s-腺苷蛋氨酸對(duì)lx-2肝星狀細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究

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1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文S--腺苷蛋氨酸對(duì)LX--2肝星狀細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究姓名：李昱江申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：諸葛宇征2012-05-31中文摘要S一腺苷蛋氨酸對(duì)LX-2肝星狀細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制的研究專業(yè)內(nèi)科學(xué)碩士研究生李昱江導(dǎo)師諸葛宇征教授摘要目的：觀察S．腺苷蛋氨酸(SAMe)對(duì)LX．2肝星狀細(xì)胞株(HSC)增殖的影響，探討S．腺苷蛋氨酸對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子131(TGF．p1)誘導(dǎo)的肝星狀細(xì)胞TGF．131．Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響。方法：體外培養(yǎng)人源LX．2．HSC，CCK．8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SAMe對(duì)其增殖的影響，并選擇其中3種有效濃度用于觀察S一腺苷蛋氨酸對(duì)轉(zhuǎn)

2、化生長(zhǎng)因子131(TGF一131)誘導(dǎo)的肝星狀細(xì)胞TGF．131．Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響。實(shí)驗(yàn)共分5組，A組：空白組，B組：TGF．131組(濃度為10ng／m1)，C組：SAMe(2mmol／L)+TGF一131組(濃度為10ng／m1)，D組：SAMe(4mmol／L)+TGF．131組(濃度為10ng／m1)，E組：SAMe(8mmol／L)+TGF-131組(濃度為10ng／m1)。采用western．blot方法檢測(cè)SAMe對(duì)TGF．131誘導(dǎo)的HSC表達(dá)I型膠原蛋白(COL一1)及TGF．131信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)分子Smad3、Smad4的影響。結(jié)果：(1)CCK．8實(shí)驗(yàn)表

3、明lmMSAMe組同對(duì)照組之問比較，LX．2肝星狀細(xì)胞增殖差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=-0．145)；其余各濃度組同對(duì)照組問的差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)，且不同濃度組之間的差異均有或近似有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)Western．blot檢測(cè)I型膠原蛋白結(jié)果表明，TGF一131組盟著增加了I型膠原蛋白的表達(dá)(P

4、組顯著抑制了HSC細(xì)胞內(nèi)Smad3的產(chǎn)生，且濃度越大抑制越明顯。(4)Western．blot檢測(cè)Smad4結(jié)果表明TGF—pl組顯著增加了Smad4的表達(dá)(氏o．05)，加入SAMe組顯著抑制了HSC細(xì)胞內(nèi)Smad4的產(chǎn)生(除C組外，其余P

5、theproliferationofLX--2hepaticstellatecellsanditsintracellularsignalingBYLIYu-jiangSupervisedbyProf．ZHUGEYu—zhengAbstract0bjective：ToinvestigatetheeffectsofSAMeontheproliferationofLX-2hepaticstellatecells，andexploretheroleofS-AdenosylmethionineonTGF-131stimulatedsignaltransductioninLX-2hepatics

6、tellatecellsMethods：TheLX一2HSCswereculturedinvitro．HSCsweretreatedwithdifferentconcentrationofSAMetodetecttheproliferationbyCCK一8．Accordingtothetestresults，threedosageswereselectedforthenextexperiments．Cellsweredividedintofivegroups：A：thecontrolgroup，B：TGF-131group(10ng／m1)，C：SAMegroup(2mmol／L)

7、+TGF-131group(10ng／m1)，D：SAMegroup(4mmol／L)+TGF一131group(10ng／m1)，E：SAMegroup(8mmol／L)+TGF一131group(10ng／m1)．SAMeandTGF一131wereaddedtothecellsandculturedfor24h．TheexpressionsoftypeIcollagenandSmad3、Smad4weredetectedbywestern．blot．