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《桃果實(shí)ppcuznsod、ppexp和pppip1基因的克隆與表達(dá)分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)MolecularCloning1H’r’andExpresslon0tPpCuZnSOD,PpEXPandPpPIP1GenesofPrunuspersicaFruitThesissubmittedtongdaoAgrkulturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyWuJunshuai(DepartmentofAgronomy)Supervisor：LiPeihuanDuanYanxinQingdao．ChmaJune，2013萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人
2、在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書面使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。一躲貓c忡時(shí)間：矽侈年厶侈日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位
3、論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究嵫：貉沖rlJ研究生簽名：翮f銣繇麓磊補(bǔ)時(shí)同：砂I)年6竅f宇日時(shí)間：秒侈
4、年么月侈日萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要摘要jt,Jor究以硬肉桃新品種‘雙久紅’為試材，以常規(guī)品種‘川中島白桃’為對照，通過對不同時(shí)期及不同外源激素處理的果實(shí)硬度及乙烯釋放量的研究和桃果實(shí)PpCuZnSOD．eprⅨP和助P伊』基因的克隆與表達(dá)分析，旨在探清硬肉桃果實(shí)成熟后變軟慢的分子機(jī)制，為桃新品種的選育和推廣，全面提高桃樹栽培的經(jīng)濟(jì)效益提供理論依據(jù)。試驗(yàn)研究結(jié)果如下：乙烯弄'J(50mg／L)、NAA(50mg&)和ABA(50mg／L)3種外源激素處理能促進(jìn)‘雙久紅
5、’果實(shí)的軟化，而在‘川中島白桃’果實(shí)中只有乙烯利和NAA作用較明顯；乙烯利和ABA處理促進(jìn)了‘川中島白桃’乙烯釋放高峰提前到來，NAA處理則使峰值增大，在‘雙久紅’中乙烯利和NAA提高了乙烯的釋放量，而ABA卻完全抑制了乙烯的釋放。本試驗(yàn)獲得了全長665bp，編碼152個(gè)氨基酸的桃果實(shí)銅鋅超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全長cDNA序列(GenBank登錄號：JX217743)，在此基礎(chǔ)上，成功構(gòu)建了該基因的原核表達(dá)載體pET-32a(+)．PpCuZnSOD，并在大腸桿菌中得到高效表達(dá)，層析純化后獲得活性為5．23×103U／nag，pr0的CuZnSOD酶。熒光定量RT．PCR結(jié)
6、果表明：成熟前后20d過程中PpCuZnSOD基因在成熟后表達(dá)量高于成熟前，且在‘雙久紅’中的表達(dá)豐度顯著高于‘JIl中島白桃’的，該基因組織特異性不顯著；在‘J
7、l中島白桃’中，NAA處理在前期有基因表達(dá)高峰，乙烯利處理的高峰出現(xiàn)在后期且高于NAA處理的，ABA則明顯抑制了該基因的表達(dá)，在‘雙久紅’中，對基因表達(dá)影響最大的乙烯利處理，其次為NAA處理，ABA處理無顯著影響。獲得了全長1142bp，編碼252個(gè)氨基酸的桃果實(shí)擴(kuò)展蛋白基因ep戤7,的全長cDNA序列，在此基礎(chǔ)上，成功構(gòu)建了該基因的原核表達(dá)載體pET-32a(+)．epEXe，并在大腸桿菌中得到表達(dá)。熒光定量RT—PCR結(jié)果
8、表明：成熟期前后PpF_．XP基因出現(xiàn)兩個(gè)表達(dá)高峰，并且在幼果中的表達(dá)量高于其他組織器官；在‘川中島白桃’中，該基因表達(dá)逐漸下降，乙烯利處理能夠促進(jìn)基因表達(dá)，在‘雙久紅’中，乙烯利和NAA能夠明顯促進(jìn)基因表達(dá)，ABA對該基因的表達(dá)無顯著影響。獲得了全長1163bp，編碼290個(gè)氨基酸的桃果實(shí)水通道蛋白基因聊J全長cDNA序列(GenBank登錄號：JX317646)，在此基礎(chǔ)上，成功構(gòu)建了該基因的原核表達(dá)載體pET-32a(+)一印P口J。熒光定量RT．PCR結(jié)果表明：成熟前后20d過程中印P儼．，基因在‘川中島白桃’中的表達(dá)量高于‘雙久紅’的；乙烯利促進(jìn)該基因的表達(dá)，NAA在‘川中島白
9、桃’中主要表現(xiàn)為抑制基因表達(dá)，ABA在‘雙久紅呻抑制基因表達(dá)。關(guān)鍵詞：桃果實(shí)；PpCuZnSOD；PpEXP；忍憂PJj基因；克隆；表達(dá)萬方數(shù)據(jù)青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文英文摘要AbstractThefruitsofpeach‘KawanakajimaHakuto’and‘Shuangiiuhong’wereusedtostudyfruitfirmnessandethylenereleasequantityofdifferenttim
