安絡(luò)小皮傘液體發(fā)酵條件的優(yōu)化及其活性的研究

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1、OPTIMIZATl0NOFLIQUIDFERM匣N1ATIONCONDITIONSANDTHEACTⅣITIESOFMfARAsMIUsANDRoSACEUSADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniVers時iIlPartialFul舢hentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByZhnngJi規(guī)g{i譏gSupeIVisor：Prof．ZhuXianf色ngMay，2014關(guān)于學(xué)位論文獨創(chuàng)聲明和學(xué)術(shù)誠信承諾本人向河南大學(xué)提出碩士學(xué)位申請。本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文

2、是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨立完成的，對所研究的課題有新的見解。據(jù)我所知，豫丈中特別加以說明、標注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括其他人為獲得任何教育、科研機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。在此本人鄭重承諾：所呈交的學(xué)位論文不存在舞勢作偽行為，文責自負。學(xué)位申請人(學(xué)位論文作者)簽名：互控盛蠱一一．201牟年歲月／牛日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)使用授權(quán)書本人經(jīng)河南大學(xué)審核批準授予碩士學(xué)位。作為學(xué)位論文的作者，本人完全了解并同意河南走學(xué)有關(guān)保留、使用掌位論文的要求。即河由文學(xué)有權(quán)自國宰圖$鑲

3、、科研信息機構(gòu)、數(shù)據(jù)收集機構(gòu)和本校圖書館等提供學(xué)位論文(紙質(zhì)文本和電子文本)以供公眾檢索、查閱。本人授權(quán)河南大學(xué)出于宣揚、展覽學(xué)校學(xué)術(shù)發(fā)展和進行學(xué)術(shù)交流等目的，可以采取影印、縮印、掃描和拷貝等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文(紙質(zhì)文本和電子文本)。(涉及保密內(nèi)容的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位獲得者(學(xué)位論文作者)簽名：三絲墾＆201牛年與月，牛日學(xué)位論文指導(dǎo)教師簽名：20l午年籮月，歲日摘要安絡(luò)小皮傘菌是我國傳統(tǒng)的藥用真菌，不僅在藥用方面有很好的功效，在食用和保健方面有很高的價值，因此，對小皮傘菌液體深層發(fā)酵及其藥理活性的研究具有重要的意義和價值。本實驗通過單因素實驗和正交試驗對小皮傘菌發(fā)

4、酵條件進行優(yōu)化，在此基礎(chǔ)上對小皮傘菌進行胞內(nèi)外多糖抗氧化活性的測定，并運用小鼠實驗分析了小皮傘菌發(fā)酵提取物鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜的藥理作用。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下：1．以提高安絡(luò)小皮傘菌生物量為目的，對小皮傘菌培養(yǎng)基及其發(fā)酵條件進行系統(tǒng)的優(yōu)化。對C源和N源種類進行篩選，在此基礎(chǔ)上對其濃度進行優(yōu)化，通過正交試驗對小皮傘菌培養(yǎng)基成分進行優(yōu)化，最終確立了最優(yōu)培養(yǎng)基為玉米粉：3％、麩皮：3％、MgS04：O．1％、KH2P04：O．3％、VBl：10mg、水：1000mL：通過對小皮傘菌液體發(fā)酵時間、溫度、轉(zhuǎn)速及其培養(yǎng)基的初始pH、接種量、裝液量進行篩選，確立了最適發(fā)酵條件為：發(fā)酵時間：6d、溫度：25℃、轉(zhuǎn)

5、速：150r／min、初始pH：5、接種量：9％、裝液量：90mL。2．通過發(fā)酵獲得安絡(luò)小皮傘菌絲體及發(fā)酵液，采取醇沉法提取發(fā)酵濾液胞外多糖，采用水提醇沉法提取菌絲體胞內(nèi)多糖，以抗壞血酸為對照，通過體外實驗研究安絡(luò)小皮傘胞外多糖、胞內(nèi)多糖對羥基自由基、超氧陰離子、DPPH自由基的清除作用，評定其抗氧化性能。結(jié)果表明安絡(luò)小皮傘胞外多糖、胞內(nèi)多糖對羥基自由基、DPPH·均具有顯著的清除作用，且清除羥基自由基能力胞內(nèi)多糖>胞外多糖，清除DPPH·能力胞外多糖>胞內(nèi)多糖，對·o：‘有清除作用但不明顯。三種不同的體外自由基清除體系證明了小皮傘菌多糖具有較強的抗氧化活性。3．通過熱板實驗，測定給藥后1

6、h小鼠的痛閾，結(jié)果表明給藥后小鼠熱板痛閾值較給藥前和生理鹽水組相比延長，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，其中對照組和中濃度組效果更好，說明安絡(luò)小皮傘菌具有鎮(zhèn)痛作用。通過小鼠懸尾實驗，對小鼠硝酸甘油造模后，小鼠靜止時間縮短，與生理鹽水組比較有差異，給藥后小鼠靜止時間延長，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義，其中安定組和安絡(luò)小皮傘菌中濃度組更為明顯，表明安絡(luò)小皮傘菌具有鎮(zhèn)靜作用。4．通過毒理實驗，給小鼠灌胃劑量相當于臨床用藥200倍的小皮傘菌發(fā)酵提取物，3天內(nèi)，小鼠均未出現(xiàn)活動異常、死亡等現(xiàn)象；實驗組與對照組比較，小鼠體重增長無顯著差異，結(jié)果表明小皮傘菌無明顯的毒副作用。關(guān)鍵詞：安絡(luò)小皮傘菌，發(fā)酵條件，抗氧化活性，鎮(zhèn)痛

7、鎮(zhèn)靜作用，毒理IIABSTRACT朋毋嬲mf淞繃挑s口鉀淞isachinesenaditionalmedicinal如ngus，whichh勰ph姍acological，ediblenessalldheaItllcare如nctions．Sot11estudyofM打儺肌f淞冊矗r∞口∞淞liquidsubme瑪edfe肌entationa11ditsphamacologicalactiVitieshasiInporta