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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文玉米自交系苗期麥根酸分泌特性及其與SSR標(biāo)記的關(guān)聯(lián)分析姓名:董炳雪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):作物遺傳育種指導(dǎo)教師:張春慶20120614山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要玉米等禾本科植物能夠?yàn)榱诉m應(yīng)土壤鐵缺乏可以從根系分泌麥根酸類(lèi)物質(zhì),也叫植物鐵載體(PS)來(lái)活化螯合土壤中難以被植物吸收利用的鐵,從而解決自身鐵營(yíng)養(yǎng)缺乏問(wèn)題。本研究的目的是以123個(gè)玉米自交系為材料,了解不同玉米自交系苗期麥根酸分泌特性;選用153對(duì)均勻分布于玉米各條染色體且多態(tài)性高的SSR引物,結(jié)合玉米在正常(+Fe)和缺鐵(.Fe)條件下PS的分泌量,篩選與PS分泌量相關(guān)聯(lián)的標(biāo)記位點(diǎn),挖掘鐵營(yíng)
2、養(yǎng)高效玉米種質(zhì),為改良和選育優(yōu)良自交系奠定基礎(chǔ)。獲得以下主要結(jié)果:1.測(cè)定了123份玉米自交系在+Fe、.Fe條件下的PS分泌量,+Fe條件下分泌量平均為(7.281±0.45)mg/(g·8h),變幅為1.786—19.69mg/(g*8h),說(shuō)明各材料間PS分泌特性差異顯著;-Fe條件下平均值為(9.583_4-0.57)mg/(g·8h),變幅為2.414—24.53mg/(g*Sh):缺鐵誘導(dǎo)PS分泌平均增加值為(2.302±1.01)mg/(g*8h),增加變幅為0.037.11.41mg/(g*Sh),說(shuō)明玉米自交系對(duì)缺鐵脅迫的響應(yīng)差異明顯。2.聚類(lèi)分析可將+Fe、.F
3、e條件下的123個(gè)材料劃分為低、中、高三類(lèi)。其中+Fe條件下:各類(lèi)材料的PS分泌速率平均值分別為4.306mg/(g*Sh)、7.001mg/(g*8h)、11.79mg/(g*Sh),每類(lèi)材料占總材料數(shù)的比列為43.1%、26.8%、30.1%;.Fe條件脅迫后:各類(lèi)材料的PS分泌速率平均值分別為7.891mg/(g*Sh)、10.01mg/(g*Sh)、12.54mg/(g*Sh),每類(lèi)材料占總材料數(shù)的比列為46.3%、31.7%、22.O%。方差分析表明在兩種條件下各類(lèi)材料間分泌量差異極顯著,說(shuō)明同一時(shí)期不同材料之間PS的分泌能力有著較大的差異,具有較豐富的多樣性,并且缺鐵脅
4、迫后玉米自交系PS分泌量顯著增加,可為玉米選育耐缺鐵性品種提供豐富的親本材料。3.通過(guò)對(duì)12個(gè)玉米自交系PS晝夜分泌規(guī)律的研究,在+Fe條件下不同自交系出現(xiàn)的分泌峰值數(shù)量是不同的,根據(jù)分泌最高峰值的數(shù)量將材料劃分為兩類(lèi):一類(lèi)在7:00.10:00出現(xiàn)單峰;一類(lèi)出現(xiàn)雙峰峰,分別會(huì)在7:00.10:00和19:00.22:00時(shí)間段。說(shuō)明玉米自交系本身的PS分泌特性就存在著差異。在.Fe條件下,材料間PS分泌規(guī)律也存在著差異,根據(jù)分泌峰值的數(shù)量可以分為兩大類(lèi):一類(lèi)僅在7:00.10:00出現(xiàn)單峰,另一類(lèi)的材料出現(xiàn)雙峰,主峰和次峰。.Fe條件下自交系PS分泌量明顯提高,提高幅度因材料不同
5、而有所差異,成對(duì)t測(cè)驗(yàn)結(jié)果表明缺鐵脅迫對(duì)玉米自交系的PS分泌量有顯著的影響。以上結(jié)果表明缺鐵脅迫對(duì)玉米PS分泌特性及分泌模式都有顯著的影響。玉米自交系苗期麥根陵分泌特性及其與SSR標(biāo)記的關(guān)聯(lián)分析4.通過(guò)對(duì)6個(gè)具有不同晝夜分泌規(guī)律的自交系進(jìn)行遮光處理,表明:在收集時(shí)遮光不會(huì)影響PS晝夜分泌模式及分泌量,說(shuō)明在短暫遮光情況下玉米根系PS分泌不受光照的影響;在收集前對(duì)材料進(jìn)行遮光24h同樣也沒(méi)有影響PS晝夜分泌模式,但是一天中的PS分泌總量明顯升高。由以上兩個(gè)遮光試驗(yàn)結(jié)果可以得出光暗因子調(diào)控了誘導(dǎo)基因的表達(dá),從而使PS的分泌增量加。5.篩選了與PS分泌量相關(guān)聯(lián)的SSR標(biāo)記并且得到比較重要
6、的關(guān)聯(lián)位點(diǎn)。得到30個(gè)與PS分泌相關(guān)聯(lián)性狀顯著相關(guān)聯(lián)(尸<0.05)的標(biāo)記。其中,有4個(gè)位點(diǎn)和10個(gè)位點(diǎn)(次)與+Fe條件下PS分泌量相關(guān)聯(lián),解釋率為4.07%-21.19%,bnl91305-A195的減效表型效應(yīng)最大,為.1.69mg/(g*gh):3個(gè)位點(diǎn)和7個(gè)位點(diǎn)(次)與-Fe條件下PS分泌量相關(guān)聯(lián),解釋率為11.15"/'*.-25.90%,phi308707-A128的增效表型效應(yīng)最大,為“.42mg/(g·8h);3個(gè)位點(diǎn)和3個(gè)位點(diǎn)(次)與缺鐵脅迫誘導(dǎo)后PS增加量相關(guān)聯(lián),解釋率為9.480/o-18.19%,phi062-A170對(duì)缺鐵脅迫后PS分泌增加量的增效效應(yīng)最
7、大,為+1.74mg/(g*Sh)。在+Fe、.Fe兩種條件下檢測(cè)出的相同的標(biāo)記有3個(gè),表明這些位點(diǎn)與PS分泌相關(guān)基因相關(guān)聯(lián),其中,顯著關(guān)聯(lián)的位點(diǎn)有1個(gè),為bnl91564:兩種條件下檢測(cè)出的不相同的位點(diǎn)有7個(gè),說(shuō)明這些位點(diǎn)是與缺鐵誘導(dǎo)產(chǎn)生的基因相關(guān)聯(lián)的。關(guān)鍵詞:玉米;自交系;缺鐵;分泌特性;SSR標(biāo)記;關(guān)聯(lián)分析2山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文CrrainiImeousplantssecretephytosiderophores(PS)fromtheirroottoacqu