l-絲氨酸高產(chǎn)菌株篩選及搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化

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1、V873612分類q料緞中1古編q：ju7j8‘7‘：：2()()30q!豪張袈專蟲摯碩士學(xué)位論文L．絲氨酸高產(chǎn)菌株篩選及搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化BrccdingofL—serineproducingstrainandoptimizationoffermentationcondition研究生：謾慧林指導(dǎo)教師：楊海燕副教授，合作指導(dǎo)教師崔盎生副研究亟申請學(xué)位類別：工學(xué)碩士專業(yè)領(lǐng)域名稱：食品科學(xué)與工程研究方向：笪墨迂塑盟丕廛亞塞當查』周一一所在學(xué)院：食、％科學(xué)學(xué)院新疆刊々魯小齊o(二)／’、{Ij“JJ摘要本文考察了L絲

2、氨酸基因工程菌株口Mvf6口c把脅MmⅢC-1lA的特點，初步研究了其搖瓶產(chǎn)酸條件和產(chǎn)酸能力。然后對其進行誘變處理，獲得產(chǎn)酸較高的色氨酸營養(yǎng)缺陷型，并對其搖瓶發(fā)酵條件進行優(yōu)化，提高L絲氨酸的產(chǎn)景。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：探明基因工程菌株日，w泐c把ri“m肋ⅢC．1lA為非營養(yǎng)缺陷型，具有絲氨酸分解能力缺陷，能阻斷絲氨酸的分解，抗氯霉素、鏈霉素。用MPB活化富集菌體比用水活化富集菌體產(chǎn)酸高，實驗選擇濃度為0．3％K2P0t作為緩沖劑，，有機氮源實驗選擇酵母膏，無機氮源選擇(NH4)2S04，CaC03與發(fā)酵培養(yǎng)

3、基分開滅菌。在仔細研究L絲氨酸生物合成的基礎(chǔ)上，對基因工程菌丑，w曲口c把一“m伽ⅢC．11A進行誘變，結(jié)果發(fā)現(xiàn)單純用皿硝基胍處理，菌株容易恢復(fù)突變，通過采用物理和化學(xué)結(jié)合誘變，最后獲得一株色氨酸營養(yǎng)缺陷型穩(wěn)定且產(chǎn)酸較高的突變菌株，將此菌株命名為c34。對C34進行搖瓶優(yōu)化實驗，確定較好的搖瓶發(fā)酵條件和培養(yǎng)基配方。種子培養(yǎng)基的配方為酵母膏1％，蔗糖濃度3％，K2P040．3％，發(fā)酵條件為初始pH為8．0，種齡為32—37有利于產(chǎn)酸。發(fā)酵培養(yǎng)基配方：(Nl{4)2S04為3％，接種景10％、酵母膏質(zhì)量濃度1．2％

4、、富馬酸質(zhì)量濃度2％，蔗糖濃度為4％，發(fā)酵條件為：初始pH為8．4，500m】三角瓶裝液量為20ml。關(guān)鍵詞：L絲氨酸，發(fā)酵，重組菌，誘變AbstractThisarIickinspectedtllecharacteristicofI，seIillegeneengineeringstraill口r即脅c耙，fHm伽啪C-11A'andprelimillarystudieditsn鷦k-shakingfe珊entationcondiIion柚ditspIoduciⅡgL．sedneabilityfTllencaI

5、Iies∞toitiⅡducesmutati咖orchror∞so衄lchangepm。e醛ilIg，obtainstl坼tryptophannutrjⅡonnawt0obtainh蟾hL∞fine，蛐d叩timizesIheconditionofitsflask-sha“ngfe砷entati仰，incre船inglheI，seIil瞻．Themainre鴕archsconlent柚dthe托sIlltafeasfb玎ows：1．1n印ectinglhatgeneengineeringstrain口陀訂加c據(jù)

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7、s04isbio_horgaⅡicsour∞，CaC03sterili扯snotWithmedia．2．Ontbecondi曲nofcarefllllystIldyingtheL辯“nebiosynthesis，mutating也ecb卸giⅡgene蛐g(shù)ime血g眥c把棚助聊C-l執(zhí)，tbc瞄tdt曲playthatoIIly砌tationbyNGT，tlles婦iⅡiseasyt0reVersemutanon，bu“：ombinati仰mutationtbewayofphysicsandtlIechemic

8、al，finallyobtaillsatryptophannutfitionnaw，whichsteadilyandpmducehiglILs塢inc，wenmeditC34．3．Carriesontllenask_sbakiⅡg0ptimizati∞t0C34，toget900dflask-shakingfe咖entaIi蚰conditionandcunuremedi哪fo姍u】a．