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《產糖化酶根霉屬分離及酶學性質研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、產糖化酶根霉的分離以及酶學性質的初步研究**孔維銳，郭福宗，周勝，寸躍芳，唐湘華*（云南師范大學生命科學學院，云南昆明650500）【摘要】：從五糧液酒廠周邊采集而來的土樣中分離出六株產糖化酶且酶活較高的菌株，選取酶活最高的一株K-1為出發(fā)菌，進行發(fā)酵實驗，并測得糖化酶在50-55℃酶活較高，最適作用溫度為55℃。且糖化酶在pH值5.5-6之間酶活力較高。酶對玉米粉、小麥粉、木薯粉、苦蕎粉、黃豆粉有較強的液化能力，其中對玉米粉的糖化能力最強。在酶的動力學實驗中測得Km=1.446mg/ml，Vm=0.
2、269mg/ml.min。關鍵詞：根霉;糖化酶;酶學性質StudyinseparationofRhizopusandglucoamylasecharactersKongWeirui,GuoFuzong,ZhouSheng,CunYuefang,TangXianghua*(YunnanNormalUniversity,Schooloflifescience,Kunming650500,China)Abstract:6strainsthatwereisolatedfromsoilaroungWuliang
3、yebrewerycouldproduceglucoamylaseandhavehigherenzymeactivity.Theonewhichhasthehighestacitvitywasselectedtobethestartingbacteriatoferment.Theenzymeacitvityofglucoamylaseishigherbetween50to55℃andtheoptimaltemperatureis55℃.Theenzymeactivityofglucoamylaseis
4、higherbetweenpH5.5-6.theenzymecanliquefycornflour,wheatflour,tapiocastarch,buckwheatpowder,soybeanmealstrongly.Andtheenzymecansaccharizecornflourbetter.Thekineticsexperimentoftheenzymeshowedussomedata:Km=1.446mg/ml,Vm=0.269mg/ml*min.Keywords:Rhizopus;Gl
5、ucoamylase;glucoamylasecharacters根霉細胞中不僅含有豐富的糖化酶，還含有一定的酒化酶系，可以邊糖化邊酒化同時含有能產生曲酒香味前體物質的酶系[1]。而且根霉比曲霉更具有糖化力高，適應性強、繁殖速度快等特點。生長速度快、對溫度、濕度、營養(yǎng)的適應范圍很廣。糖化酶是淀粉糖化酶（GlucoamylaseEC.3.2.1.3）的簡稱，又稱為γ-淀粉酶（γ-amylase），糖化酶能從淀粉非還原性末端依次切下一個葡萄糖單位，將淀粉水解為葡萄糖。因此，它被廣泛地應用于酒精、白酒釀造、
6、抗生素、氨基酸、**基金項目：2011年“云南省大學生創(chuàng)新性實驗計劃項目-宜賓五糧液酒廠周邊根霉產糖化酶能力篩選及其固體發(fā)酵條件優(yōu)化”，項目編號：KXX2011-12-284。作者簡介：孔維銳，（1987-），男，云南曲靖人，在讀本科，生物技術專業(yè)。*通訊作者：唐湘華，講師，生物工程專業(yè)，云南師范大學呈貢校區(qū)生科院2005#，郵編：650500，E-mail:txhact@gmail.com.7有機酸、甘油、紡織、日化等工生物業(yè)中[2]，是我國最大的工業(yè)酶制劑產品[3]，多年來對糖化酶的研究主要集中于
7、提高菌株的產酶能力[3-5]改善發(fā)酵條件[6]。本實驗的目的就是篩選復合酶系協(xié)同作用強的菌種，供葡萄糖生產或釀酒工業(yè)應用。1材料與方法1.1材料1.1.1土樣來自：宜賓五糧液酒廠周邊土壤1.1.2主要的藥品與試劑：無菌水、3,5-二硝基水楊酸(DNS)[7]、2%可溶性淀粉溶液，pH=4.6乙酸-乙酸鈉溶液[8]。生長因子：FeSO4(0.01％)、KCl(0.05％)、MgSO4(0.05％)、(NH4)2SO4、NH4C1、KNO3、NaNO3、NH4NO3。1.1.3部分儀器及設備：高速冷凍離心
8、機（飛鴿牌），UV-2000紫外可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司），立式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），超凈工作臺等。1.1.4培養(yǎng)基：分離培養(yǎng)基：可溶性淀粉0.5g，蛋白胨0.5g，酵母膏0.5g，KH2PO40.05g，MgSO4?7H2O0.01g，CaCl2?2H2O0.05g，瓊脂2.5g，pH為5.0。0.1Mpa，121℃條件下滅菌30min，冷卻至約50℃，倒5～6塊平板/100mL，冷卻備用。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基：可溶性淀粉2
