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《產(chǎn)糖化酶根霉屬分離及酶學性質研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、產(chǎn)糖化酶根霉的分離以及酶學性質的初步研究**孔維銳，郭福宗，周勝，寸躍芳，唐湘華*（云南師范大學生命科學學院，云南昆明650500）【摘要】：從五糧液酒廠周邊采集而來的土樣中分離出六株產(chǎn)糖化酶且酶活較高的菌株，選取酶活最高的一株K-1為出發(fā)菌，進行發(fā)酵實驗，并測得糖化酶在50-55℃酶活較高，最適作用溫度為55℃。且糖化酶在pH值5.5-6之間酶活力較高。酶對玉米粉、小麥粉、木薯粉、苦蕎粉、黃豆粉有較強的液化能力，其中對玉米粉的糖化能力最強。在酶的動力學實驗中測得Km=1.446mg/ml，Vm=0.
2、269mg/ml.min。關鍵詞：根霉;糖化酶;酶學性質StudyinseparationofRhizopusandglucoamylasecharactersKongWeirui,GuoFuzong,ZhouSheng,CunYuefang,TangXianghua*(YunnanNormalUniversity,Schooloflifescience,Kunming650500,China)Abstract:6strainsthatwereisolatedfromsoilaroungWuliang
3、yebrewerycouldproduceglucoamylaseandhavehigherenzymeactivity.Theonewhichhasthehighestacitvitywasselectedtobethestartingbacteriatoferment.Theenzymeacitvityofglucoamylaseishigherbetween50to55℃andtheoptimaltemperatureis55℃.Theenzymeactivityofglucoamylaseis
4、higherbetweenpH5.5-6.theenzymecanliquefycornflour,wheatflour,tapiocastarch,buckwheatpowder,soybeanmealstrongly.Andtheenzymecansaccharizecornflourbetter.Thekineticsexperimentoftheenzymeshowedussomedata:Km=1.446mg/ml,Vm=0.269mg/ml*min.Keywords:Rhizopus;Gl
5、ucoamylase;glucoamylasecharacters根霉細胞中不僅含有豐富的糖化酶，還含有一定的酒化酶系，可以邊糖化邊酒化同時含有能產(chǎn)生曲酒香味前體物質的酶系[1]。而且根霉比曲霉更具有糖化力高，適應性強、繁殖速度快等特點。生長速度快、對溫度、濕度、營養(yǎng)的適應范圍很廣。糖化酶是淀粉糖化酶（GlucoamylaseEC.3.2.1.3）的簡稱，又稱為γ-淀粉酶（γ-amylase），糖化酶能從淀粉非還原性末端依次切下一個葡萄糖單位，將淀粉水解為葡萄糖。因此，它被廣泛地應用于酒精、白酒釀造、
6、抗生素、氨基酸、**基金項目：2011年“云南省大學生創(chuàng)新性實驗計劃項目-宜賓五糧液酒廠周邊根霉產(chǎn)糖化酶能力篩選及其固體發(fā)酵條件優(yōu)化”，項目編號：KXX2011-12-284。作者簡介：孔維銳，（1987-），男，云南曲靖人，在讀本科，生物技術專業(yè)。*通訊作者：唐湘華，講師，生物工程專業(yè)，云南師范大學呈貢校區(qū)生科院2005#，郵編：650500，E-mail:txhact@gmail.com.7有機酸、甘油、紡織、日化等工生物業(yè)中[2]，是我國最大的工業(yè)酶制劑產(chǎn)品[3]，多年來對糖化酶的研究主要集中于
7、提高菌株的產(chǎn)酶能力[3-5]改善發(fā)酵條件[6]。本實驗的目的就是篩選復合酶系協(xié)同作用強的菌種，供葡萄糖生產(chǎn)或釀酒工業(yè)應用。1材料與方法1.1材料1.1.1土樣來自：宜賓五糧液酒廠周邊土壤1.1.2主要的藥品與試劑：無菌水、3,5-二硝基水楊酸(DNS)[7]、2%可溶性淀粉溶液，pH=4.6乙酸-乙酸鈉溶液[8]。生長因子：FeSO4(0.01％)、KCl(0.05％)、MgSO4(0.05％)、(NH4)2SO4、NH4C1、KNO3、NaNO3、NH4NO3。1.1.3部分儀器及設備：高速冷凍離心
8、機（飛鴿牌），UV-2000紫外可見分光光度計（上海菁華科技儀器有限公司），立式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），超凈工作臺等。1.1.4培養(yǎng)基：分離培養(yǎng)基：可溶性淀粉0.5g，蛋白胨0.5g，酵母膏0.5g，KH2PO40.05g，MgSO4?7H2O0.01g，CaCl2?2H2O0.05g，瓊脂2.5g，pH為5.0。0.1Mpa，121℃條件下滅菌30min，冷卻至約50℃，倒5～6塊平板/100mL，冷卻備用。
液體發(fā)酵培養(yǎng)基：可溶性淀粉2
