糙皮側(cè)耳水溶性多糖的分離純化及結(jié)構(gòu)的研究

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1、摘要糙皮側(cè)耳P拓“陽(yáng)n姆D5艦口f酣(Jacq.ex.Fr)QueI(簡(jiǎn)稱PO)系擔(dān)子菌綱口蘑科真菌,近年來(lái)學(xué)者們側(cè)重于對(duì)其化學(xué)成分、藥理作用、優(yōu)化培育等方面的研究。弄清其結(jié)構(gòu),對(duì)于深入了解糙皮側(cè)耳的藥理活性,更好地利用糙皮側(cè)耳這~廣泛又具有多種功能的真菌資源是至關(guān)重要的。本文提純了PO水溶性多糖并研究了其結(jié)構(gòu),為糙皮側(cè)耳的藥理作用和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。PO經(jīng)熱水煮提、醇析,分離出水溶性粗多糖。Gc分析表明粗多糖的單糖組成為葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、巖藻糖(Fuc),摩爾比依次為:3.88:2.28:3.28:1.

2、oo,說(shuō)明PO粗多糖為一種中性雜多糖。PO粗多糖經(jīng)凍融離心、鏈蛋白酶酶解、sevag法脫蛋白、乙醇分級(jí)、凝膠柱層析方法純化得水溶性多糖POP。,凝膠柱層析、比旋光度測(cè)定、高效液相色譜(HPLc)分析證明POR組分平均分子量為2.4萬(wàn),酚一硫酸法測(cè)定總糖含量為95%,氣相色譜(GC)分析其單糖組成為:Glc、MaIl、Gal、Fuc,摩爾比為:17.50:4.42:39.88:1.oo。HPLc、比旋光度測(cè)定等方法,檢驗(yàn)其均一陛。結(jié)果表明POP。分子量及極性均為均一組分。POP3經(jīng)部分酸水解、高碘酸氧化、smith降解、甲基化、Gc—Ms分析、I

3、R分析、c”.NMR等方法,確定其分子結(jié)構(gòu)為:末端由Glc及Fuc構(gòu)成,主鏈由l一6Gal組成,以1—2,6Gal為分支點(diǎn),1—3,6Man為二級(jí)分支點(diǎn),平均每2個(gè)1—6Glc就有1個(gè)1—2,6Gal分支點(diǎn)。關(guān)鍵詞:糙皮側(cè)耳;多糖;分離純化;結(jié)構(gòu)研究Abstract,k甜陽(yáng)f姍os加口f姍(PO)belongstoTricholomataceaeaIldBasidiomycetae.Theseyears,scholarslaypanicularemphasisontheresearchofitscheInicalcompos“ion,ph鋤ac

4、ologicalfhnction,highqualitycultureandsoon.ItisextremelyimportallttonndoutthepharmacologicalactivityandstmctureofP彪“mf“sos打它“托sfor“sbetcerutilization.Inmisp印er,thestmcturefbatureofwaters01ublepolysaccharideisolatedf如mthemlitingbodyoff),已“mf淞D占打P口f淞isreported.Theresultsmaypro

5、Videanacademicbasisfortheph刪ac0109icalfhnctiona11dclillic印plicationofP昆z打臼f螂Ds拋口f螄.111ecmdepolysaccharidewasabtainedbyboilinga11dexactingthe丘uitillgbodyof兒舢f淞。鼬℃Ⅱf“s.Thentllewaters01ublecmdepolysaccharidePOPwaSfractionatedbyemall01.Thegaschromatography(Gc)indicatedthatPOPwaS

6、akindofneu廿al}le把∞poIysaccharide姐dcomposedofglucose,mannose,galactoseandfucose.Themolarratiois3.88:2.28:3.28:l_00.Thecrudepolysaccharidewasfkezed—meltedrepeatedlyandd印rotinizedbyprotenaseaIldSevagemethod..Fllnhernlore,theclassifyingprecipitation血eⅡ1anolandSepharoseCL一6Bgelch

7、romatographywasusedtoobtainthe脅ctionofPOP3.BymeallsofHPLCaIldspecmcopticalrot砒ionmeasurement,itwasprovedtobehomogeneousonmolecularwe遠(yuǎn)ht.Itsmolecularwei曲wasabout24,OOO.ThetotlecontentofPOP3is95%.Thegaschromatography(GC)indicatedthatPOP3wascomposedofglucose,mannose,g“actoseand

8、fucose.nlem01arratiois17.50:4.42:39.88:1.00.BymeallsofHPLC,cellulousacetate

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