品；DCS2程控穿梭箱，醫(yī)科院藥物所研制。　　2方法　　2.1CLMAF的制備柴胡加龍骨牡蠣湯按原方比例制成水煎液。水煎液依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇部位上D101大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗去糖類及其他水溶性雜質(zhì)，然后用

4、30%乙醇繼續(xù)洗脫,收集洗脫液，減壓回收溶劑至干，即得（提取率0.76%）。　　2.2對(duì)癥狀模擬抑郁模型的影響［1］動(dòng)物隨機(jī)分為5組，分別為模型組，氟西汀組，CLMAF低、中、高劑量組。模型組給予等量蒸餾水，用藥組給予相應(yīng)種類及劑量的藥物。每日上午8時(shí)ig給藥，連續(xù)給藥7d?！　?.2.1小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)將小鼠置于水深10cm，水溫25℃的玻璃圓筒中，觀察6min，比較各組小鼠在后4min內(nèi)的累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。不動(dòng)時(shí)間判定：小鼠漂浮在水面，不努力爬出圓筒，僅做一些必須保持其頭部在水面的動(dòng)作?！　?.2.2小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)將小鼠尾端2cm的部位貼在一根水平木棍上，使動(dòng)物成倒掛狀態(tài)，其

5、頭部離臺(tái)面約15cm，用板隔開相鄰動(dòng)物的視線。判斷標(biāo)準(zhǔn)：小鼠被動(dòng)懸掛期間，無任何活動(dòng)時(shí)，定為不動(dòng)狀態(tài)。觀察6min，比較各組小鼠在后4min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間?！　?.2.3小鼠開野實(shí)驗(yàn)小鼠末次ig給藥90min后，將動(dòng)物置于小鼠開闊箱。比較各組小鼠2min內(nèi)水平得分（行走路線與格子交叉點(diǎn)數(shù)）、垂直得分（小鼠兩前爪騰空或攀附墻壁次數(shù)）、清潔次數(shù)（動(dòng)物在清潔身體各部位過程中，使用頭、舌和前肢做出的多種動(dòng)作）?！　?.3對(duì)藥物誘發(fā)抑郁模型的影響［2］實(shí)驗(yàn)分正常組，模型組，氟西汀組,CLMAF低、中、高劑量組,模型組給予等量蒸餾水，用藥組給予相應(yīng)種類及劑量的藥物。每日上午8時(shí)ig給藥

6、，連續(xù)給藥7d?！　?.3.15-HTP誘導(dǎo)的甩頭實(shí)驗(yàn)小鼠末次給藥90min后ip5-HTP200mg/kg，10min后開始觀察，記錄10min內(nèi)小鼠甩頭次數(shù)，比較各組小鼠甩頭次數(shù)的差異。　　2.3.2利血平拮抗實(shí)驗(yàn)小鼠末次給藥同時(shí)ip利血平5mg/kg，2h后將體溫計(jì)探頭插入動(dòng)物肛門內(nèi)1.5～2.0cm處測(cè)量肛溫，比較各組小鼠肛溫變化的差異?！　?.4對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型的影響［3］小鼠隨機(jī)分組，分組同“2.2”項(xiàng)。除正常組外其余各組在14d內(nèi)共接受各種不同的刺激，包括冷水游泳（4℃，5min）、禁水（24h）、夾尾（1min）、電擊足底（電壓50mV，1次/30s，每次

7、持續(xù)10s，共15次）、禁食（24h）、搖晃（1次/s，5min）和熱應(yīng)激（45℃，5min）等刺激，平均每種刺激各2次。另設(shè)正常對(duì)照組，正常組給予等量蒸餾水。各組每日上午8時(shí)ig給藥，連續(xù)14d。第14天將動(dòng)物放入穿梭箱的一端，使之先適應(yīng)測(cè)試環(huán)境3min。然后進(jìn)行30次回避實(shí)驗(yàn)：每次實(shí)驗(yàn)前4s均給予噪聲信號(hào)，若此間無回避反應(yīng)發(fā)生，小鼠將受到0.8mA足部電擊；若此間有逃避反應(yīng)發(fā)生，則電擊將終止。記錄動(dòng)物在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中遭受電擊的次數(shù)和被電擊的累計(jì)時(shí)間?！　?.5統(tǒng)計(jì)方法用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果