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《報(bào)告基因轉(zhuǎn)染》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃報(bào)告基因轉(zhuǎn)染 轉(zhuǎn)染常用的報(bào)告基因 報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,在調(diào)控序列控制下進(jìn)行表達(dá),從而利用它的表達(dá)產(chǎn)物來(lái)標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控,篩選得到轉(zhuǎn)化體。 作為報(bào)告基因,在遺傳選擇和篩選檢測(cè)方面必須具有以下幾個(gè)條件:(1)已被克隆和全序列已測(cè)定;(2)表達(dá)產(chǎn)物
2、在受體細(xì)胞中不存在,即無(wú)背景,在被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中無(wú)相似的內(nèi)源性表達(dá)產(chǎn)物;(3)其表達(dá)產(chǎn)物能進(jìn)行定量測(cè)定?! ≡谥参锘蚬こ萄芯款I(lǐng)域,已使用的報(bào)告基因主要有以下幾種: 胭脂堿合成酶基因(nos)、章魚(yú)堿合成酶基因(ocs) nos、ocs這兩個(gè)基因是致瘤土壤農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumfaciens)的Ti質(zhì)粒特有的,對(duì)Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造,用相應(yīng)的致瘤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物體時(shí),如果外源基因轉(zhuǎn)入植物體中,則這兩種報(bào)告基因在植物根莖葉中均能表達(dá),不受發(fā)育調(diào)控,檢測(cè)時(shí)直接用轉(zhuǎn)化體提取液進(jìn)行紙電泳,染色后在紫外光下觀察熒光即可。目的
3、-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因(cat) nptⅡ、cat及慶大霉素轉(zhuǎn)移酶基因,均為抗生素篩選基因,相關(guān)的酶可以對(duì)底物進(jìn)行修飾(磷酸化、乙?;?,從而使這些抗生素失去對(duì)植物生長(zhǎng)的抑制作用,使得含有這些抗性基因的轉(zhuǎn)化體能在含這些抗生素的篩選培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng),也可以用轉(zhuǎn)化
4、體提取液體,外用同位素標(biāo)記,放射自顯影篩選轉(zhuǎn)化體。氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因測(cè)時(shí)可通過(guò)放射自顯影觀察 熒光素酶基因 1985年從北美熒火蟲(chóng)和叩頭蟲(chóng)cDNA文庫(kù)中克隆出來(lái)的,該酶在有ATP、Mg2+、O2和熒光素存在下發(fā)出熒光,這樣就可用轉(zhuǎn)基因植物整株或部分直接用X-光片或?qū)iT儀器進(jìn)行檢測(cè)。具有檢測(cè)速度快、靈敏度比cat基因高30~1000倍、費(fèi)用低、不需使用放射性同位素等優(yōu)點(diǎn),得到了廣泛的采用。 β-D-葡萄糖苷酶基因 該酶催化底物形成β-D-葡萄糖苷酸,它在植物體中幾乎無(wú)背景,組織化學(xué)檢測(cè)很穩(wěn)定,可用分光光譜、熒光等進(jìn)行檢測(cè)
5、?! 〕酥膺€有慶大霉素轉(zhuǎn)移酶基因等目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 在動(dòng)物基因表達(dá)調(diào)控的研究中,已使用的報(bào)告基因主要有以下幾種: 綠色熒光蛋白基因等?! 【G色熒光蛋白來(lái)源于海洋生物水母,其基因可在異源組織中表達(dá)并產(chǎn)生熒光,GFPCdnad開(kāi)放閱讀框架長(zhǎng)度約740bp,編碼238個(gè)氨基酸殘基,其肽鏈內(nèi)部第65-67位絲氨
6、酸-脫氫酪氨酸-甘氨酸通過(guò)自身環(huán)化和氧化形成一個(gè)發(fā)色基因,在長(zhǎng)紫外波長(zhǎng)或藍(lán) 光照射下發(fā)出綠色熒光。轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞可在熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀(FACS)中直接觀察基因的表達(dá)。 此外還有β-半乳糖苷酶基因、二氫葉酸還原酶基因、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶基因(cat)等 報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因,是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,在調(diào)控序列控制下進(jìn)行表達(dá),從而利用它的表達(dá)產(chǎn)物來(lái)標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控,篩選得到轉(zhuǎn)化體
7、。 作為報(bào)告基因,在遺傳選擇和篩選檢測(cè)方面必須具有以下幾個(gè)條件:(1)已被克隆和全序列已測(cè)定;(2)表達(dá)產(chǎn)物在受體細(xì)胞中不存在,即無(wú)背景,在被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中無(wú)相似的內(nèi)源性表達(dá)產(chǎn)物;(3)其表達(dá)產(chǎn)物能進(jìn)行定量測(cè)定。目的-通過(guò)該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場(chǎng)安保新項(xiàng)目的正常、順利開(kāi)展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 在植物基因工程研究領(lǐng)域,已使用的報(bào)告基因主要有以下幾種: 胭脂堿合成酶基因(n
8、os)、章魚(yú)堿合成酶基因(ocs) nos、ocs這兩個(gè)基因是致瘤土壤農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumfaciens)的Ti質(zhì)粒特有的,對(duì)Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造,用相應(yīng)的致瘤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物體時(shí),如果外源基因轉(zhuǎn)入植物體中,則這兩種報(bào)告基因在植物根莖葉中均能表達(dá)