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《耐熱糖化酶糖化條件及酶學(xué)性質(zhì)的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要摘要通過篩選實驗室保存的黑曲霉(Aspergillusnige，3．4309)突變株，得到兩株產(chǎn)耐熱糖化酶的菌株9．1．D及18．3．H，其所產(chǎn)糖化酶G9．1-D及G18_3-H的最適作用溫度均為60℃，比出發(fā)株糖化酶的最適溫度提高10℃，表明兩株突變株能分泌耐熱糖化酶；在各自的最適溫度下，出發(fā)株糖化酶的比活力為131．23U／mg，耐熱糖化酶G9．1．D的比活力為171．10U／mg，耐熱糖化酶Gls-3．H的酶活為142。83U／rag，分別比出發(fā)株糖化酶高30％君n9％。耐熱糖化酶G9-l-D及Gls-3-H60℃條件下糖化液DE值達(dá)到70％時，所需
2、反應(yīng)時間為10h，與出發(fā)株糖化酶相比，縮短反應(yīng)時間10h；70℃條件下糖化液DE值達(dá)到70％時，所需反應(yīng)時間為5h，與出發(fā)株相比，縮短反應(yīng)時間15h。耐熱糖化酶G9．1-D及G悔，．H的最適糖化溫度為70℃。耐熱糖化酶G9．I-D的最適復(fù)合添加劑為：50mmo·L。Na+、0．05mol·L‘1甘油、3g·L。1黃原膠、2g·LJ海藻酸鈉，在最適復(fù)合添加劑存在時，糖化過程中DE值升高的速度加快，70℃條件下糖化液的DE值達(dá)到85．50％，比對照提高7．86。耐熱糖化酶G18_3．H的最適復(fù)合添加劑為：50mmol·L～Na+、0．05mol·L。1甘油、2g．
3、L以黃原膠、3g·L-l海藻酸鈉，在最適復(fù)合添加劑存在時，70℃條件下糖化液的DE值達(dá)到81．40％，比對照提高5．77。出發(fā)株糖化酶的最適復(fù)合添加劑為：50mmol·LJNa+、0．03mol·L。甘油、3g·L‘1黃原膠、3g·L。1海藻酸鈉。在最適復(fù)合添加劑存在時，70℃條件下糖化液的DE值達(dá)到76．38％，比對照提高7．81。結(jié)果表明，復(fù)合添加劑的存在能夠在糖化過程中保護(hù)酶的三維構(gòu)象。耐熱糖化酶G9．1-D及G18-3．H分別含有三個同工酶組分1’、2’、3’，均為糖蛋白，組分G9-I-D-3’和G18．3．H．3’具有耐熱性，其最適糖化溫度為70℃，
4、最適糖化pH為pH4．5，分子量均約為50．0kD。關(guān)鍵詞耐熱糖化酶DE值糖化時間AbstractTwomutantsof9一l—Dand18-3一HfromAspergillusniger3．4309，whichproducedthermostableglucoamylasewereobtainedthroughdeterminationoftheirenzymeactivity．Andtheiroptimalreactiontemperatureswere60℃，whichwas10℃higherthanthatoftheoriginalstrain．At
5、theiroptimalreactiontemperature，theenzymeactivityoforiginalglucoamylasewasI31．23U／mg，thermostableglucoamylaseG9-1．Dwas171．10U／mg，whichwas30％higherthantheformerandthermostableglucoamylaseGIS．3．Hwas142．83U／rng，whichwas9％higherthantheformer．Ittook10hforthesaccharificationDEvalueoftherm
6、ostableglucoamylasesG9．1-DandG18-3-Htoreach70％at60℃，whichWas10hlessthanthatoftheoriginalglucoamylase．TlleoptimalsaccharificationtemperatureofGg-I-DandG18．3．Hwas70℃，andatthistemperature，ittook5hforthesaccharificationDEvalueofthermostableglucoamylasesG9．I-DandGjs-3．Htoreach70％，whichWa
7、s15hlessthanthatoftheoriginalglucoamylase．TheoptimalcompositeadditivesofthermostableglucoamylaseG9．．1．．Dwere50mmol／LNa十、0．05mol／Lglycerin、3g／Lxanthangum、2g／Lsodiumalginate．DEvaluecouldincreaserapidlyduringthesaccharificationwhenthecompositeadditiveswereaddedinto，thefinalDEvaluewere8
8、5．50％，7．86highertha
