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《多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、鼉目錄lItll11111IIUl＼1800064中文摘要??????????????????????????．．1英文摘要??????????????????????????．．4研究論文多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因研究前言?????????????????????????．．7日lJ舌?????????????????????????．．’7材料與方法??????????????????????．．7結(jié)果??????????????????????????．9附圖??????????????????????????“附表????
2、??????????????????????14討論????????????????????．．?????．16參考文獻(xiàn)????????????????????????24綜述鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)臨床抗菌藥物耐藥機(jī)制??????????．29致謝?????????????????????????????39個(gè)人簡歷??????????????????????????40中文摘要多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因研究摘要目的：應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法檢測我院呼吸重癥監(jiān)護(hù)室分離到的多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌p．內(nèi)酰胺酶基因和整合子耐消
3、毒劑基因qacEAl-sull存在狀況。采用多基因聚類分析方法進(jìn)行多重耐藥菌株親緣性分析。方法：l標(biāo)本來源收集我院呼吸重癥監(jiān)護(hù)室(RICU)自2008年6月至2009年12月間因慢性阻塞性肺疾病急性加重期，急性呼吸窘迫綜合癥，老年重癥肺炎，顱腦疾病繼發(fā)感染行有創(chuàng)機(jī)械通氣患者下呼吸道分離的銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌。2藥敏試驗(yàn)采用K．B法鑒定分離的銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)頭孢哌酮／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、頭孢他啶、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、環(huán)丙沙星、米諾環(huán)素、多粘菌素B9種抗菌藥物的敏感性。并根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)
4、2004年版要求進(jìn)行抗菌藥物敏感性判斷。本研究中多重耐藥菌株的選取標(biāo)準(zhǔn)為對(duì)上述抗生素中3類或3類以上藥物耐藥。本研究中共收集到33株多重耐藥銅綠假單胞菌和16株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌。3PCR擴(kuò)增模板制備采用蛋白酶K消化法制備模板液，并將制備好的模板置于．20℃冰箱保存。4基因檢測應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)法，共檢測多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌9種耐藥基因，包括p．內(nèi)酰胺酶基因(blaTEM，blaSHV，blaPER，blaDHA，blaIMP，blaVIM，blaOXA．23，blaOXA．24)和整合子耐消毒劑基因(qacEA1．sull)。將聚
5、合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)2％瓊脂糖凝膠電泳，出現(xiàn)與陽性對(duì)照分子相當(dāng)?shù)哪康臈l帶判為陽性，用凝膠成像系統(tǒng)觀察電泳結(jié)果并攝像保存。5核酸序列測定將整合子耐消毒劑基I丟lqacEA1-sullPCRIjN性擴(kuò)增產(chǎn)物回收后送測序。測得序列與GenBank核酸庫已登錄的序列作比對(duì)。6菌株親緣性分析．采用多基因聚類分析法，以多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥基因?yàn)榉肿訕?biāo)志做檢測結(jié)果的樣本聚類分析。中文摘要結(jié)果：l抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果33株多重耐藥銅綠假單胞菌對(duì)多粘菌素B100％敏感，其對(duì)阿米卡星和美羅培南耐藥率均為45．45％，對(duì)其余幾種抗生素的耐藥率較高，均
6、在50％以上。16株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)多粘菌素B100％敏感，其對(duì)頭孢哌酮／舒巴坦和米諾環(huán)素的耐藥率較低，分別為25．00％和31．25％。對(duì)其余幾種抗生素的耐藥率均達(dá)到50％以上。2耐藥基因檢測結(jié)果33株多重耐藥銅綠假單胞菌p．內(nèi)酰胺酶基因檢測果：blaTEM陽性8株(24．24％)，blaVIM陽性6株(18．19％)，blaIMP陽性3株(9．09％)，blaSHV陽性2株(6．06％)，blaDHA陽性5株(15．15％)，blaOXA一23，blaOXA．24，blaPER均未檢出，整合子耐消毒劑基因檢測qacEA1-sull陽性2
7、8株(84．85％)。16株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌B．內(nèi)酰胺酶基因檢測果：blaOXA．23陽性5株(31．25％)，blaTEM陽性2株(12．5％)，blaDHA2株(12．5％)，blaOXA．24l株(6．25％)，blaPER1株(6．25％)，blaSHV，blalMP，blaVIM均未檢出。整合子耐消毒劑基因檢測qacEAl．sull陽性16株(100％)。3核酸序列測定整合子耐消毒劑基因qacEAl-sull測得序列經(jīng)比對(duì)與美國核酸庫己登錄的序列均相同。4菌株親緣性分析以多重耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥基因?yàn)榉肿訕?biāo)志做檢測結(jié)
8、果的聚類分析。33株多重耐藥銅綠假單胞菌中l(wèi)，23，27為同一克隆株，同時(shí)攜帶耐藥基因blaVIM和qacEAl．sull；12，25，
